Ko te kaha o te upoko kaore he korero mo te pai
I mua i nga rahi, he tirotiro mooni. Ko nga kamupene e rua e whakaputa ana i te kaha whakamiharo. Ko te ratonga peptide ritenga a GenScript mai i te maru ki te ≥98% te parakore i te tauine milligram-ki-kilogram, ka oma raupapa ki runga tata 200 toenga, me te whakarārangi i tētahi putumōhio whakarerekētanga tino whānui. Ko te whakahiato ritenga kore-GMP a Bachem 5 mg ki 100 g a kei te tautokohia e nga waahi GMP i tirotirohia e te FDA, EMA, me Swissmedic, tuunga mo te tuku API arumoni. Hei tuunga upoko, he kaha enei, kaore i te tino tautohetohe.
Ko te ripanga i raro nei he pehea te whakataurite o nga mea e rua i runga i nga ine e awe tonu ana mena ka angitu te kaupapa - a ka noho hei tauira arotake mo tetahi hoa e whakaaro ana koe.
|
Ahu
|
He aha hei tirotiro |
GenScript |
Bachem |
Tohunga pai (māuiui.) |
|---|---|---|---|---|
|
Te tohungatanga whakarereke |
Te hōhonutanga ki tua o te tahua; whakaatu te matū matatini |
Whānui (300+ kua whakarārangitia), kaha i runga i nga whakatakotoranga cyclic/PDC |
Te Kohanga Peptide Tahua whanui, matū hohonu tae atu. NCL, tāpara, waikawa amino rereke |
Roa-roa, hauwai, anga-pae maha |
|
Te tapanga |
Turanga-motuhake, nga tohu kua whakamatauria |
Korewharewha, koiora, momotupapa, ka whakaekea nga contigs cyclic |
Biotin (kāpeka/taha-mekameka), waikano, pawhiria, chelators, noho pūmau |
FRET/biotin/isotope motuhake me te tohu MS orthogonal |
|
Te hōhonutanga tātari |
Te tuakiri orthogonal + tikanga ma |
Te parakore/hohonu papatipu he iti ake te kitea ma te whanui |
Te aro nui ki te whakauru i nga tātaritanga matatau puta noa i nga waahanga |
Tīwae-rua RP-HPLC, ESI-LC-MS/MS, SEC-MALS, kirira |
|
Tuhinga |
CoA vs. rekoata puranga, te whaiwhai, rautaki poke |
RUO→ cGMP ara arotake-rite, iti kitea doc hohonu |
doc huringa ora kua whakaritea + tautoko ture |
CoA e tika ana mo te waahanga → nga kohinga raraunga tohu IMPD |
|
Tauine pai |
Ararere ka taea te whakaputa mg→g→kg |
mg→kg incl. cGMP wawe |
Rangahau → GMP arumoni maha-tona |
mg→kg rangahau-ki-tukatuka whanaketanga |
|
Rangahau → tukanga dev |
Te haere tonu o te atamira i raro i tetahi tuanui kounga |
Rangahau → ara GMP haumanu moata |
Rangahau→ arumoni, ture hohonu |
mg→kg scaffold + Te whakawhanaketanga tukanga CRO |
He whakaahua nga pou, ehara i te whakatau whakamutunga. Koira te kaupapa o te anga: Ko te waahi o te kaiwhakarato i roto i te tepu ka whai tikanga ina ka mapi koe ki to raupapa, tou atamira, me nga tuhinga me kawe e to kaupapa.
Te tohungatanga whakarereke: te hohonutanga kei muri i te tahua
Ka whakarārangihia e ia kaiwhakarato pono te maha o nga whakarereketanga. N-terminal acetylation, C-terminal amidation, paihikara, PEGylation, lipidation, phosphorylation, glycosylation, anga maataa, nga waikawa amino rereke - kua inaki nui nga putumōhio. Hei kaiarotake, me waiho he tahua whakarereke hei whakapae, ehara i te tohu. Ko te tino patai mehemea kua whakatauhia e te kaiwhakarato to matū tika i mua atu ka taea e ia te whakaatu ki a koe te tohu poke.
Na Bachem ake tuhinga whakahiato peptide ritenga he tino pono mo nga roopu purea-whakariterite-tono - e taunaki ana >95% mo NMR, whakaatakiriata, me nga whakamatautau ine, me te ≥80% mo te blotting kounga o te Hauauru. Ka whakarārangihia hoki ngā kakau tino matatau: rautaki huritaonga maha tae atu ki nga peptides-a-wai-waiwai me nga anga-disulfide maha, herenga matū taketake, whakamuri-muri tuara, D-amino acids, N-methylated toenga, me nga chelators penei i te DOTA me te DTPA. Koira te ahua o te kaihanga e kore e mutu i te mutunga ngawari o te raupapa.
He rite tonu te wero a GenScript mai i te whanui. Kei roto i tana raarangi he whare pukapuka whakarereke nui me nga whakatakotoranga motuhake penei i nga peptides cyclic me te peptide-drug conjugates, e pai ana ki nga roopu e hopu ana i nga tini analogues i kitea. He mea nui te wehewehe na te mea a roa rarangi whakarereke me whakaatu Ko te angitu o te raupapa uaua ehara i te mea rite tonu. Mena he hydrophobic to raupapa, whakahiato-prone, roa, he maha nga whakarereketanga motuhake mo te waahi, tono mo nga tohutoro o te matū rite, kaua ki te tatau i nga mea raina.
I a koe e arotake ana, tirotirohia me nga patai e toru: kua whakahiatohia e tenei toa nga raupapa me te uaua rite (roa, hauwai, topology disulfide, te maha o nga whakarereketanga); he aha te reiti angitu me te rautaki purenga mo to tauira; a ka taea e ratou te tohu ki tetahi whakapumautanga orthogonal e noho ana te whakarereketanga ki te waahi i tohua e koe? Ko te kaiwhakarato e whakautu ana i te puna tuatoru he onge, he pai te pupuri. I hangaia e nga tohunga mo nga anga matatini, penei he te whakahiato peptide ritenga tūāpapa whakakotahi i te wahanga totoka, wai-waahanga, me nga huarahi FERMENTATION, He maha nga wa ka tukuna he rereke rereke ki konei i te kaha o te upoko.
Te tapanga kua whakamatauria, ehara i te mea piri noa
Ko te tapanga e tika ana ki tana ake paearu na te mea kei reira ka pakaru marie te kaha o te whakahiatotanga. Biotin, he fluorophore, he kakau pao, Ko te wetewete pumau ranei ehara i te whakaurunga tikanga ka mau koe ki tetahi peptide; me tuu te tohu ki te waahi-motuhake, ka mau tonu ma te whakahiato me te purenga, ka whakaaturia ki te noho ki te wahi i whakaritea e koe. He maha nga taiwhanga kua whakaae ki te "peptide kua tapaina" he ranunga o nga inemate tuunga - a ka kitea i waenganui o te whakamatautau.
He aha te whakataurite mo tenei taha: ahakoa kei te tino watea nga tuunga tauranga me nga mekameka taha (hei tauira lysine ranei cysteine whakanohonga), ahakoa ka tukuna e te hoa nga hononga me nga mokowhiti o te roa me te polarity, mehemea ka taea e nga tohu te wetewete ina hiahia ana te whakamatautau, a mena ka manatokohia te waahi tapanga me te pono e te tātari papatipu orthogonal, kaua e whakaaro. He haki whero te purongo mo te "biotinylated", "FITC-tapanga" kaore he taipitopito tikanga.
Ka whakarārangihia e Bachem te biotin ki nga waahi kapeka me te mekameka taha, peptides rewharewha me te waikano, nga kakau ka taea te panui, me te tapanga wetewete pumau — nga taunakitanga katoa o te tino kaha. Ko te putumōhio a GenScript he rite tonu ki te rewharewha, koiora, me nga whiringa momotu kei roto i tana tahua ratonga whanui. Ka puta te rereketanga i roto i te tohu tātari ka piri tetahi hoa ki tetahi puranga kua tapaina.
Mo nga tirotiro kua tohua, me kaha te ratonga tapanga peptide ki te whakamaarama i te rautaki wehewehe — hei tauira he ara biotinylation e wehewehe ana i te tohu mai i te taupori kore i tohua., he punaha hono ranei e pupuri ana i te biotin kia uru ki te streptavidin. Mena ka whakaarohia e te kaiwhakarato te tapanga "tono he tohu ka taapirihia,” ehara i te hoa mo te whakamatautau ka whakawhirinaki te panui ki te waahi e noho ana te fluorophore.
Hohonu tātari i tua atu i te tau parakore
Ko te ōrau parakore i runga i te tiwhikete ko te papa o nga raraunga kounga, ehara i te tuanui. Ko te tuku rangahau-akomanga e whakaatu ana i te tuakiri a MS me te ma o HPLC - e tika ana mo te maha o nga whakamatautau tirotiro me te iti rawa mo nga mea katoa me mau tonu i raro i te arotake.. Ko te rereketanga i waenga i nga kaiwhakarato e whakaatu ana i etahi atu mea ka taea te karanga: whakaū orthogonal o te raupapa, te tapatahi o te kiri, āhua whakahiato, whakakeke, te toenga whakarewa me te wai, ihirangi peptide kupenga, endotoxin, me te whakahoromata.
Ko te QC paerewa a Bachem e whakamahi ana i te HPLC me te MALDI-MS, me nga whiringa matatau tae atu ki te tātari waikawa amino, ESI-MS/MS, ihirangi counterion, me te tātari endotoxin - he tapuwae tātari e tauine ana ki nga mahi kua whakaritea. Ko nga rauemi whanui a GenScript e whakanui ana i ona punaha kounga me te huarahi cGMP, ahakoa he iti ake te kitea o te paparanga tātari. Mo te kaihoko, ko te whakamatautau mahi ehara i te ingoa o te kamupene he maha atu nga taputapu; mena ka taea e te kaiwhakarato te tuku i nga taunakitanga orthogonal motuhake e hiahiatia ana e to waahi me te tiaki i te tikanga.
Ko te whakahiato he rerekee pai hei whakamatautau. Ko nga raupapa hauwai, roa ranei ka hanga i nga oligomers wairewa ka ngaro i te oma whakamuri kotahi. Ka tukuna e tetahi hoa hohonu ake he tikanga penei i te chromatography whakakore-rahi me te marara rama-maha-koki. (SEC-MALS) ki te tohu i te whakahiatotanga tika, ko te wehenga tiihi ranei i te wa ko te poke o te matū stereo te mate. Ko nga kereme wetewete me tohu ki tetahi tikanga - a whakamātautau peptide Ko te kaupapa e hono ana i te RP-HPLC nga pou-rua me te mapi ESI-MS/MS me te whakapumau raupapa e whakaatu ana i te hohonutanga o te kaupapa whanaketanga e hiahiatia ana..
Tuhinga: rangahau-koeke vs. mooni tukanga-whanaketanga
Ko te paearu iti rawa i roto i te kowhiringa kaiwhakarato ko te tuhinga, na te mea ka arotakehia e nga roopu nga hoa moata, i te purenga rangahau, katahi ka kitea te taumahatanga pepa pono ka tae ki nga mahi whakaahei IND. He nui te mokowhiti i waenga i te CoA rangahau me te kohinga raraunga whanaketanga-tukanga, a he mea tika kia mohio koe i mua i to mahi ki te hoa kotahi.
Ko nga rauemi rangahau-akomanga ka tuhia e tetahi tiwhikete tātaritanga motuhake: tuakiri, HPLC ma, maha spectrometry papatipu, me etahi wa he chromatogram. Ka tautoko tera i te whakatau tirotiro me etahi atu mea iti. Ko te mahi-whakawhanaketanga me te toha-a-GMP ka taapiri atu ki te whai waahi katoa, nga rekoata puranga matua me nga raraunga-tukatuka, tikanga whaimana, tohu tohu ranei, tuku whakamatautau ki nga whakaritenga kua tautuhia, ine me te mana huringa, te rapunga rauemi mata, he rautaki whakahaere poke, me te tautoko pumau. Ko te EMA he aratohu mo te whakawhanaketanga me te hanga peptides waihanga ka whakatakoto i nga tumanakohanga ture synthetic-peptide e turaki ana i nga tuhinga ki mua i te tiwhikete kotahi.
Ko te huarahi tere ki te ine i tetahi hoa ko te patai he aha te mea ka tukuna e te roopu. Mena he CoA te whakautu, he ahua ma, me te chromatogram, kei te titiro koe ki nga tuhinga rangahau-akomanga, ahakoa te tapanga e pa ana ki te kaiwhakarato. Mena ka taea e te kaiwhakarato te whakaputa i te whai waahi nui, rekoata puranga, tikanga whakamana, me te take poke, kei te whakahaere i te hohonutanga o te tukanga-whakawhanaketanga. Ko nga kaihoko e arotake ana i nga kaupapa kua whakatauhia me tono kia tuuhia nga tuhinga ki mua - nga korero COA, raraunga tātari mata, te whaiwhai, me te mahi punaha-kounga - na te mea he maha ake nga korero mo te kaihoko atu i nga kereme kaha.
Tauine pai: te whakarite i te huarahi ki to atamira
Ko te kaiwhakarato nui rawa atu ko te kaiwhakarato pai rawa atu, no te mea he pai te tauine e pa ana ki te ara he pai te whakawhiti i te wa e tipu haere ana to kaupapa, ehara i te mea ka taea e tetahi whare te hanga peptide maha. Ko te angitu o te kitenga i te tauine mirakarama e kore e tohu angitu i te tauine kirokaramu i runga i te huarahi kotahi — ka heke te ma, ka whakaemi nga poke, a ka hinga te hua ki te kore te purenga me te whakahiato i hangaia kia neke.
Ko te whaitaketanga o GenScript i konei ko te huarahi e hangaia ana mo nga mahi rangahau-ki-waa-haumanu: ko tana ratonga peptide ritenga ko te milligram ki te kirokaramu, me te huarahi rangahau-ki-cGMP e taea ai e te roopu whakahura te noho me te kaiwhakarato kotahi ki roto i nga rangahau whakaahei IND me te kore he huringa kaihoko wawe. Ko te kaha o Bachem tetahi atu pito o te pihi - te hanganga GMP hohonu kua tuuhia Peptides Hangaia mo te rōrahi API arumoni, me te whakaurunga wetewete me nga ture e hiahiatia ana e te rahinga nui. Ko te morearea kore e tika ana i nga taha e rua: ko te kaupapa ka nui ake i te toa rangahau-a-te-rangahau me whakauru ano nga huarahi me nga tuhinga, a ka ngaro te ngawari me te tere o te kaupapa whakahura i te whanuitanga mo te kaihanga arumoni.
Ko te tikanga matua ko te patai mehemea ka taea te kawe i te rautaki whakahiato me te rautaki purenga i whakamahia i to tauine o naianei ki to tauine e whai ake nei, a mena ka taea e te kaiwhakarato te whakaputa i te puranga i runga i te pairati, i te tauine whanaketanga ranei hei whakamatau. Mo nga kapa e neke whakamua ana i te ngota ngota, Ko te tautoko mo te whakawhiti ara mirimiri-ki-kirokaramu i raro i te tuanui o te kounga kotahi ka whakakore i te tino take o te mate tuku. Hanga Peptide
Mai i te rangahau tuhura ki te whanaketanga tukatuka
Ka kii te kaha ki a koe ka taea e te kaiwhakarato te mahi i nga mea maha. Kaore he korero ki a koe mo te mea ka taea e te kaiwhakarato kotahi te tautoko i a koe i roto i te whakawhiti mai i te rangahau torotoro - kei hea te tere, ngawari, me te wini whanui whakarereke - ki te tukatuka whanaketanga, kei hea te arotautanga ara, whakahaere poke, arotake hangahanga, me te whakawhiti hangarau te kaupapa matua. Ko enei momo e rua e hiahia ana ki nga uaua rereke, he iti noa nga toa e rite ana te kaha ki nga toa e rua.
Ka utua e nga kaupapa Discovery tetahi hoa ka taea te neke tere puta noa i nga raupapa maha, maka ki nga whakarereketanga rereke, me te whakahoki i te tuakiri ma me nga raraunga ma. Ka utua e nga kaupapa-whakawhanaketanga he hoa ka taea te maukati i te huarahi, mohio ki te whenua poke, whakahaeretia, me te tuhi i tetahi tuhinga, te tukanga whakaputa ki te GMP, ki te kaihanga haumanu ranei. Ko te whiriwhiri i tetahi hoa ko te whakatau ko tehea taha o tera raina ka noho koe i tenei ra - me te tino pono, kei reira koe i roto i te tekau ma rua ki te tekau ma waru marama.
A peptide tukanga-whakawhanaketanga whakauru ka taea te whakamarama i te rereketanga o te mahi: ko te tikanga ka horahia te hoahoa ara - he ara matū mo nga raupapa poto ake ki te huarahi whakakotahi mo nga huarahi roa, uaua ranei - me te arotautanga whakangao., rautaki purenga, me te mana pokekore ki te tango i nga raupapa mukunga, kore ōrite, me ngā hua hāora. He huinga tino rerekee tera mai i te whakahiato-akomanga rangahau, a he mea tika kia tirohia mena ka taea e te hoa rangatira te whakaputa nga tikanga e rua, kaua ki te kii ki te mahi i nga mea katoa.
Te whakatakoto anga ki te mahi
Mena kei te whakataurite koe i nga hoa peptide inaianei, whakahaere ia kaitono i roto i nga waahanga e ono ki to kaupapa tuuturu, kaua ki te raarangi hiahia:
-
Tuhia to ngota me te atamira tuatahi. He roa, hauwai, peptide maha-disulfide e whai ana ki te mahi whakaahei IND he raru whiriwhiri rereke mai i te peptide tirotiro poto.
-
Te hōhonutanga whakarerekētanga kaute i runga i to matū tika, karekau i runga i nga mea rarangi rarangi.
-
Patai me pehea te tohu tohu tohu, mena he mea nui te tapanga ki to whakamatautau.
-
Whakarārangihia ngā taunakitanga tātari e hiahiatia ana e koe — orthogonality, whakahiatotanga, ihirangi, whakakeke, endotoxin — ka whakaū ka taea e te hoa te whakahaere.
-
Tonoa te kete tuhinga ka tukuna e koe, ehara i te mea ka makona te mata.
-
Tirohia nga whakawhitinga ara tauine me te whakau ki te kaiurungi, ki te roopu whanaketanga ranei.
-
Aromatawai i nga tikanga rangahau me nga mahi-whakawhanaketanga, ka whiriwhiri i te mea e rite ana ki to paerangi.
Ko te raina wehewehe i waenga i a GenScript me Bachem - penei i te raina i waenga i nga hoa mahi e rua - ehara i te kirokaramu ia tau.. He pehea te hohonu e taea ai e ia tangata te mahi i to raupapa motuhake i te waahi tika, me te tapanga ka taea e koe te whakawhirinaki, tātaritanga ka taea e koe te tiaki, tuhinga ka taea e koe te tuku, me te ara tauine ka ora i te haerenga ki te whare haumanu.
Ka tukuna e te kaihoko he nama parakore me te kereme kaha, patai mo nga taunakitanga orthogonal, nga rekoata puranga, me te whakaaturanga e tauine ana te huarahi. Ko te hoa ka taea te whakautu i nga waahanga e ono ko te mea e tika ana kia mau tonu — kaua ko te mea nui rawa atu te upoko. Mena kei te whakataurite koe i nga whiringa inaianei, he korero hangarau poto me tetahi tohunga peptide penei Nga Huringa MOL Ka taea e koe te mapi i to raupapa me te atamira ki tenei anga me te whakau ko wai te hoa e pai ana — tirohia a raatau ratonga peptide ritenga whakauru.
