Ehara te isotope i te huringa whakapaipai
He rereke matū a Deuterium i te hauwai i te tauhohenga tauhohenga: Ka taea e te here waro-deuterium te whakarereke i te ahuatanga o te rongoa i nga ahuatanga kaore e kii mai te waahanga papatipu kotahi.
He iti ake te noho a Deuterium i roto i te pūngao wiri-kore i te hauwai ina herea ki te waro, na te tata 1.2 ki 1.5 kcal mo ia mole. He iti te rereketanga i roto i nga tikanga tino me te whakatau i roto i te kinetics. Ko te ōwehenga o nga reiti wehenga e rua ko te awenga wetewete kinetic deuterium, DKIE ranei, kua tohua hei kₕ wehea e k D.
Te Kohanga Peptide Mo nga tauhohenga kore-enzymatic, ko te deuterium KIE ka taka ki waenga 2 a 9 — ka wehe i te here waro-deuterium ka rere 2 ki 9 he wa puhoi ake i te wahanga waro-waiwai rite. Ko te 2023 arotake o deuterium i roto i te kitenga tarukino whakaputaina i roto i te PMC e whakaatu marama ana i nga hihiko o raro, me te kaupapa ano i whakamahia puta noa i nga matū rongoa mo nga tau e rua tekau.
Ko tera awhe kei te noho te whakatau hoahoa tuatahi. Ka taea e te DKIE kei waenganui o taua matapihi te huri i tetahi tohu rongoa rongoa. He DKIE kei raro, i waho ranei te mana here-wehe katoa, ka huri i tetahi mea nui.
Whakatupato: Ko te DKIE anake ka awhina i te wa e pakaru ana te here waro-waiwai motuhake he iti te reiti. Kei te whakahaeretia te paopaohia e tetahi taahiraa rereke - te here, kawe waka, te matū ranei karekau e uru ki taua here — ka taea e te deuteration te neke i te reiti ine ma te iti noa iho. I roto i tetahi rangahau tohu, he iti noa nga paanga o te ine ine 4 ki 6% puta noa i nga taputapu katoa i whakamatauria (ACS Chemical Neuroscience). Kaore e ranea ki te whakarereke i te whakaaturanga.
I te wa e whai waahi ana nga analog deuterated ki te kitea
E toru nga take motuhake ka kowhiria e te roopu rapu he tairitenga peptide kua whakakorehia, a ka tono ratou i nga whakaaro hoahoa rereke.
Ka rite ki te rautaki metabolic-pūmautanga. Ko te tono matarohia: He tere rawa te whiti o te peptide na te mea ka whakaekea e te peptidase, ara oxidative ranei tetahi waahi motuhake. Ko te whakanoho i te deuterium ki te waahi o taua whakaeke ka whakaroa te hikoi me te whakaroa atu i te rongo. Nga tono o Deuterium i roto i te Matū rongoa i roto i te Journal of Medicinal Chemistry ka whakatakoto tika i te whakaaro o te uara - he tino whai hua te whakakorenga tika i te wa e mate ana te puhui matua i te paitini-whakawhitiwhitinga., taunekeneke tarukino, bioactivation raruraru ranei, kaua mai i te tarepatanga pumau.
Hei tirotiro miihini. I te wa e wahangu ana te deuteration ki tetahi waahi, ko te puhui kua tapaina ka noho hei kaiwhai rongoa. A, no te tuu i te reira āta ki te wahi ngohengohe metabolic, ka waiho hei rangahau e whakaatu ana ko tehea huarahi te rangatira. Ko te Te upoko ScienceDirect mo te deuterium i roto i te kitenga me te whanaketanga tarukino ka kumea tika tenei wehewehenga: ko te whakakapinga ano ka noho wahangu, ka mahi miihini ranei i runga i te huarahi o te whakawhitinga me te waahi o te tapanga.
Hei tohutoro tātari, tātaritanga ranei. Ko nga peptides kua whakakorehia kua kiihia, kua whakamahia motuhake mo te taatai, tātari, me nga kaupapa pharmacokinetic/pharmacodynamic - he take whakamahi motuhake mai i te whakarereketanga rongoa, i whakaahuatia i roto i nga tuhinga patent deuterated peptides.
He mea nui te tauira ture i konei. Ko te tātaritanga Biochemistry o te deutetrabenazine, te tarukino deuterated kua whakaaetia e te FDA, whakapumautia Peptides Hangaia Ko te whakakapinga isotopic he rautaki ka arotakehia e nga kaiwhakahaere i runga i ona hua, kaua ki te whakakeke. Kare e pai ana nga tairitenga kua whakakorehia, engari ka whakakorea te whakaaro he ahua kee te huarahi.
I te wa e whai waahi ana nga peptides i roto i te koiora
Ko te whakamahinga nui tuarua o te tapanga wetewete karekau he hononga ki te pumau. Mo te ine.
Ko te paerewa peptide e tohu ana i te noho hei paerewa o roto mo te inenga tino o nga pūmua me nga peptides na LC-MS. Na te mea ko te paerewa kua tapaina he tata matū-rite ki te tātari, ka uru tahi, katote rite, me te whakatika mo te ngaronga tauira, rerekētanga katote, me te pokanoa matrix i roto i te whakatikatika kotahi. Ko te mahi LC-MS waimeha stable-isotope i whakaputaina i PMC e whakaahua ana i tenei ko te tino motuhake o te tātaritanga mo te whakatau ine, a kua waiho hei mahi paerewa mo te kitenga me te whakamana i nga whakaaturanga me nga tohu koiora mate.
Ko te uara mahi he ngawari ki te korero me te ngawari ki te ngaro: he paerewa o roto e whakatika ana mo nga mea katoa e pa ana i waenga i te pupuhi i te tauira me te kimi tohu. Te takahuri taputapu, whakaora tangohanga, rerekētanga rōrahi werohanga, me te whakakore i nga waahanga matrix ka whakataurite katoa ki tetahi puhui i pa ki taua haerenga.
Ko te whakatau 13C/15N ki te 2H
I konei ka rereke nga haurua e rua o tenei kaupapa, me te waahi ka mutu te nuinga o nga kaiarahi.
Mo te ine ine LC-MS peptide ine, 13Ko nga tapanga C me te 15N i te nuinga o te waa he nui ake i te deuterium hei paerewa o roto. He pai ake te hono tahi me te wetewete taketake me te pai ake ki te whakarite i tana whanonga katote. Ka taea e nga paerewa Deuterated te whakaatu i te nekehanga iti o te wa pupuri, na te mea ko te whakakapinga waro-deuterium e whakararu ana i te whanonga chromatographic o te ngota nui atu i te whakakapinga waro-13, hauota-15 ranei.. Ko taua nekehanga ka ngoikore te whakatikatika, na te mea ko te paerewa ka whakatau i tetahi waahanga mai i tana tātari karekau he taiao rite. Haumanu LC-MS / MS aratohu whakaputaina i roto i te PMC ka whakatau i nga paerewa o-roto kua tapaina ki te noho hei taunoa mo tenei take.
Ko te taunakitanga mahi: taunoa ki te 13C me te 15N mo nga paerewa ine e whai tikanga ai te wehenga chromatographic. Rahuihia nga paerewa o roto kua whakakorehia mo nga keehi ka uru mai te waihanga, utu, he herenga kaupapa motuhake ranei e pai ana ki a raatau - me te manatoko i te mahi tahi i te wa e whakawhanake ana i nga tikanga, kaua ki te whakaaro..
Kia pehea te nui o te wehenga papatipu
Ka whai hua noa te paerewa kua tapaina ki te kore tona papatipu e inaki ki te envelopu wetewete maori. waro, hauota, hāora, me te whanariki katoa e whai waahi ana i nga momo momo momo taumaha, no reira ahakoa ko te peptide kore tapanga ka whakaatu i te kahui o nga tihi kaore i te kotahi.
Ko te Ko nga taunakitanga tātaritanga biomarker e pa ana ki te peptide i whakaputaina i te PMC whakatika tika tenei: Ko te rereketanga o te papatipu i waenga i te paerewa kua tapaina me te peptide kore tapanga me nui kia noho marama te paerewa o te kōpaki taiao., ka hē ranei te inenga. Arahina hangarau ahumahi mai Otsuka me CIL's stable isotope standard catalog ka whakanekehia te iti rawa o te neke papatipu ki te tata 3 Na.
I roto i te mahi, Ko nga tikanga peptide e mahi ana me te nui ake o te upoko. He papatipu huri noa 10 Ko te Da i waenga i nga peptides waitohu taketake me te waitohu kua whakaahuahia i roto te mahi tapanga wetewete-kore-kore-kore i whakaputaina ki te PMC, a he nui noa atu nga taapiri whanui kei te whanui te envelopu taiao, he iti ranei te peptide ka tino tupono te inaki i te envelopu.
|
Te ahuatanga tātari |
Δpatipu whaihua iti |
Te take |
|---|---|---|
|
peptide nui, kōpaki māori whāiti |
~3 Ae |
Ka tutuki te iti rawa i whakaputaina hei whakawātea i te pūhera |
|
Peptide iti, kopaki taiao whanui ranei |
6 Da, nui atu ranei |
Ka taea te hora o te kōpaki ki te matapihi papatipu o te paerewa |
|
Waitohu peptide mo te inenga pūmua |
~10 Ae i roto i te mahi |
Ka whakarato tawhē me te whakangāwari i te kōwhiringa whakawhiti |
|
Paerewa Deuterated, ahakoa te rahi |
Tāpirihia te manatokonga-wa pupuri |
Ka taea e te nekehanga Chromatographic te whakakotahi i te wehenga papatipu |
Ko te SIL peptide versus SIL pūmua hokohoko-atu
He paerewa peptide kua tapaina ka uru ki te rerenga mahi i te taahiraa keri. Ka uru mai he paerewa pūmua kua tapaina i mua i te nakunaku. Ko te rereketanga o te waa ka whakatau he aha ka taea e ia tangata te whakatika.
He pūmua kua tapaina ki te wetewete e mau ana mo te rereketanga o te nakunaku me te ngaronga o te tauira-whakarite na te mea ka pa ki te katoa o nga mahi.. Karekau he peptide e mau ana i te tapanga-isotope — ka pupuhi ki roto i muri i te otinga o te nakunaku.. Ko te tuhipoka tono a Thermo Fisher mo te whakaputa i nga pūmua kua tapaina ki te isotope hanga te take mo te puka pūmua i runga i rite tenei pūtake. He whaitake te hokohoko: he uaua ake te whakaputa i nga pūmua kua tapaina, nui ake te utu, he iti ake te watea i te peptide kua tapaina, no reira ka whakaaehia e nga roopu te paerewa peptide me te whakahaere wehe ke atu i te rereketanga o te nakunaku.
Ko te waahi kei runga te isotope i runga i te peptide
Ko te whakatakotoranga ko te waahi ka angitu, ka hinga ranei te hoahoa peptide deuterated, a he mea whakaatu engari ehara i te whakaaro.
Ko te timatanga ko te whakaputa metabolite - te pumau o te plasma, pūmautanga microsome ate, me te peptidase-resistance assays - ki te tautuhi ko tehea te waahi kei te whakaekehia. Ko te tapanga i tetahi tuunga ehara i te taunahatanga rangatira kaore he hoko.
Mo nga peptides motuhake, e toru nga rohe e kawe ana i te nuinga o te uara:
-
Nga tuunga Arepa-wao e tata ana ki nga here peptide kutikuti. Ko te Deuteration i konei ka whakaroa tika i te wehenga o te tuara.
-
N- me nga rohe C-terminal. Ko nga Exopeptidases ka whakaeke i nga pito i te tuatahi, te hanga i nga tuunga kapeka hei taumata utu nui.
-
Ko nga roopu methyl mekameka taha kei runga i te leucine, isoleucine, me valine. Ko enei toenga he whainga noa mo te paopaotanga oxidative, me o ratou roopu methyl te wahi e puta ai taua matū.
Takotoranga Rautaki. Ka tapanga te whakamaaramatanga motuhake mo te waahi kotahi, he iti ranei o nga tuunga me te kawe i te tino uaua o te waihanga.. Nga tapanga whakamaarama whanui whanui, te whakanui ake i te noho pumau me te uaua teitei ake. Ka noho nga huarahi ranu ki waenganui i nga mea e rua. Ko te anga hokohoko i konei ka whai te arotake hangarau a Adesis o nga peptides deuterated, Koinei tetahi o nga maimoatanga iti e waatea ana ki te iwi whanui ki te whakaatu i te uauatanga-utu-painga hokohoko-atu, kaua ki te whakaatu i te deuteration hei painga riterite..
Ko nga tauhokohoko hoahoa e tika ana kia maarama
Ko ia hokohoko i raro nei he taraiwa utu e piri ana. Karekau he utu.
Te uaua o te waihanga me te nui o te painga. Ko te whakauru i te deuterium ki te waahi kua tautuhia ko te mahi me nga poraka whare kua whakakorehia i tera toenga, me te matū ranei e whakauru tika ana i te tapanga. Ko tetahi o nga huarahi ka taapirihia te utu e pa ana ki te raupapa kore tapanga. Ko te kaupapa tapanga ranu, matawhānui ranei ka piki ake te utu puta noa i nga tuunga.
Te pikaunga purenga. Kei roto i te whakaritenga peptide kua tapaina nga momo kaore i te ara te tapanga: he waahanga tapanga rawa, kawe kore tapanga, me — kei runga i te matū — he momo tapanga pohehe, he momo rawe ranei he rereke mai i te whaainga na te iti o te pikinga papatipu.. Ko te whakawehe i nga momo rereke e te kotahi, e rua ranei nga waeine papatipu ko te take pakeke o te chromatography, a he tino kaiarataki o nga mahi whakarite.
Te whakararu i te whakaraeraetanga. Ko te Deuteration e kiia ana he wahangu, a, ko taua whakaahuatanga kaore i te tika mo te katoa. Ka taea e te whakakapinga hauwai/deuterium te huri i nga hihiko honohono-waiwai me te whakarereke i te kaha here ma te maha o nga whakatekau o te kirocalorie mo ia kamiriona i etahi punaha, i korerohia i roto i te tātaritanga o te whakakapinga isotopic ki te kaha herenga hauwai. Mo te tirotiro miihini, he mea nui tena. Ko te huringa o te herenga ka huri i te panui ka whakakore i te whakamaoritanga o te whakamatautau.
Te whakaheke toto. Ko te puhoi o te wehenga i te waahi tuatahi ka taea te huri i te paopaotanga ki tetahi ara rereke. I etahi wa koira te whainga. I te nuinga o nga wa he raruraru - kaore pea e pai ake nga korero katoa, a ka puta pea he kotaha metabolite hou nga paatai kare ano i te hotaka i mua.
Uta wetewete. Ko te peptide kua tapaina me nui ake nga whakamatautau tuku atu i te mea kaore i tapaina, na te mea ko te whakarangatira isotopic me te kawe kore tapanga he taapiri taapiri. Ko taua taiwhanga o runga ake he utu e nga kapa taraiwa e whakahawea ana.
He pehea te rahua o te tapanga
Ko te aratohu hoahoa e whakaatu ana i te angitu ko te tuhinga hoko. Koinei nga momo rahunga e pai ana ki te hoahoa.
He iti rawa te DKIE hei take. Ka hipoki ki runga, me te pai ki te whakahoki ano hei paearu tirotiro: mehemea karekau te wehenga waro–waiwai i te tuunga kaitono i te reiti, e kore te deuteration e huri i te putanga. Ine i mua i te whakauru ki te kaupapa whakahiato.
Tapahia te ngaronga na te whakawhiti. Ka taea te whakawhiti atu i te Deuterium i te wa e huri ana nga hikoi whakawhiti hauwai, kia kore ai e noho tonu te tapanga ki te waahi i whakatakotoria. Ko tera 2020 Ko te rangahau tohu ACS Chemical Neuroscience ka tuhi ano i te ngaronga tapanga ka taea te whakaputa i roto i nga hua ka puta. Ko te hoahoa e kore e aro ki te whakawhiti ka taea te whakaputa i tetahi puhui e titiro tika ana ki runga i te tiwhikete me te rereke o te whanonga i roto i te whakamatautau.
Te poke marama mai i te wehenga kore. Ko te ngoikoretanga ata tenei i roto i nga mahi ine. Mena kei te noho tonu te peptide kore tapanga i roto i te whakaritenga paerewa kua tapaina, ka whakaputa i te tohu i roto i te hongere marama e whakararu tika ana i te ine. Ko te 2022 te ako mo te pokenga marama i roto i nga peptides paerewa o roto kua tohua Ka tūtohu nahanaha ki te whakau ko te matrix mana toraro e pupuhi ana ki te paerewa taumaha ka kore e puta he tohu whainga marama. Ko te toenga peptide kore tapanga me noho hei tawhā tuku mana, ehara i te whai whakaaro.
Ko te Isotope scrambling. Ka taea e te hauwai hau me te deuterium te tohatoha ano i roto i te peptide i te wa o te katote, te wehenga-a-tukinga ranei., e whakakore ana i nga korero tuunga. Me te wehewehe i te tukinga, Ko nga katote kongakonga e whakaatu ana i te taumata whakahekenga toharite. Ko te 2021 te arotake i nga ahunga whakamua i roto i te huringa hauwai/deuterium i te matakite papatipu e whakaahua ana i te tikanga, a te rangahau o mua a JACS mo te hau-waahanga katote i roto i nga katote peptide whakaatu te pānga i runga i te raupapa, kawe utu, me te hanganga hau-waahanga. Ko te katote ngawari me te wehenga irahiko penei i te ETD me te ECD ka pai ake te pupuri i te tapanga - ko tetahi rangahau i kii kei te ruku i raro 10% i raro i nga tikanga ETD ngawari. Ko te hua mo te hoahoa he tika: kaua e whakawhirinaki ki te wehewehenga-tukinga anake hei whakamatau kei hea te deuterium e noho ana.
Maamaa: e rua tau, kauaka kotahi
Ko te hapa nui i roto i te whakatau i te peptide kua tapaina ko te maatanga hei uara kotahi. E rua nga tawhā motuhake, me te whakakotahi i a raatau ka tino tupono.
Te pure matū e whakaatu ana i te nui o te rauemi ko te peptide e whai ana, i inehia e te RP-HPLC tātari. Kaore he korero mo te waahi e noho ana te deuterium.
Whakanui Isotopic he whakaahua he aha te hautanga o nga waahi kua tapaina e mau ana i te deuterium. Ka taea e te peptide te matū matū me te mau tonu i te tapanga kaore i oti, rereke ranei. Ko nga whakaritenga tauhokohoko mo nga peptide kua tapaina te isotope e kiia ana he ma matū 98% teitei ake ranei ki te kore e tohua, me nga poraka hanga waikawa amino i tapaina i 99% whakarangatira i runga ake ranei, e whakaatahia ana i roto te Eurisotop stable isotope-labeled peptide reagent specifications.
E tika ana kia rite te aro o te taha tuatoru i roto i nga raupapa uaua: whakahaere poke diastereomeric. Ko te whakauru i nga toenga kore-maori, kua tapaina ranei ka taea te hanga i nga poke matū karekau e whakatauhia e te inenga parakore.. Ko te 2025 rangahau take mo te whakahaere poke diastereomeric mo te hanga peptide matatini i roto i te Rangahau Tukatuka Organic & Whanaketanga e whakaatu ana i te tātaritanga waikawa amino chiral, ka mahia i muri i te whakamaroketanga-waiwai-waikawa-waikawa, hei tikanga whakahaere mahi. Mo te tairitenga kua tohua mo te kaupapa kua whakaritea, kei roto tenei i nga korero mai i te timatanga, kaua ki te taapiri i muri i te putanga o te poke.
Te tāpae whakaū
Karekau he tikanga tātari kotahi e whakau ana i te peptide kua tapaina. Ka whakautua e ia patai tetahi patai ka waiho etahi kaore ano kia whakautua, na reira ko nga tikanga orthogonal te paerewa.
|
Tikanga |
He aha te whakapumau |
He aha e kore e whakapumautia |
|---|---|---|
|
RP-HPLC tātari |
Te para matū me te kōtaha poke |
Ko nga mea katoa e pa ana ki te ihirangi isotope |
|
HRMS, papatipu tika |
Ka whakaū i te pikinga papatipu e tumanakohia ana o te ahua 1.006 No te mea na te deuterium |
Ahakoa e noho ana te tapanga ki te waahi i whakaritea |
|
HRMS, pūhera isotope |
Toharite deuterium kaporeihana ki te tohatoha matapae |
Nga korero mo te tuunga kaore he mahi taapiri |
|
¹H NMR |
Te ngaronga o te tohu iraoho i nga waahi motuhake - nga taunakitanga tuunga tika |
Te ine pono i runga i te rahi, peptides kiki |
|
Te tātari waikawa amino |
Whakapumautanga tito me te taumahi ihirangi |
Te tohatoha iraiti |
Te ine i te kaporeihana. E rua nga huarahi e kaha ana. Ko te Proton NMR te ine i te whakahekenga ma te whakatairite i te tohu whakauru i nga waahi kua tohua ki nga tohu karekau e uru ki te whakawhiti hauwai., i whakaahuatia i roto i te 2025 rangahau whakawhiti hauwai-deuterium i whakaputaina i te PMC. Ka hoatu nga taunakitanga tuunga tika ina whakatau nga tihi, engari ka tere te tini o te peptide spectra me te whakawhanui i te raina me te taumahi kaore i oti te whakawhāiti i tana toronga ine i runga i nga ngota nui..
Ko te mahi tukinga papatipu ka puta mai i te envelope noho. Tata ki te taapiri o ia deuterium kua whakauruhia 1.006 Na, ā, ko te pūhera i kitea he whakakorikoritanga o nga momo kua whakakorehia me nga momo momo taumaha o te peptide.. Ko te centroid o taua envelopu e homai te kaporeihana toharite - he ine pakari, a ehara i te mea kua whakatauhia e te pae, i whakatakotoria ki roto te arataki mahi mo te wetewete i nga raraunga hiranga papatipu whakawhiti hauwai. I te rawaka te mana whakatau, Ko te hanganga pai o te isotope ka wehe i nga iotopomer kua whakakorehia mai i nga momo tino nui, ka hoatu he panui tika ake., ko wai te mahi ki te whakatau i te hanganga pai isotopic i whakaputaina ki te PMC whakaatu.
Kia pehea te tika o te ine whakarangatira? Ko te whakatairite i te tohanga wetewete kua kitea ki te tuari matapae i tetahi taumata whakarangatira kua tika te korero, me te whakarangatira ine ka taka ki roto 1.5% o nga uara e tumanakohia ana, ia ko te mahi inenga whakarangatira wetewete taumira teitei i whakaputaina i roto i te Matū Analytical. He whaihua taua nama hei punga paearu tuku: ki te paheke rawa atu to whakarangatira ine i tenei tawhē mai i te uara matapae, ko te tauhohenga tapanga, ko te wehenga wehe ranei me tirotiro.
Te wehewehe i te tapanga kaore i oti mai i te nui o te taiao. Ko te tohatoha iraiti taiao kua whakaritea mo tetahi hanganga huanga. Ko nga nekehanga o te envelopu ki tua atu i tera raarangi ka whakaatu i te whakaurunga o te deuterium. I te deuteration iti ki te āhua, he ranunga o nga takoha e rua te kopaki ine, no reira he mea tika kia whakakorehia, he whakatikatika centroid ranei - me te kore, ka kiia te nui o te taiao he deuterium whakauru. Ko nga huarahi tauanga kua whakaputahia e tautuhi ana i nga tapahi papatipu mo te whakatau i te rereketanga o te whakahekenga he pono. Ko te 2025 he arataki mo te kowhiri i nga paerewa o roto kua whakaingoatia kei roto i te patai whanui mo te kowhiringa paerewa me te tika o te rereketanga papatipu.
Mo te Aki: Ripoatahia te matū matū me te whakarangatira iraiti hei rua tawhā tuku motuhake me nga paearu whakaae motuhake. Ko te ahua purea kotahi karekau he tikanga mo te peptide kua tapaina, a ka tono nga kai-arotake mo te wehenga.
He aha te hiahia mai i te hoa whakahiato
Ko nga whakaritenga i raro nei ko te putanga mahi o nga mea katoa o runga ake nei. Ka tono ratou ahakoa ko wai te hoa ka tohua e te kaupapa.
Te whakaurunga iraiti i runga i nga taunakitanga. Me ahei te hoa ki te matapaki i te take i tohua ai tetahi tuunga, te mahi mai i te metabolite, te raraunga pumau ranei, kaua ki te tauira taunoa. Mēnā ko te tūtohutanga he “deuterate whānui,” patai he aha te utu o te utu me te aha ka riro mai.
Raraunga tātaritanga-nui. Ehara i te tauākī āheinga whānui. Ko te chromatogram HPLC o te rota motuhake, whakaū papatipu tika, me te ine i te whakarangatiratanga irite ki te tohatoha matapae.
Ko nga taunakitanga o te waahi ka tautuhia te tauira tapanga. Ko nga raraunga Proton NMR mo te tautuhi, tauira tapanga ka taea te whakatau, ka tukuna me te tiwhikete kaore i runga i te tono. Hanga Peptide
Ko nga toenga kore tapanga me etahi momo tapanga e whakahaerehia ana. He rohe kua kiia mo te kawe kore tapanga, na te mea ka whakatau tika tera nama mena ka taea te whakamahi hei paerewa ine.
Aromātai hikaka kei te whai wāhi te matū whakawhiti. He whakautu kua tuhia ki te patai mena kei te noho tonu te tapanga ki te waahi i tuu ai.
Te whakakorikori me te whakahaere e tika ana ki te panui o raro. Mo tetahi peptide kua tapaina ka uru ki roto i te ako-a-rorohiko, i roto ranei i te ako vivo, Ko nga whakamatautau mo te whakamaoritanga me te whakahaere iti-endotoxin tetahi waahanga o te tohu, ehara i te taapiri.
Te kaha ki te tirotiro. Na te mea ko te uara o te peptide kua tapaina e whakawhirinaki ana ki te reproducibility i waenga i nga rota, he whakaritenga hangarau te rekoata whaiwhai, kaua ki te mahi pepa.
Mo nga kaupapa e hiahia ana enei katoa ki te waahi kotahi, Nga Huringa MOL ka whakarato i te whakahiato peptide ritenga i te taha o te whakarereketanga me nga ratonga tapanga tae atu ki nga peptides kua tapaina te isotope, me te mana o te kounga peptide me te kaha o te puranga i hangaia i runga i te punaha tautuhi rota me te punaha whakahaere kounga i roto i te whare e hono ana ki te ISO 9001:2015. Ko te kamupene te whakamatautau peptide me te tohu tohu ka hipokina e te mahi te ma o HPLC me te whakamaarama poke, papatipu spectrometric te taumaha ngota me te raupapa manatoko, me te tātari waikawa amino mo te mahi ihirangi. Mo nga peptides kua tohua mo te mahi i runga i te pūtau, Ko te whakahiato me te whakahaere ka mahia i roto i tetahi whare whakahaere a Karaehe 100 taiao hanga peptide horomata me te whakahiato wehe, lyophilization, me nga waahi kapi me te kaha whakahiato-waahanga mo nga peptides tae noa ki 60 toenga.
Taketake Matua: Tauwhāitihia te parakore matū, whakarangatira isotopic, whakaū tūnga, me te kawe kore tapanga hei tawhā tuku motuhake e wha. Ko te hoa ka taea anake te whakarato i te ahua parakore kua whakakotahihia kaore i manatokohia nga mea e whakawhirinaki ana koe.
Pātai auau
Ahea me whakamahi ahau i te peptide kua whakakorehia hei utu mo te 13C, 15N ranei kua tapaina? Whakamahia te deuterium i te mea ko te whainga ko te whakaroa i tetahi hikoi mokowhiti motuhake ma te whakamahi i te awenga wetewete kinetic. Whakamahia te 13C, 15N ranei ina he ine ine te whainga — ka hono atu aua tapanga ki te tātari maori me te whakatika i nga paanga matrix kia pono ake ki nga paerewa o roto o te LC-MS.
Me pehea ahau e mohio ai ka pai ake te whakapumautanga i mua i taku mahi ki te whakahiato? Whakapumautia ko te wehenga here waro-waiwai i te waahi kaitono he reiti mo te huarahi e whai ana koe. Ko te waahi ka whakaiti i te reiti, ka whakaroa te deuteration i te taahiraa. Te wahi e whakahaeretia ana te metabolism ma te here, kawe waka, matū here-kore ranei, me tumanako he paanga iti - kua inehia nga paanga o te wetewete kia iti iho 4 ki 6% kua korerotia i roto i enei punaha.
E kii mai ana te pure matū kua oti te tapanga? Kao. He tawhā motuhake te matū matū me te whakarangatiratanga isotopic. Ka taea te peptide 98% parakore na te HPLC me te kawe tonu i te kaporeihana deuterium kaore i oti, rereke ranei, na reira ka uru nga uara e rua ki te tiwhikete.
Kia pehea te nui o te rereketanga o te papatipu i waenga i te paerewa peptide kua tapaina me tana tātari? He nekenga papatipu katoa o te iti rawa 3 Ko te Da ko te iti rawa e kiia ana kia noho marama te paerewa o te envelopu wetewete taiao. Ko nga tikanga Peptide he nui ake te ruuma upoko - huri noa 10 He mea noa te Da i roto i nga mahi — na te mea ka whanui nga kopaki taiao-taiao i runga i nga peptide nui ake, he whanariki ranei..
Ka taea e au te whakamahi i te wehenga tukinga ki te whakaū kei hea te deuterium e noho ana? Ehara i te pono. Ka tohatoha ano te wehenga hauwai me te deuterium i te wahanga hau, na nga katote kongakonga e whakaatu ana i te taumata whakahekenga toharite, kaua i nga korero tuunga. Whakamahia te katote ngawari me te wehewehenga irahiko penei i te ETD, ECD ranei, me te whakau i te tapanga tuunga ma te proton NMR mo nga tauira kua tautuhia.
He aha i nekehia ai e taku paerewa o roto kua whakakorehia tona wa pupuri? Ko te whakakapinga waro–deuterium ka whakararu i te whanonga chromatographic nui atu i te waro-13, hauota-15 ranei te whakakapi.. He iti noa te nekehanga engari ka nui pea hei whakangoikore i te whakatikatika i te hua-whanau, Koia tetahi o nga take e pai ai nga tapanga 13C me 15N mo nga paerewa ine he mea nui te wehenga.
Nga mahi ka whai ake
Mena kei te paunatia e to hotaka he tairitenga kua tapaina he isotope, he paerewa o roto kua tapaina, Ko te huarahi tere ki te whakatau whakatau ko te tuku i te patai motuhake ki mua i te roopu whakahiato me te roopu tātari i mua i te tuku ki tetahi huarahi. Ma te aromatawai whaihuatanga hangarau poto ka korero ki a koe mehemea he pai te tapanga o te turanga, he aha te utu o te ara waihanga, a ko ehea nga raraunga manatoko ka hiahiatia e koe i te tukunga - he iti ake te utu i te kitenga i te whakautu i muri i te whakatairanga.
A faaite i to raupapa whainga, te taunahatanga e ngana ana koe ki te whakatutuki, me to whakaritenga e hiahiatia ana, ka aromatawaihia e nga Huringa MOL nga whiringa tuunga tuumotu, whaihuatanga whakahiato, me te mōkihi tātari hei manatoko i te rauemi.
