Cyclic Peptide PROTAC Design: HIF-1α Fa'aleagaina Taiala

O le liua o se toe faʻatulagaina, e le o se faaopoopoga

O se peptide cyclic lea e taofia ai le HIF-1α e ala i le nofoia o le taga PAS-B o se ki tipi e fetaui ma le tasi loka.. O le fa'aliliuina i se mea fa'aleagaina o lona uiga o le u'u o se 'au i luga o lena ki: se feso'ota'iga fa'atasi ma se elemene VHL-recruiting, fa'atulaga ina ia nofo pea le mama i totonu o le taga a'o aapa atu le lima fou e su'e le ligase. E le mafai ona suia nifo. O isi mea uma e mafai.

O lena eseesega e faʻauluina ai le galuega atoa. I le pusa taula, le sootaga ma le VHL ligand na fausia i totonu o se amino acid masani bifunctional ma faʻapipiʻi saʻo i le taimi o le peptide synthesis solid-phase., nai lo le fa'apipi'i pe a uma le uila (JACKS, Cyclic Peptide PROTACs Toe Fa'afo'isia VHL-Mediated HIF-1α Fa'aleagaina ile Hypoxia, 2026). O le taunuuga aoga o le mea faʻapipiʻi e avea ma se filifiliga mamanu faʻamautu i le taimi o filifili-faʻapotopotoga, e le o se fesuiaiga e te fa'alogo mulimuli ane i le nofoa.

O faaiuga uma i lalo e mulimuli mai i lena tautinoga: lea gradient e fofo ai le conjugate, lea siaki conformational e faamaonia ai le mama na ola, ma o le fea su'ega e mafai ona iloa ai le fa'aleagaina mai le na'o le nofoia.

O fea e alu ese ai e tatau ona ave le so'otaga?

Filifiliga-nofoaga filifiliga o le filifiliga muamua lea e faʻagata ai filifiliga mulimuli ane, ma o le tulafono e faigofie ona taʻu: filifili le tulaga e ono fa'alavelaveina ai le fusifusia ma e foliga mai e fa'aalia ai le solvent (Ta'iala i le taimi nei mo le mamanu o feso'ota'iga PROTAC, 2020). Pe a maua se fausaga co-crystal o lau peptide cyclic fusia i le sini, e tali atu lena tulafono i le asiasiga. A leai, asiasiga e le mafai ona filifili le fesili, ma o le faafoliga e ese ai o le ala lea e leiloa ai masina o polokalame.

Au'aunaga O le mea fa'apipi'i e le'o se la'asaga fa'atupuina e te fa'amauina pe a uma ona fa'atumauina le peptide. O se filifili-faapotopotoga mamanu filifiliga, fa'amauina a'o le'i amataina le fa'asologa, e pei ona i ai i le pusa taula. O le suia o lou mafaufau i se taimi mulimuli ane o lona uiga o le toe faʻafouina o le peptide, le fa'asa'oina o se filifili pito.

Le tulafono fa'avasega fa'apitoa: fa'avasega sui tauva i mea e fa'asaoina e le tasi, i lenei faasologa: feso'ota'iga fa'atatau, sosoo ai ma amioga lavelave ternary, ona fa'aleagaina lea. O se SAR vaapiapi i se tulaga e foliga mai o le solvent-faʻaalia o se lapataiga, e le pisa. O lena tulaga e fa'atatau i uta, ma e tatau ona toe fai le fa'avasegaga.

Faʻapipiʻi le fesoʻotaʻiga ma le elemene E3

E muamua le filifiliga o le auala, ona o luga-resin ma fofo conjugation e toilalo i nofoaga eseese. O le fa'apipi'iina i luga o le resini o se amino acid e lua e fausia ai le so'otaga i totonu o le filifili lava ia, o lea e tatau ai i le polokalame puipuia-vaega ona fa'atumauina pea le au o le so'otaga fa'atasi Fa'atau so'otaga soso'o mulimuli ane ma le la'a fa'ata'amilosaga. O le fa'amaopoopoina o vaifofo pe a uma le ta'amilosaga e sili atu le vave ona fa'asolosolo, ae na te faʻaalia le peptide saoloto i le kemisi faʻagaoioia faalua ma tuʻu ai oe e faʻamamāina se faʻafefiloi o isomers tulaga pe a fai e le tulaga ese le toega faʻafefe..

O le galuega a Southampton o loʻo faʻaalia ai mea o loʻo faʻatau e lena faʻamatalaga. O le fa'asologa na amata i le cyclo-CLLFVY na si'i atu i le lua-augatupulaga ulu tau, cyclo-CLLF(CF3)AFAI(Sa saunoa Br), o lo'o fa'apipi'i fa'atasi mulimuli ane (McDermott et al., 2025). O le fausiaina o le so'otaga i totonu o le filifili o le mea lea e fai ai le umi o feso'ota'iga o se fesuiaiga mamanu nai lo se fa'afitauli fa'amamaina.

E taua lena mea ona o le faʻamataʻu autu i le mama peptide ma gaugau i luga o lenei auala o le epimerization, ma e mafai ona aloese mai le masini. O le faʻagaoioia o se amino acid e fausia ai se planar oxazolone lea e faʻagata le tumau i le α-carbon., o lea e mafai ai e le reprotonation ona toe faʻafoʻi le L- poʻo le D-configuration. E a'e a'e tulaga lamatia i le fa'agaoioia fa'alautele, so'o fa'afeso'ota'i maualuga, ma fa'aputuga activated intermediate, ma toega e pei ole phenylglycine, cysteine ​​ma histidine e sili ona faigofie (Bachem; Epimerisation i le Peptide Synthesis, 2023).

Ole tele e fa'alagolago ile auala, ma o le tasi tagata fa'atau oloa e mafai ona fa'aalia le fa'asalalauina nai lo le fa'atulagaina o se fa'ailoga: vaevaega-auala conjugation na gaosia pe tusa 13% fa'avaeina epimer ma fa'agata, ae o le isi auala na faʻaalia ai le 2-3% o le epimerization e alu aʻe i luga 5% ina ua uma ona faamamaina, ma linear SPPS na maua ai le maualuga maualuga e aunoa ma se epimerization na iloa (Bachem). Faitau lena mea e fai ma faʻailoga e uiga i vasega auala o loʻo tauaveina le lamatiaga, e le o se fua faatatau e mafai ona e fa'amoemoe i lau lava fa'asologa. E uiga i

O a fa'amaumauga mama a le RP-HPLC e mafai ma e le mafai ona ta'u atu ia te oe

Se tasi autu-pito pasene pasene i 214 nm e le fa'amaonia le sa'o fa'atasi po'o le gaugau sa'o. O lo'o ta'u atu ia te oe o le ituaiga UV-absorbing i totonu o lau fa'ata'ita'iga e fa'aulu e pei o le tasi pa'u i luga o le tasi keli. O se mea moni aogā lenā, ma o se mea moni laʻititi nai lo le tele o polokalame e faʻatatau i ai.

Mo se tele, sili atu hydrophobic conjugate, o le auala e foia itiiti ifo nai lo le peptide cyclic matua. O le feso'ota'iga ma le elemene E3 fa'aopoopoina le vaega o le hydrophobic, o le taimi o le taofiga e sui, ma ituaiga o lo'o tu'u'ese'ese i luga o le fa'alili o matua ua amata ona fa'atasi. O lo'o fa'ailoa manino mai e se polokalame fa'aleaga peptide degrader disulfide-cyclized disulfide fa'ata'ita'i: tasi le RP-HPLC laa i luga o se 0.1% TFA vai/acetonitrile gradient e 26–43% sili atu 40 minute i 10 mL/min, iloa i 220 nm, fa'ama'iina e mata'ituina e le tele o spectrometry fa'atasi ma le HPLC, ma se siaki mulimuli ole lelei ole HPLC a'o le'i lyophilization (Tuaoi i Immunology, 2023). Matau le mea e le o taʻu mai e lena pepa: soo se tulaga mama. Ole numera ole fa'agasologa ole gaioiga, e le o se faʻamatalaga.

E masani ona faʻamaonia e le au faʻatau oloa ≥95% RP-HPLC mama e fai ma fola mo suʻesuʻega o meaola., ≥98% mo galuega faʻamaufaʻailogaina ma fua-tali, ma ≥99% mo galuega fa'asino-tulaga masani, fa'atasi ai ma le mama fa'amatalaina o le vaega autu-pito i luga o le vaega pito i luga atoa e ala i le su'eina o le UV ile 214-220 nm (GenScript; Foafoa Protectomics, 2025). Fai na fusi e pei o faʻatauga faʻatau nai lo le fuaina o suʻesuʻega e uiga i lau mole. Latou te faʻamatalaina mea o le a faʻamaonia e se tagata faʻatau, e le o le mea e manaʻomia e lau conjugate.

E taua le va ona o le mama peptide ma le gaugau o fesili eseese, ma RP-HPLC e na'o le tali muamua. O se epimer fa'atasi, se isomer disulfide ua gaugau sese, po'o se matua e le'i tali atu e tupu e tamo'e i le taimi e tasi fa'atumauina uma o lo'o iai uma e pei o se tumutumu tasi mama. Fa'asinomaga tele, stereochemistry, ma le fa'amalieina o vaifofo e mana'omia ta'itasi se metotia fa'aola.

Faitau le matrix e fai ma siaki o le inisiua, e le o se faavasegaga. RP-HPLC e aofia ai le hydrophobicity ma le mama. O le LC-MS ma le HRMS e aofia ai le fa'asinomaga tele, o le auala lea e te faʻamaonia ai le faʻapipiʻiina moni o le linker. O le Chiral LC e aofia ai le stereochemistry, o le auala lea e te pu'eina epimerization i le nofoaga conjugation. NMR ma le CD fa'apipi'i fofo fa'atusa, o le auala lena e te iloa ai se conjugate gaugau mai se mea ua tatalaina. E leai se laina se tasi e aofia ai le sili atu ma le tasi koluma, ma o se polokalame e lipotia na o le laina muamua o loʻo i ai faʻamaoniga mo le tasi tonu o fesili e fa.

Le taunu'uga fa'atino mo le filifilia o nofoaga fa'atasi: pe afai o lau afifi au'ili'ili e tasi le su'ega RP-HPLC, e le'i mafai ona e iloa pe o le exit vector na e filifilia na maua ai le conjugate na e mamanuina. Fa'aopoopo i ai auala fa'asolosolo ae e te le'i faia le auala, e le'i toe fo'i mafolafola pe a uma se su'ega fa'amau.

Gaugau ma conformational faamaoniga

Fa'asologa o le Peptide O le ta'amilosaga e fa'alavelave ai le ivi i tua, ae e le fa'amaonia ai o le bioactive conformation e sao mai le fa'aopoopoga o feso'ota'iga. O lena eseesega o le mafuaaga lea e tatau ai ona faʻataʻitaʻi faʻamaoniga faʻamaonia i faʻamaoniga mama: o auala taitasi e taliina e vasega se fesili e le mafai e isi.

O le Chiral LC e fo'ia stereochemistry, o lea e ta'u atu ia te oe pe o le conjugate racemized i toega e te popole i ai. Lipoti CD i fofo tulaga lua, ma lipoti a le NMR i fesoʻotaʻiga faʻapitoa e faʻamatalaina le gauga fusi. E leai se tasi o nei mea e suitulaga i se isi, ma e leai se tasi o ia mea e suitulaga i se faitauga galue. O le mataupu faavae lava lea e tasi e pulea le tulaga o le suʻega: e le lava na'o se fa'ailoga lavelave-ternary, ma le telefoni feavea'i DC50/Dmax tau na'o na'o le phenotypic nai lo le masini (Metotia e su'esu'e ai le Molecular Mechanism ma fa'auma le Design of Degraders, toe aumai 2026-05-14).

Key Takeaway: Ole mama maualuga ole HPLC ole conjugate sa'o. O se tumutumu e mama ma fa'amautu fa'amamafa e mafai lava ona ave le gauga sese i le fa'ata'ita'iga.

Mo lau paketi fa'amatalaga, o lena va o le tulaga lamatia e tapunia. O se conjugate e pasia le mama ma le tele o faʻamatalaga ae e leʻi siakiina faʻatasi e tauaveina se tulaga lamatia e leʻi fuafuaina i luma, ma o le au su'esu'e e fai ma tofi. Fai le mama peptide ma le gaugau o ni laina faʻamaoniga eseese se lua, e tofu ma lana lava metotia ma lona lava tulaga taliaina, a'o le'i tu'uina atu mea i le biology.

Le filifili fa'amaoniga fa'atino su'ega

O se tagi fa'aleagaina o se tagi fa'a-mekanika, ma e leai se su'ega e tasi na te tauaveina. O le filifili molimau e fa so'otaga, ma o le a su'e e se tagata su'esu'e mea uma e fa: fa'avae lavelave ternary, fa'amoemoega ubiquitination, proteasomal faalagolago, ma se fa'ata'ita'iga malosi ma le fa'aalo faitau. Afai e taofi lau afifi pe a uma le sootaga muamua, ua e faaalia le fusia, e le o le faaleagaina.

Galue i lalo le filifili e faasaga i au lava faʻamatalaga. Ternary lavelave: se co-crystal po'o se su'esu'ega fa'aletino e fa'aalia ai le fa'amoemoe, PROTAC ma E3 ligase i le tasi faʻapotopotoga. Ubiquitination: se faitauga tuusao pe le tuusao e maua e le sini lava ia ubiquitin. Proteasomal faalagolago: laveai e se inhibitor proteasome. Malosiaga ma taualuga: DC50 ma le Dmax mai le faasologa tutusa-tali.

O le so'oga lona tolu o le so'oga e masani ona fa'ase'e, ma e taugofie le tapunia. I le galuega peptide cyclic, PD-L1 gau i 2.5 µM mulimuli ane 4 itula na poloka e MG132, o le mea lea e tu'u'ese'eseina ai le fa'aleagaina mai se fa'aa'afiaga fa'aliliuga i lalo (Tuaoi i Immunology, 2023). E mafai ona fa'aalia le fa'atatauga fa'atatau: su'ega su'ega vevela feavea'i na siitia mai le DHHC3 mai 49 °C i sela e lei togafitia i 55 °C i sela e togafitia peptide, fa'amaoniga e o'o atu le fa'afefiloi i le porotini a'o le'i fuaina so'o se fa'aleagaina (Tuaoi i Immunology, 2023).

O lena siata o le finauga sili ona malosi i lenei tusiga mo le togafitia o le elemene E3 o se fesuiaiga o mamanu nai lo se mafaufauga. Suia CRBN mo VHL, fa'atasi ai ma le kemisi taua e tasi, siitia DC50 mai 0.103 µM ia 1.92 µM, ma le lima IAP e 7.530 µM (Oti sela & Fa'ama'i, 2024). Toeititi lava lua fa'atonuga o le tele e tu'u'ese'ese ai le lima sili ma le leaga i le su'ega feavea'i tutusa.

O lea la le va. Ole fa'asologa lava e tasi e lipotia le DC50 tau ae leai se Dmax, e fa'atusaina la le malosi i luga o lima a'o le taualuga o le fa'aleagaina e leai (Oti sela & Fa'ama'i, 2024). O se tuufaatasiga e mafai ona malosi ma o lo'o tu'u pea le tele o le fa'amoemoe. A e tu'uina atu se afifi mai le kemisi i le biology, fesili mo le fua atoa-tali fua, e le o le numera tasi: lagolago su'esu'e galuega o lona uiga ole pi'o, le pule laveai, ma le su'ega fa'atasi, aua o le mea lena o le a fesiligia e le tagata suʻesuʻe ile HIF-1α faʻaleagaina poʻo soʻo se isi lava faʻamoemoe e te agai i luma.

Ole fa'atapula'a o le okesene ile pusa taula

O le taula cyclic peptide PROTAC e toe faʻafoʻisia le VHL-mediated HIF-1α faʻaleagaina malosi i 3% O₂, ma fa'aalia leai se fa'aleaga fa'aleaga i 1% O₂. E le o se faaletonu malosi. I lalo o tulaga lipotia e tumau le fa'aleaga- ma le fa'aleagaina-agavaa i 1% O₂, ae o le resynthesis o le sini e sili atu le kilia, o lea e le pa'u lava le vaita'ele tumau (JACKS, Cyclic Peptide PROTACs Toe Fa'afo'isia VHL-Mediated HIF-1α Fa'aleagaina ile Hypoxia, 2026).

Faitau lena mea o se tulafono mamanu ae le o se vaefaamatalaga: o se faitauga fa'aleagaina e na'o le fa'amatalaina e fa'atatau i le fa'asologa o le fa'asologa o le fa'amoemoe i totonu ole fa'amatalaga feavea'i tutusa. O le DC50 e fuaina i le tasi okesene tete'e e le fa'afeiloa'i i le isi, aua o le numera na e fuaina o le paleni fa'amama, e le o se kilia tumau.

Ae e te le'i fa'atusatusaina lau conjugate i se fa'asalalau DC50, fa'amaonia le vevesi ole okesene, le laina sela, ma le toe fa'atupuina o amioga a le sini i lalo o lea lava tulaga.

O manatu sese masani e alu ai le taimi o polokalame

Fa'ai'uga sese fa'amatalaga mo le tele o le taimi leiloa i se polokalame fa'ata'ita'i peptide PROTAC cyclic. E suitulaga ia mea taitasi i se fua taugofie mo le fesili e mana'omia moni lava e le polokalame ona taliina.

O le mama maualuga o le HPLC e le o se fa'atasi sa'o. O se tumutumu ma'ai se tasi i 95% ta'u atu ia te oe o mea e tutusa i se tasi auala e iloa ai. E le o taʻu atu ia te oe o loʻo nofo le fesoʻotaʻiga i luga o le mea o totoe, o le stereochemistry na sao mai le conjugation, pe o le E3 ligand o loʻo tumau. O le fa'atonuga o le fa'asologa o le fa'asologa: LC-MS mo faʻamaoniga tele, ma se auala lona lua chromatographic poʻo spectroscopic e vavae ese ai le conjugate mai ona isomers tulaga.

O le fa'amauina o fa'amauga fa'amauina e le'o fa'aleagaina. O se su'esu'ega fa'amau e lipotia le nofoia. O le fa'aleagaina e mana'omia ai le tu'ufa'atasia, proteasomal auai ma le taula'i gau, e leai se mea e iloa e se faitauga fa'amau. O le faʻatonuga o le faʻaogaina o fusi e pei o se faitotoa, e le o se mea e gata ai, ma ia mana'omia le fa'avasegaina o le porotini fa'atatau a'o le'i ta'ua le fa'aleagaina.

O se fa'alavelave fa'apitoa i se su'esu'ega o le biophysical e le o le fa'aleagaina o le telefoni feavea'i. E mana'omia le fa'atūina lavelave o Ternary ae le lava; ose fale mautu e mafai lava ona le mafai ona ubiquitylate. O le fofo o le ave lea o le tagi i totonu o sela ma fua sa'o le maualuga o le porotini.

O le DC50 e aunoa ma se Dmax o se vaega o ata malosi. O le malosi ma le lautele o mea eseese, ma se tuufaatasiga e faaleagaina 40% o le sini i le saturation o se manatu ese mai le tasi e fa'amama 90%. O le mea e faʻaleleia o le lipotia o mea uma e lua, i taimi uma, mai le faasologa tutusa fua-tali.

Se fa'avae fa'ai'uga mo le liua

Fa'atino siaki nei e lima e fa'atatau i lau lava polokalama. E tofu uma ma se faiga fa'aletonu e fa'apipi'i, ma e sili atu le taugofie o mea taitasi e toe faaleleia a o lei oo i le isi.

1. Fa'ailoga sui tauva e alu ese vectors fa'apitoa, ae le o le asiasiga. Fa'ailoa le fa'aininisi fa'ata'amilomilo tutusa ma le so'otaga i tulaga eseese e lua pe tolu, fa'agasolo le fa'asologa fa'atasi e ala i le su'ega fa'atatau, ma tuu atu i le faasologa o tulaga e filifilia le manumalo. Faiga fa'aletonu: filifilia o le vete e sili ona faigofie ona maua i luga o le faʻataʻitaʻiga ma iloa pe a uma le fuaina ua leai se fusifusia.

2. Filifili le auala ae e te leʻi faia le fesoʻotaʻiga. I-resin versus solution conjugation e iloa ai le tele o le epimerization lamatia e te tauaveina, ia fai o se filifiliga o le auala ae le o se fa'ata'ita'iga tuai. Faiga fa'aletonu: ose conjugate e fa'amama mama ae ua leiloa le stereochemistry o lo'o fa'alagolago iai fa'amaumauga.

3. Faamama, ona fa'ata'ita'i fa'ata'oto. RP-HPLC mama ma faʻamaufaʻailoga tele tali fesili eseese, ma e leai foi se tasi e lipoti mai e uiga i le conformation. Faiga fa'aletonu: se fa'ata'ita'iga fa'amatu'u tasi-auala e pasia ai se fa'aputuga sese.

4. Fa'amaonia le gaugau ae e te le'i fa'aalu su'ega tala o le tupe. Circular dichroism, NMR, po'o se faitauga fa'amaufa'ailoga fa'apitoa e fa'amaonia ai o lo'o nofoia pea e le fa'atasi le fa'atonuga fa'atatau.

5. Fausia le filifili su'esu'e a'o le'i ta'ua le fa'aleagaina. Fa'atulagaina lavelave Ternary, fa'atatauga fa'atatau, Peptides fa'aola ma o se faitauga fa'aleagaina e tolu tagi eseese, ma o se fa'ai'uga fa'alua e lagolagoina na'o le mea muamua.

Key Takeaway： O fa'amaoniga fa'atusa o le mea lea e fa'ase'e soo e polokalame. E le mafai ona ta'u atu ia te oe fa'amaumauga mama ma le tele o fa'amaumauga pe sa'o gaugau le conjugate, o lea e mafai ai e se vaega ona pasia faitoto'a su'esu'e uma ma e le mafai lava ona fa'atino.

E sili atu le taua o le fa'asologa nai lo so'o se laasaga e tasi: ose polokalame e fa'avasega muamua vectors ma fa'amaonia le fa'aogaina a'o le'i faia le su'ega e 'alofia ai le toe tu'ufa'atasia o se fa'atasi ua uma ona fa'aalia..

Laasaga e sosoo ai

Afai o se polokalame mamanu PROTAC cyclic peptide o loʻo i luga o lau faʻafanua auala, o le isi gaioiga aoga o se talanoaga fa'apitoa nai lo se fa'ai'uga fa'atau. Aumai ni mea se tolu: lau fa'asologa taula ma so'o se fa'amaumauga fa'atulagaina, le exit vector na e filifilia po'o sui o lo'o e fuaina, ma faitauga su'ega o le a talia e lau 'au e fai ma fa'amaoniga o le fa'aleagaina. O na mea e tolu e iloa ai pe o le liua o se faʻapipiʻi tuusaʻo faʻapipiʻi poʻo se toe faʻaleleia e manaʻomia se kemisi fou.

Mo 'au e mana'omia se pa'aga tu'ufa'atasia ma uiga, MOL Suiga o lo'o ta'u mai ai le agava'a i le va'aiga malo ma le fa'apa'iaina o le microbial fermentation, fa'amamāina-si'osi'omaga, HPLC/MS ma sterility QC, ma le fua mg-i-kg. O lena vaega e sili ona taua pe a alu se polokalame conjugate mai mea su'esu'e-fuafua i le aofa'i o se fa'asologa o su'ega fa'atino e mana'omia.. Gaosiga Peptide

Key Takeaway： O faufale o lo'o fa'amatalaina iinei o su'esu'ega reagents. So'o se fa'aliliuga falema'i e mana'omia le fa'amaonia tuto'atasi, ma e leai se mea o lo'o i totonu o lenei ta'iala e suitulaga i lau oe fa'amaumauga fa'apitoa ma fa'aolaola.

Fa'aaliga: O le faʻalapotopotoga a le tusitala e tuʻuina atu peptide synthesis ma faʻamatalaga auaunaga o le ituaiga o loʻo talanoaina i lenei tusiga.

Talanoa i se polokalame fa'aaganu'u tu'ufa'atasi. Fa'asoa lau fa'asologa o taula, fa'atatau i fafo ve'a ma mana'omia su'ega fa'ai'uga, ma talosagaina le afifiina o faamaumauga (auala mama, gradient, MS fa'amaonia ma gaugau fa'amaumauga) fa'atasi ma se telefoni fa'apitoa. Amata se talanoaga polokalame.

Fesili e fai soo

O le a la'u mea e fai pe afai e leai se fa'a-crystal structure o la'u cyclic peptide o lo'o fusifusia i le sini?

Fa'atulaga tulaga fa'apipi'i sui fa'apitoa nai lo le fa'atali mo se fausaga. Fa'ailoa le peptide fa'atasi ma le so'otaga i sui ta'itasi o totoe, ona fua lea i le faasologa: fa'asaoina le fa'atatauga, ternary-faʻalavelave faʻavae ma le E3 ligase, ma le fa'aleagaina o le telefoni. O se tulaga e fa'apalepale i le suitulaga e fa'atumauina lona fa'atasi; o le tasi e le faia e faaleaogaina. Fa'atino sootaga vaapiapi-gaoioiga i se tulaga sui e fai ma faailoilo taofi, aua o le mea e alu i fafo e masalo o lo'o tanumia i totonu o le feso'ota'iga fa'amau.

E sili atu le so'otaga umi mo se peptide cyclic PROTAC?

Leai. O le umi o feso'ota'iga ma le tu'ufa'atasiga e suia ai fa'afanua fa'ato'a fa'ato'a, ma o lena geometry e faʻaosoina le malosi i itu uma e lua. Le ta'ua soo 5-15 fa'amalama atomu e sau mai fa'amaumauga lona lua e le'i mafai ona faitauina ona itulau muamua i lenei tamo'ega, ia fai so'o se vaega fa'apitoa e fai ma manatu amata e su'e ai i se fa'asologa la'ititi, e le o se faʻamatalaga e faʻasaga i ai.

E fa'afefea ona ou iloa le epimerization mai se fa'afitauli gaugau i luga o a'u fa'amaumauga au'ili'ili?

Fa'aaogā metotia fa'a-autogonal, aua e le mafai e se tasi RP-HPLC tumutumu autu ona tuueseeseina ia auala faaletonu e lua. O le Chiral LC po'o le NMR e fa'amalieina le kemisi fa'ata'ita'i ile toega ua a'afia; circular dichroism ma le lipoti a le NMR i le fa'atulagaina o fofo. O le Epimerization ose tulaga lamatia ua iloa o le kemisi fa'atasi nai lo le fa'atauga e talanoa ai, o lea la pe a peptide mama ma gaugau e lua foliga taliaina ma le gaoioiga pa'ū pea, fa'ata'ita'i le su'ega fa'ata'ita'i a'o le'i toe fa'ailogaina le feso'ota'iga.

O le a le fa'ata'ita'iga aupito maualalo o lo'o fa'atulagaina e fa'ailoa ai le fa'aleagaina nai lo le fa'asaina?

Fa fua: ternary-faʻalavelave faʻavae, fa'amoemoega ubiquitination, proteasomal faalagolago faʻamaonia e MG132-ituaiga laveai, ma quantitative DC50 ma Dmax mai fua-tali curves. E le lava na'o Ternary complex, talu ai o le fusifusia e aunoa ma le tuʻuina atu o le ubiquitination e leai se mea e faʻamaonia ai le faʻaleagaina. DC50 ma Dmax na'o na'o mea fa'apitoa: latou fa'aalia ua mou atu le sini e aunoa ma le fa'aalia o le proteasome na mafua ai. Lipoti faatasi le seti, ma ta'u mai le laina sela ma le taimi mo taitasi.