Mga Madalas Itanong

Simple hanggang Complex mula Milligrams hanggang Kilograms

Custom Quote Request


How to store peptides?

Mga Lyophilized Peptides

Para sa pangmatagalang imbakan ng peptides, Inirerekumenda namin na iimbak ang mga ito bilang isang solidong pulbos. Ang mga lyophilized peptides ay maaaring maimbak sa -20°C o mas mababa na may kaunting pagkasira. Pinapayuhan ang mga customer na muling suriin ang mga customized na peptides bawat isa 2 taon mula sa petsa ng paglabas ng kontrol sa kalidad.

Mga peptide sa solusyon

Ang mga peptide sa solusyon ay hindi gaanong matatag at madaling masira. Ang mga may tubig na solusyon na ginagamit upang matunaw ang mga peptide ay dapat na sterile at dalisay.

Sa solusyon, maaaring masira ang isang tiyak na halaga ng peptide, depende sa mga amino acid na nasa sequence. Ang ilang mga halimbawa ay nakalista sa ibaba:
– Mga peptide na naglalaman ng methionine, Ang mga residue ng cysteine ​​o tryptophan ay dapat magkaroon ng limitadong oras ng pag-iimbak sa solusyon dahil sa oksihenasyon. Ang mga peptide na ito ay dapat na matunaw sa isang walang oxygen na solvent. –
Ang glutamine at asparagine ay maaaring ma-deamidated sa glutamic acid at aspartic acid, ayon sa pagkakabanggit. –
Ang cysteine ​​​​ay maaaring sumailalim sa oxidative cyclization upang bumuo ng cysteine-cysteine ​​disulfide bond (na maaaring mabuo sa loob o sa pagitan ng mga disulfide bond). –
Ang sinisingil na mga nalalabi (aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine, histidine) ay hygroscopic (sumisipsip ng tubig mula sa hangin) at may posibilidad na bumuo ng malapot, malinaw na langis. Ang pisikal na pagbabagong ito ay maaaring hindi makaapekto sa likas na katangian ng peptide. Inirerekomenda na ang mga naturang peptides ay lyophilized upang alisin ang mga bakas na dami ng tubig, pagkatapos ay degassed na may nitrogen upang matiyak na walang singaw ng tubig sa vial, at pagkatapos ay mabilis na naka-cap.

Upang maiwasan ang pinsala mula sa paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw, inirerekomenda namin na i-dissolve lang ng mga user ang dami ng peptide na kinakailangan para sa kasalukuyang eksperimento. Ang labis na solusyon ay dapat na nakaimbak sa ≥ -20 o C hanggang kinakailangan.

Iwasan ang kahalumigmigan.
Dahil ang kahalumigmigan ay makabuluhang binabawasan ang pangmatagalang katatagan ng mga peptide, Inirerekumenda namin na i-equilibrate ang mga peptide sa isang desiccator sa temperatura ng silid bago buksan ang mga vial. Sa pagkumpleto ng peptide dispensing, ang natitirang mga peptide sa tubo ay dapat na dahan-dahang linisin ng walang tubig na nitrogen, pagkatapos ay ang lalagyan ay dapat na may takip, selyadong may sealing film, at nakaimbak sa -20°C.

Paano mo matutunaw ang mga peptide?

Ang mga katangian ng solubility ng iba't ibang mga peptide ay malaki ang pagkakaiba-iba. Mga nalalabi tulad ng alanine (Ala), cysteine (Cys), isoleucine (Sa), leucine (Leu), methionine (Nakilala), phenylalanine (Sinabi ni Phe), at valine (Val) idagdag sa hydrophobicity at solubility ng peptide sa mga may tubig na solusyon, at inirerekomenda na sundin ng customer ang mga alituntuning ito kapag nagko-customize ng peptides.

Mga Katangian ng Solubility

Ang solubility ng peptides ay lubos na nakasalalay sa pagkakasunud-sunod ng amino acid. Natural na hydrophobic peptides (A, F, G, V, L, ako, M, W, P na may mas mataas na hilig) nangangailangan ng mga organikong solvent para sa solubilization. Mga acidic na peptides (mas mataas na hilig para sa D, E sa pagkakasunud-sunod ng peptide) nangangailangan ng mga pangunahing may tubig na buffer para sa solubilisasyon, habang ang mga pangunahing peptides (mas mataas na propensidad para sa K, H, at R) nangangailangan ng acidic aqueous buffer para sa solubilization.

Pagpili ng Solvent

Dahil sa mga limitasyon ng iyong assay, inirerekumenda namin ang paggamit ng mga sumusunod na alituntunin upang matukoy ang pinakamahusay na solvent para sa mga solubilizing peptides

Hydrophobic Peptides

Upang muling matunaw ang hydrophobic peptides, idagdag 100 µL ng DMSO at sonicate hanggang sa mabuo ang isang homogenous na solusyon. Susunod, idagdag ang buffer na iyong pinili upang makagawa ng a 1 mg/mL na solusyon (mas mataas ang konsentrasyon ng peptide, mas malaki ang halaga ng DMSO na kinakailangan).

Hydrophilic (acidic) Mga peptide

Upang muling matunaw ang acidic peptides, idagdag 100 µL ng 1% NH 4 OH to 1 mg ng peptide at vortex. Kapag malinaw na ang solusyon, idagdag ang buffer na iyong pinili upang makagawa ng a 1 mg/mL na solusyon.

Hydrophilic (Basic) Mga peptide

Upang muling buuin ang isang pangunahing peptide, magdagdag ng distilled water sa 1 mg ng peptide at vortex.

Ano ang pagkakaiba sa pagitan ng net vs gross peptide weight?

Ang pamantayan ng industriya ay ang maghatid ng mga peptide sa isang lyophilized na anyo bilang isang Gross weight. Kabuuang timbang ng peptide ay ang kabuuang bigat ng lahat ng sangkap na nasa lyophilized powder. Kabilang dito ang peptide ng interes, anumang peptide impurities, tubig, mga natitirang solvents, at counterion.

Sa kabaligtaran Net timbang ng peptide, kinakalkula mula sa Net na nilalaman ng peptide, ay ang bigat ng ang peptide lamang sangkap na naroroon sa lyophilized powder. Nag-aalok ito ng mas tumpak na konsentrasyon ng iyong mga kasunod na solusyon sa peptide. Kaya naman, inirerekomenda namin ang mga halaga ng timbang ng net peptide para sa Custom na Peptide mga order.

Nilalaman ng Net Peptide Ang pagsukat ay isinasagawa sa pamamagitan ng pagtatasa ng amino acid (AAA; limitado ang katumpakan ngunit nangangailangan ng mababang halaga ng materyal) o elemental analysis (CHN; nangangailangan ng milligrams ng peptide ngunit mas tumpak). Ang parehong mga pamamaraan ay nagbubunga ng isang porsyento na halaga (ibig sabihin., 75% nilalaman ng net peptide).

Ang Net Peptide Content ay depende sa dami ng counterion na naroroon*, na nakasalalay sa pagkakasunud-sunod ng peptide. Sa totoo lang, mas mataas ang singil ng peptide, mas mababa ang nilalaman ng peptide

*Tandaan: Ang elementong ginamit upang kalkulahin ang net peptide content ay batay sa peptide counter-ion. Ginagawa ito upang matiyak na ang counter-ion ay hindi nag-aambag sa halaga ng nilalaman ng peptide. Halimbawa, kapag ang TFA o acetate ang counter-ion, nitrogen ay ginagamit dahil ito ay matatagpuan sa peptide ngunit hindi sa TFA o acetate. Maaaring gamitin ang Carbon o Nitrogen kapag ang chloride ay ang counter-ion para sa parehong dahilan.

Mga kalkulasyon ng Net Peptide Weight:

Dami ng Net Peptide (kabuuang peptide) — paraan na ginagamit namin para sa mga net custom na peptide order.

I-multiply ang Net Peptide Content Porsyento (desimal na anyo) sa pamamagitan ng Peptide Gross Weight, upang makuha ang halaga ng Net Peptide Quantity (kabuuang peptide).

Halimbawa:
Para sa 5 mg gross peptide/vial:
Ang nilalaman ng peptide net ay 84%.
Eksaktong dami ng kabuuang peptide = 0.84*5 mg=4.2 mg kabuuang peptide

Net Peptide ng Interes Dami—pinaka tumpak — maaaring gamitin ng customer ang pamamaraang ito nang mag-isa para kalkulahin ang peptide ng interes.

I-multiply ang Net Peptide Content Porsyento ng Peptide Gross Weight, at ang Peptide Purity (sa pamamagitan ng HPLC), upang kalkulahin ang eksaktong halaga ng peptide ng interes na mayroon ka. Ang net peptide percent (desimal na anyo) ay pinarami ng kadalisayan ng peptide (desimal na anyo).

Halimbawa:
Para sa 5 mg gross peptide/vial na may:
Ang nilalaman ng peptide net ay 84%.
Ang eksaktong halaga ng peptide ng interes ay = 0.84*0.96*5 mg=4.03 mg

Anong uri ng chemistry ang ginagamit mo?

Gumagamit ang MOL Changes ng solid-phase Fmoc chemistry kaysa sa BOC chemistry. Binibigyang-daan ng chemistry ng Fmoc ang pag-alis ng mga nagpoprotektang grupo gamit ang mga banayad na kondisyon sa panahon ng pagpapahaba ng peptide, habang ang BOC chemistry ay nangangailangan ng paggamit ng isang malakas na acid upang alisin ang mga nagpoprotektang grupo sa panahon ng peptide elongation. Bukod pa rito, Ang kimika ng Fmoc ay gumagamit ng trifluoroacetic acid (TFA) upang alisin ang peptide mula sa dagta, habang ang BOC chemistry ay gumagamit ng hydrofluoric acid (HF). Walang kulay ang HF, lubhang kinakaing unti-unti, at isang contact poison.

Samakatuwid, Ang MOL Changes ay gumagamit ng Fmoc chemistry dahil ito ay mas banayad, nababaluktot, at maraming nalalaman kumpara sa kimika ng BOC.

Paano ko makalkula ang molarity ng aking peptide?

Ang molarity ay tumutukoy sa konsentrasyon ng molar ng isang solusyon, na kung saan ay ang bilang ng mga moles ng solute na natunaw 1 litro ng solusyon, ipinahayag bilang mol/L, o M.

Molarity [M] = Misa / (Dami x Molar Mass); Nunal = Konsentrasyon (g/L) x Dami (L)/MW (g/mol)

Halimbawa:
Ibinigay: 1mg ng dry peptide powder na may MW: 20KDa (Ang molar mass ng peptide ay 20 g/mol)
Upang matukoy ang molarity na may alam na masa at kilalang volume
Para sa isang 1ml na solusyon ng peptide na ito:
Molarity = Masa (0.001g) / (dami (0.001L) x Molar Mass (MW 20,000) = 50 µM

Upang matukoy ang masa upang makamit ang isang tiyak na molarity:
Kung para sa iyong assay, kailangan mo ng 0.01mM working peptide solution sa 1ml ng tubig, pagkatapos ay kalkulahin ang kinakailangang masa tulad ng sumusunod:

Mass = Molarity x Volume x Molar Mass
Mass = 0.01mM x (1/1000 L) x 20,000g/mol = 0.0002g

Kaya naman, kakailanganin mo ng 0.2mg/ml ng peptide upang magkaroon ng gumaganang solusyon na 0.01mM.

Sa anong anyo inihahatid ang mga peptide?

Naghahatid kami bilang lyophilized o raw powder at peptide solution.

Paano ko malalaman kung matutunaw ang aking peptide?

Ang solubility ng isang peptide sa isang naibigay na solvent ay nakasalalay sa pagkakasunud-sunod ng amino acid at kadalasang mahirap hulaan.. Sa kaso ng catalog peptides, ang impormasyon ng solubility ay nakalista sa QC datasheet. Para sa mga pasadyang peptide, pakitingnan ang seksyong pinamagatang “Paano ko dapat matunaw ang aking peptide”.

Ano ang pagkakaiba sa pagitan ng nilalaman ng peptide at kadalisayan ng peptide?

Ang nilalaman ng peptide ay hindi isang indikasyon ng kadalisayan ng peptide dahil ito ay dalawang magkahiwalay na sukat. Ang kadalisayan ay tinutukoy ng analytical HPLC at nagpapahiwatig ng pagkakaroon/kawalan ng iba pang mga peptidic contaminants (i.e. pinutol na mga peptide).

Tinutukoy ng nilalaman ng net peptide ang aktwal na dami ng peptide (peptide ng interes pati na rin ang peptide contaminants) naroroon sa sample. Ang nilalaman ng net peptide ay tradisyonal na sinusukat sa pamamagitan ng pagsusuri ng Amino acid (AAA; limitado ang katumpakan ngunit nangangailangan ng mababang halaga ng materyal) o elemental analysis (CHN; nangangailangan ng milligrams ng peptide ngunit mas tumpak).

Paano mo karaniwang nililinis ang iyong mga peptide?

Ang mga peptide ng MOL Changes ay karaniwang nililinis ng reverse-phase preparative HPLC, gamit 2 buffer na naglalaman ng 0.1% trifluoroacetic acid (TFA). Ang unang buffer (Buffer A) ay binubuo ng 0.1 % TFA sa deionized na tubig at ang pangalawang buffer (Buffer B) ay binubuo ng 0.1 % TFA sa acetonitrile (ACN).

Sa pangkalahatan, ang mga krudo na peptide ay unang natutunaw sa isang solusyon ng alinman sa Buffer A, ilang halaga ng Buffer B, o isang organikong polar solvent tulad ng DMSO. Kung gumamit ng organic polar solvent o Buffer B, ang malinaw na solusyon na ito ay unang matunaw ng Buffer A. Susunod, ang peptidic solution ay sinasala at nilo-load sa preparative HPLC system. Paggamit ng optimized method gradient, Ang mga fraction ay pagkatapos ay kinokolekta batay sa mga pagbabasa ng absorbance. Ang bawat fraction ay susuriin sa pamamagitan ng isang analytical HPLC upang matiyak na ang kadalisayan ng bawat fraction ay nakakatugon sa kinakailangang detalye ng kadalisayan..

Ang mga "purong" fraction na ito ay pinagsama-sama at lyophilized. Ang "dalisay" na pulbos ay sinubok para sa parehong kadalisayan at pagkakakilanlan upang matiyak na ang tamang peptide ay ginawa.

Sa wakas, isang independiyenteng grupo ng QC sa AnaSpec ang muling sumusubok sa peptide upang matiyak na ang lahat ng mga katangian ng pagsubok ay nakakatugon sa mga kinakailangang detalye.

Paano ko isusulat ang aking peptide sequence termini?

Ang internasyonal na katawagan na ginamit para sa sequence termini ay ang mga sumusunod:

– N-terminus: Ang ibig sabihin ng H ay libreng amine (NH2-), Ang ibig sabihin ng Ac ay acetyl [CH3C(O)-NH-], Ang ibig sabihin ng Pyr ay pyroglutamic acid
– C-terminal: Ang ibig sabihin ng OH ay libreng acid (-COOH), Ang ibig sabihin ng NH2 ay amide [-CONH2]

– Ang mga pagbabago sa side chain ng mga amino acid ay inilalarawan sa panaklong pagkatapos ng kaukulang amino acid. Halimbawa; phosphorylated serine = S(PO3H2) o epsilon-N-acetylated lysine = K(Ac)

Ano ang isang peptide counterion?

Sa panahon ng paggawa ng peptide, Ang mga ion sa synthesis at purification solution ay nagbubuklod sa sinisingil na amino acid side chain ng peptide, bumubuo ng mga asin. Ang mga ion na ito ay kilala bilang mga peptide counterion at tumutulong na balansehin ang singil ng peptide.

Trifluoroacetic acid (TFA) ay karaniwang ginagamit sa peptide synthesis at purification.

Ito ay bumubuo ng mga trifluoroacetate salt na may mga pangunahing amino acid (hal., lysine, arginine, histidine) at ang libreng N-terminal amine. Samakatuwid, trifluoroacetate ay karaniwang ang default na counterion.

Ang pinakamababang bilang ng mga molekula ng TFA na nakatali sa isang peptide ay proporsyonal sa bilang ng mga pangunahing nalalabi sa isang naibigay na pagkakasunud-sunod ng peptide. Sa gayon, ang mas pangunahing mga residue na naroroon sa isang peptide, mas mababa ang net peptide content ng lyophilized powder. Upang isaalang-alang ang TFA o nilalaman ng tubig na nasa sample, inirerekomenda namin ang pagsasagawa ng peptide content assay para sa bawat custom na peptide.

Tubig at trifluoroacetic acid (TFA) ay mga by-product ng proseso ng purification. Gayunpaman, Maaaring magtaas ang TFA ng mga alalahanin sa toxicity buhay at preclinical studies. Samakatuwid, Nag-aalok ang MOL Changes ng non-toxic acetate, klorido, o ammonium salt exchangers.

hy ay mga peptide na naglalaman ng Cys, Nakilala, o Trp mahirap i-synthesize?

Mga peptide na naglalaman ng Cys, Nakilala, o Trp ay mahirap na mag-synthesize at makakuha ng mga produktong may mataas na kadalisayan. Ito ay higit sa lahat dahil sa kawalang-tatag at pagkamaramdamin sa oksihenasyon ng mga functional group na ito. Espesyal na atensyon ang kinakailangan para sa paggamit at pag-iimbak ng mga peptide na ito upang maiwasan ang paulit-ulit na pagbubukas ng mga vial.

Namiss ba namin ang tanong mo? Mag-drop sa amin ng isang linya at gagawin natin
bumalik sa loob 24 oras.