Peptide Modifications
Testiranje peptida
Uloga testiranja peptida
Ispitivanje peptida određuje čistoću, molekularne težine, ispravnost sekvence, i prisustvo nečistoća peptida. Ovo je ključno za naučno istraživačke eksperimente, razvoj lijekova i kliničke primjene jer: peptidi visoke čistoće (npr. >95%) može smanjiti eksperimentalne smetnje i poboljšati pouzdanost podataka. Peptidi nečistoće mogu uticati na biološku aktivnost ili čak izazvati imunološki odgovor (npr. nečistoće u lijekovima mogu uzrokovati alergiju ili toksičnost).
Često korišteni testovi:
HPLC (Tečna hromatografija visokih performansi): analizira čistoću peptida i sastav nečistoća.
Mass Spectrometry (MS): Odredite molekulsku težinu i provjerite tačnost sekvence.
Analiza aminokiselina (AAA): kvantitativno odrediti sastav aminokiselina peptida.
Provjera biološke aktivnosti i funkcije peptida
Osigurati stabilnost peptidnih reagensa
Osigurajte sterilnost i usklađenost s endotoksinom
Uobičajeno testiranje na peptide
Uglavnom uključuje čistoću peptida; testiranje sadržaja; testiranje sterilnosti; PH vrijednost; ispitivanje vlage; ispitivanje rastvorljivosti i drugi aspekti.
Sterilnost
Metoda direktne inokulacije: inokulirati u oba medija, inkubirati za 14 dana i posmatrajte rast mikroba.
Metoda membranske filtracije: Otopina je propuštena kroz sterilnu filter membranu (veličina pora 0.22 μm), mikroorganizmi su bili zarobljeni na membrani, koji je prebačen u podlogu za kulturu za inkubaciju.
ATP bioluminiscencija: Detekcija ATP-a proizvedenog mikrobnim metabolizmom, rapid (sati) ali zahtijeva validaciju.
Čistoća
RP-HPLC: Na osnovu razlike u hidrofobnosti peptida, odvajanje na C18/C8 koloni i detekcija UV ili MS.
MS: Određivanje molekulske težine peptida (MALDI-TOF ili ESI-MS), provjera slaganja sa teorijskim vrijednostima i otkrivanje modifikacija ili nečistoća.
Princip analize aminokiselina: nakon kisele hidrolize peptida, kvantifikovati sastav svake amino kiseline i potvrditi čistoću upoređivanjem sa teoretskom vrednošću.
SDS-PAGE: Odvajanje elektroforezom i promatranje pojedinačnih traka pomoću Caulmers Brilliant Blue ili Silver bojenja.
sadržaj
Elementarna analiza: Razlaganjem složenih fizičkih procesa na mnogo sićušnih "metaprocesa", svaki “metaproces” prati isti zakon, problem se pojednostavljuje analizom ovih "metaprocesa" i primjenom potrebnih matematičkih metoda.
Očuvanje mase: U bilo kojoj fizičkoj ili hemijskoj reakciji, zbir masa supstanci uključenih u reakciju jednak je ukupnoj masi proizvoda nakon reakcije.
Normalizacija područja:Ovo je metoda koja je matematički definirana kao pretvaranje apsolutne vrijednosti fizičkog sistema u odnos relativne vrijednosti. Kroz normalizaciju, proračuni se mogu pojednostaviti, a vrijednost efektivno smanjiti.
Testiranje peptida
Dobijte ponude za testiranje peptida da biste precizno pratili izvodljivost vašeg eksperimentalnog procesa.
