Пептидни модификации
Тестване на пептиди
Ролята на пептидния тест
Пептидният тест определя чистотата, молекулно тегло, коректност на последователността, и наличието на примеси от пептиди. Това е от решаващо значение за научните експерименти, разработване на лекарства и клинични приложения, защото: пептиди с висока чистота (e.g. >95%) може да намали експерименталните смущения и да подобри надеждността на данните. Примесните пептиди могат да повлияят на биологичната активност или дори да предизвикат имунен отговор (e.g. примесите в лекарствата могат да причинят алергия или токсичност).
Често използвани анализи:
HPLC (Високоефективна течна хроматография): анализира чистотата на пептида и състава на примесите.
Масспектрометрия (MS): Определете молекулното тегло и проверете точността на последователността.
Анализ на аминокиселините (AAA): определят количествено аминокиселинния състав на пептида.
Проверка на биологичната активност и функция на пептидите
Осигурете стабилност на пептидните реагенти
Осигурете стерилност и съответствие с ендотоксините
Общи пептидни тестове
Това включва главно чистотата на пептидите; тестване на съдържанието; тестване за стерилност; PH стойност; тестване на влага; тестване за разтворимост и други аспекти.
Стерилитет
Директен метод на инокулация: инокулирайте и в двете среди, инкубирам за 14 дни и наблюдавайте за микробен растеж.
Метод на мембранна филтрация: Разтворът се прекарва през стерилна филтърна мембрана (размер на порите 0.22 μm), микроорганизмите са били уловени върху мембраната, който се прехвърля в хранителната среда за инкубиране.
ATP биолуминесценция: Откриване на АТФ, произведен от микробен метаболизъм, бърз (часове) но изисква валидиране.
Чистота
RP-HPLC: Въз основа на разликата в хидрофобността на пептидите, разделяне на колона C18/C8 и откриване чрез UV или MS.
MS: Определяне на молекулното тегло на пептида (MALDI-TOF или ESI-MS), проверка на съответствие с теоретичните стойности и откриване на модификации или примеси.
Принцип на анализ на аминокиселините: след киселинна хидролиза на пептида, количествено определя състава на всяка аминокиселина и проверява чистотата чрез сравняване с теоретичната стойност.
SDS-СТРАНИЦА: Разделяне чрез електрофореза и наблюдение на единични ивици чрез оцветяване с брилянтно синьо или сребро на Caulmers.
съдържание
Елементен анализ: Чрез разлагане на сложни физически процеси на много малки „метапроцеси“, всеки „метапроцес“ следва същия закон, проблемът се опростява чрез анализиране на тези „мета-процеси“ и прилагане на необходимите математически методи.
Запазване на масата: Във всяка физическа или химическа реакция, сумата от масите на веществата, участващи в реакцията, е равна на общата маса на продуктите след реакцията.
Нормализация на площта:Това е метод, който се дефинира математически като преобразуване на абсолютната стойност на физическа система в относителна стойност. Чрез нормализиране, изчисленията могат да бъдат опростени и стойността може да бъде ефективно намалена.
Тестване на пептиди
Вземете оферти за тестване на пептиди, за да проследите точно осъществимостта на вашия експериментален процес.
