Peptide e Kopana Tlas'a USP 795 le 797: Litokomane

Ke Khaolo efe ea USP e Laolang Peptide ea Hau?

Peptide Synthesis Qeto ea boholo e itšetlehile ka hore na tokisetso e felile e tlameha ho ba e nyopa nakong ea tsamaiso - eseng hore na thepa e qalang ke peptide., thuto ea lintho tse phelang, kapa molek'hule e nyane.

USP General Khaolo <795> bakeng sa motsoako oa nonsterile e sebetsa ha tokiso e sa hlokehe hore e be nyopa nakong ea tsamaiso: metsi a mangata a molomo, phofo e ommeng e tlatsa, litharollo tsa lihlooho, le lihlahisoa tsa lipatlisiso tsa lyophilized tse sebelisoang feela bakeng sa mosebetsi oa in vitro. USP General Khaolo <797> bakeng sa motsoako o sa hloekang e sebetsa ha tokiso e tlameha ho se be le likokoana-hloko tse sebetsang le ho kopana le meeli ea endotoxin sebakeng sa tsamaiso - liente., lefu la mahlo, litokisetso tsa intrathecal, le tsela efe kapa efe moo tšilafalo e bakang kotsi e tobileng ea polokeho ea mokuli kapa liphoofolo.

Se boleloang ke ho rekoa ke hore tsela le foromo li tlameha ho hlaha ka tatellano ea theko - eseng ho latela tatellano.. Morekisi ea sa botseng ka tšebeliso e reriloeng pele a qotsa a ke ke a hlahisa sephutheloana sa litokomane tse ikhethileng, hobane litlhoko li fapana haholo ho pholletsa le mela e tafoleng e ka holimo. Ho ngola moqoqo oo ka mongolo ho sireletsa mahlakore ka bobeli ha lotho e hlahlojoa ho ea tlaase.

Litokomane tsa Boitsebiso: Seo "Se Tiisitsoeng" Ha e le hantle se Bolelang Tatelano e Tloaelehileng

Tlas'a USP e kopanyang logic, netefatso ea boitsebiso e fapane haholo le tlhahlobo ea bohloeki. Identity e araba potso e ikhethileng - na ena ke molek'hule e nepahetseng? - ha bohloeki bo araba palo - ke bokae ba molek'hule e nepahetseng e teng? Ho qotsa data ea HPLC feela e le bopaki ba boitsebahatso ke phoso ea litokomane eo bahlahlobi ba koetliselitsoeng ho kopanya litekanyetso ba tla e tšoaea e le taba ea tloaelo..

Mass Spectrometry e le Bopaki ba Boitsebiso ba Mantlha

Bakeng sa li-peptide tse tloaelehileng le tse fetotsoeng, ESI-MS kapa MALDI-TOF ke mokhoa o amohelehang oa ho netefatsa boitsebiso. Maemo a ho amoheloa bakeng sa tatelano e tloaelehileng ea lisebelisuoa tsa ho rarolla li-unit e hlokometsoe [M+H]⁺ kapa e lefisoa hangata [M+nH]ⁿ⁺ ion ka hare ho ±0.5 Da ea theoretical monoisotopic mass. Bakeng sa lintlha tse phahameng tsa ESI-MS, tekanyetso e tiea ho ��2 ppm.

CoA e tlameha ho tlaleha lintlha tse tharo, eseng a le mong: boima ba khopolo-taba, boima bo hlokometsoeng, le matsoapo a lekantsoeng. Polelo ea "pasa" e se nang palo e tšehetsang palo ha e khonehe ebile ha e netefatsoe ke sehlopha sa laboratori e amohelang QC..

Bakeng sa li-peptide tse ngotsoeng ka isotope kapa tse entsoeng ka deuterium tse sebelisoang e le litekanyetso tsa ka hare, lintlha tse peli tse eketsehileng tsa data lia hlokahala: sebopeho sa enfelopo ea isotopu se tlameha ho tsamaellana le kabo ea theoretical isotopologue bakeng sa boemo bo phatlalalitsoeng ba ntlafatso., mme Δmass e amanang le analogue e sa ngolisoang e tlameha ho oela ka har'a fensetere e lebelletsoeng. Taba ea ho rua e sa tšehetsoeng ke tlhahlobo ea enfelopo e ke ke ea tiisoa ke boima ba limolek'hule feela.

Bakeng sa PEGylated, stapled, kapa li-peptide tsa macrocyclic moo boima ba molek'hule bo fetang mefuta e tšepahalang ea MALDI-TOF kapa moo lienfelopo tsa tefiso li pharalletseng, LC-MS e nang le spectral deconvolution kapa netefatso ea ion ea sekhechana sa MS/MS e lokela ho hlalosoa ho referense ea mokhoa oa tlhahlobo ho CoA.. Haeba sethala se tloaelehileng sa morekisi se ke ke sa amohela ho rarahana ha limolek'hule, ke boitsebiso boo moreki a bo hlokang pele ho qalisoa - eseng ka mor'a hore CoA e fanoe.

Netefatso ea Boitsebiso ba Chromatographic

RP-HPLC e sebetsa joalo ka orthogonal, mokhoa oa ho tiisa - eseng oa mantlha. Kakaretso ea nako ea ho boloka lintho ka bongata, e lekantsoeng ka tlas'a kholomo e ts'oanang, mokhahlelo oa mobile, le maemo a gradient, e tiisa hore thepa e na le hydrophobicity e lebelletsoeng le profil ea ho boloka. Sena se bohlokoa haholo bakeng sa ho lemoha epimerization, moo sebaka sa D-sasidue se ka hlahisang motsoako o nang le boima bo nepahetseng ba molek'hule empa o fetotse boitšoaro ba ho boloka.

CoA e tlameha ho hlakisa: nako ya poloko ya tlhoro e kgolo, mokhahlelo o emeng le litekanyo, boholo ba karoloana, sebopeho sa mohato oa mohala (likarolo tse peli tse nang le metsi le lintho tse phelang), lenaneo la gradient, sekhahla sa phallo, mocheso oa kholomo haeba o laoloa, le bophahamo ba ho lemoha. Nako ea ho boloka ntle le moelelo oa mokhoa e ke ke ea hlahisoa hape, kahoo ha e fane ka boleng ba netefatso.

Foromo ea counterion e hlahisa ts'ebetso e hlophisitsoeng eo hangata e senoloang ntle le ho botsa. Li-peptide tse lokollotsoeng ho Fmoc SPPS tse nang le k'hamera e setseng ea TFA e monyang ho 214 nm mme e ka hlahisa liperesente tse phahameng tsa bohloeki ka ho tloaeleha ha sebaka se amanang le peptide e tšoanang le letsoai la acetate.. Haeba ho tla sebelisoa ho hongata litlhahlobong tse thehiloeng liseleng - moo masala a TFA e leng cytotoxic - CoA e lokela ho netefatsa phapanyetsano ea counterion ka ho hlaka le ho hlakisa foromo ea ho qetela ea letsoai.. Lintlha tsena ke tsa MFR le CoA, e seng khoeleng ea lengolo-tsoibila la morao-rao.

Melao ea Bohloeki le Litlhoko tsa CoA bakeng sa Li-Peptide tse Fetotsoeng

Ho Hlalosa Mokhoa oa ho Amohela Pele Synthesis e Qala

Mohloli o ka qojoang ka ho fetesisa oa ho hana lotho molemong oa ho reka peptide ke poleloana ea bohloeki eo ho neng ho sa lumellanoe ka eona pele ho qalisoa.. Bakeng sa lihlopha tse tloaelehileng tsa boemo ba lipatlisiso, ≥95% bohloeki ka ho tloaeleha ha sebaka sa RP-HPLC ke moeli oa kamohelo o sebelisoang hohle. Bakeng sa lisebelisoa tse reretsoeng ho kopanngoa ha likokoana-hloko kapa tšebeliso e nolofalletsang IND, ≥98% bohloeki ke HPLC ke tebello e tloaelehileng ea indasteri, le hoja tlhaloso e sebetsang e lokela ho ngoloa tumellanong ea boleng ho e-na le ho nahanoa. Tsena ke li-benchmark tsa tloaelo ea indasteri, eseng likhaolo tse laetsoeng ke likhaolo - e leng se etsang hore litokomane tsa bona tse hlakileng mabapi le taelo ea theko e be tsa bohlokoa le ho feta..

Tlhaloso e felletseng ea bohloeki ba pele ho synthesis bakeng sa peptide e fetotsoeng e rarahaneng e lokela ho hlalosoa: (1) bonyane bohloeki ba tlhoro e kholo ka RP-HPLC, (2) maemo a phahameng a amohelehang bakeng sa lihlahisoa tse ka 'nang tsa senyeha - desaminidation, mefuta e nang le oxidized ho Met kapa Trp, Lihlahisoa tsa Asp-Pro bond hydrolysis, tatellano ea ho hlakola - (3) moeli oa endotoxin ho EU/mg haeba motsoako o tla etsoa bakeng sa tšebeliso e nyopa, le (4) foromo ea counterion. Ho ngola lintho tsena pele ho odara ho fetola khetho ea moreki hore e be tumellano e tlamang ea boleng. Ho li theha ka mor'a ho pepa ho fetola ho soetseha ha moreki hore e be boemo ba ho buisana le mofani oa thepa..

Seo CoA e Ikamahanyang le eona e Lokelang ho ba le Eona

CoA e sa kenyelletseng likarolo tse latelang e ke ke ea sebetsa e le rekoto e felletseng ea mangolo tlasa USP e kopanyang litokomane tsa logic.:

CoA e haelloang ke karolo efe kapa efe tafoleng ena ha ea phethahala bakeng sa merero ea litokomane tsa boemo bo kopaneng. Ketso e nepahetseng ke ho kopa data e sieo pele o amohela lotho - eseng ho hlakisa lekhalo la rekoto e amohelang ebe o tsoela pele..

⚠️ Tlhokomeliso: Ho amohela CoA e sa fellang le ho ngola sekheo rekotong ea hau ea IMA ha ho koale lekhalo molemong oa tlhahlobo.. E fana ka tumello e ka lateloang ea hore maemo a tlang a thepa a ne a sa fihlellehe ka boomo.

Maemo a polokelo, Beyond-Use Dating, le Boitsebiso ba Botsitso ka morao ho Bona

Ho ratana ka ntle ho ts'ebeliso ke e 'ngoe ea maikutlo a sa utloisisoang khafetsa ho moreki le moreki.. BUD ha se taba ea ho felloa ke nako. Nako ea ho felloa ke nako e fanoe ke moetsi oa pele tlasa lithuto tsa botsitso tse lumellanang le ICH Q1A mme e bonts'a bophelo bo netefalitsoeng.. BUD e baloa ho tloha ka letsatsi kapa nako ea ho kopanya 'me e bonts'a hore na tokiso e lebelletsoe ho boloka sebopeho sa eona halelele hakae tlasa maemo a boletsoeng a polokelo., joalo ka ha ho theiloe ka mokhoa o ts'oarellang ke motsoako (ASHP, Tataiso ea Bo-rakhoebo ea ho Abela Letsatsi le Fetang Tšebeliso).

Molao o laolang oa kabelo ea BUD: BUD e tlameha ho ba eona pejana ea moeli oa ho hloleha o thehiloeng ho sterility le moeli ofe kapa ofe o mokhuts'oanyane o behiloeng ke ho felloa ke nako ha karolo, letsatsi la tekolo botjha, kapa ho fumana botsitso ho tlalehiloeng. Maemo a polokelo ha a atolose BUD ho feta meeli ea motsoako - a khetha hore na ke sehlopha sefe sa BUD se sebetsang ha ho se na tšitiso ea karolo e lekanyelitsoeng..

Bakeng sa litokisetso tse sa hloekang tlas'a <795>, mefokolo ka ho ba sieo ha tšehetsa data botsitso ke: tharollo ea metsi, 14 matsatsi a mocheso o batang o laoloang; maro a senang metsi le metsoako e tiileng, 6 likhoeli. Bakeng sa li-powder tsa peptide tse nang le lyophilized tse tšoaroang e le lisebelisoa tse tala tse sa hloekang, BUD e leqhoa ea likhoeli tse 6 e ka sireletseha ha feela setshelo se tiisitsoe, deiccated/ E, sepakapakeng sa inert, 'me e ts'oaroe e sa khaotse ho −20°C kapa ka tlaase ho moo. Ho qhoqhoa ha libaesekele ho lokisa maemo a kotsi 'me ho lokela ho qala tlhahlobo e ngotsoeng hape.

Bakeng sa litokisetso tse nyopa tlas'a <797>, BUD e atolositsoeng (ho feta mocheso oa kamore oa lihora tse 12 kapa lihora tse 24 tsa sehatsetsing sa maemo a holimo bakeng sa Sehlopha 1 CSPs) e hloka boitsebiso bo tsitsitseng bo ngotsoeng ho tsoa ho sebopeho sa sebele tsamaisong ea sebele ea ho koala setshelo tlas'a maemo a sebele a polokelo (USP General Khaolo <797> LBH, 2023). Morekisi ea qotsang BUD ea matsatsi a 30 ka tharollo ea peptide e sa sebetseng ntle le tšupiso ea boithuto ba botsitso o fana ka nomoro., eseng letsatsi le tšehetsoeng ke saense.

Bofokoli bo ikhethileng ba Peptide bo amanang le polokelo le liqeto tsa BUD li kenyelletsa: oxidation ho Met, Cys, le masala a Trp tlas'a maemo a aerobic; Asp-Pro hydrolysis tlas'a maemo a acidic le mocheso o kaholimo ho mocheso o laoloang oa kamore; aggregation ka hydrophobic kapa disulfide-e nang le tatelano mabapi le leqhoa le qhibiliha baesekele; le racemization ka masala a itseng tlas'a sehatsetsi sa nako e telele. Bofokoli bona bo tlameha ho boleloa ho lengolo la tekheniki la mofani oa thepa - eseng ho nahanoa ke moreki - hobane bo ama ka kotloloho maemo a polokelo a loketseng le hore na BUD e lokela ho beoa ka mokhoa o hlokolosi hakae..

Litlhoko tsa ho ngola tse tšoarellang tlas'a tlhahlobo

Likahare tse tlase tsa lileibole bakeng sa tokiso e kopaneng e hloekisitsoeng li boletsoe ho USP General Chapter <797>: mabitso le bongata kapa bokahare ba metsoako e sebetsang, ea BUD (joalo ka letsatsi, kapa hora le letsatsi moo fensetere ea tsamaiso ea lihora tse 4 e sebetsang), maemo a polokelo, boitsebiso ba motsoako, le sesupo se hlakileng sa hore tokiso e kopane. Ha tokisetso e ajoa ho e-na le ho tsamaisoa ka ho toba, leibole e boetse e tlameha ho bolela nako eo tsamaiso e tlamehang ho qala ka eona.

Bakeng sa li-peptide tsa lipatlisiso tse tloaelehileng, Leibole e tlameha ho kenyelletsa sekhetho sa tatelano kapa khoutu e khutsufalitsoeng ea phetoho. Sena se bohlokoa haholo bakeng sa lilaebrari tse fapaneng, li-analogue tse ngotsoeng ka isotopically, kapa mefuta e fapaneng ea degree ea PEGylation moo tlhahlobo ea pono e sa faneng ka lebaka la khethollo. Leibole e reng "Peptide A, 5 mg/mL” ha li-peptide tse 'ne tse amanang le sebopeho li le polokelong ha li so lokisoe bakeng sa tikoloho ea lipatlisiso e laoloang..

Bakeng sa li-powder tse omeletseng tsa peptide tse lokollotsoeng e le lisebelisoa tse tala tse sa hlakoheng ka tlase <795>, litaba tsa laibole tse hlokahalang bakeng sa kamohelo ea hau ea thepa e kenang SOP ke maemo a sebetsang: nomoro ea lotho, tatelano, boima kapa bongata ba mole, sephetho sa bohloeki (kapa nomoro ea referense ea CoA), foromo ea counterion, mocheso oa polokelo le maemo, le letsatsi la tlhahlobo hape kapa la BUD. Khoutu ea QR e hokahanyang le CoA ea dijithale ke mokhoa o motle ka ho fetisisa - e fokotsa phoso ea ho ngoloa mme e potlakisa tlhahlobo ea IMA - leha e se tlhoko ea khaolo..

Litlaleho tse Hlano tsa Analytical Morekisi e mong le e mong ea tsoetsoeng a hloekile o lokela ho fana ka

Bakeng sa lisebelisoa tsa peptide tse hloekisitsoeng, mekhahlelo e mehlano ea lirekoto e theha ketane ea bopaki e ka sirelelitsoeng ho tloha ho tse tala ho isa ho lotho e lokollotsoeng. E 'ngoe le e' ngoe e sebetsa ka mokhoa o ikhethileng oa sistimi ea boleng. Ka kopanelo, ba araba potso eo mohlahlobi a lokelang ho e botsa: sebaka sena se entsoe hantle, ka batho ba tšoanelehang, sebakeng se laoloang, mme e lokollotswe ho latela data e felletseng?

1. Rekote ea Foromo e Sebele (MFR). MFR ke mokhoa o emeng: motsoako o mong le o mong ka lebitso le mophato, bongata, boitsebiso ba thepa, mohato ka mohato mokhoa oa ho kopanya le oa ho sebetsa, mekhoa ea ho amoheloa ha e ntse e sebetsa, le libaka tsa tlhahlobo tsa taolo ea boleng. Bakeng sa li-peptide tse tloaelehileng, MFR e ikhethile ka ho hlaka - e bua ka ho kenya resin, coupling cycle parameters, maemo a petsoho, le mokhoa oa tlhoekiso. Ke motheo oa litšupiso oo kheloha efe kapa efe e sekasekoang. Ho kheloha ntle le MFR ha ho na moelelo.

2. Rekote e Kopanyang (CR) / Batch Record. CR e ngola se hlileng se etsahetseng bakeng sa lotho e itseng: boitsebiso ba moetsi le letsatsi, bongata ba sebele le disebediswa tse sebedisoang, boitsebiso ba thepa, maemo a tikoloho ka nako ya tokiso, ho kheloha ho tsoa ho MFR le sebopeho sa bona, le netefatso ea opareitara le ea motho oa bobeli. CR e fapane le MFR - e khethehile haholo, eseng mokhoa o itseng. E ngata e nang le MFR feela mme ha ho CR e se nang rekoto ea ho bolaoa.

3. Litlaleho tsa Koetliso ea Basebetsi le Bokhoni ba Bokhoni. USP <797> e hloka bokhoni bo tlalehiloeng bakeng sa basebetsi bohle ba amehang ho kopantseng likokoana-hloko, ho kenyeletsoa lisampole tsa monoana oa litlelafo le monoana o motona, media-fill qualification, mohlala oa bokaholimo, garbing le bokgoni ba ho hloekisa, le ho fumana mangolo a selemo kapa a nako le nako (Litaelo tsa ASHP mabapi le ho Kopanya Litokisetso tse Nyopa, 2014). Lisetifikeiti tsa ho phethela koetliso lia hlokahala empa ha lia lekana - ho hlokahala liphetho tsa tlhahlobo ea boiphihlelo tse tlalehiloeng.

4. Lethathamo la Tlhokomelo ea Tikoloho. Setifikeiti sa phaposi e hloekisitsoeng ea classified ke setifikeiti sa nako e le 'ngoe; lethathamo la tlhokomelo ea tikoloho ke bopaki bo tsoelang pele ba hore maemo ka har'a sehlopha seo a ntse a bolokoa. Lenane le tlameha ho kenyelletsa sampole ea moea e sebetsang le liphetho tsa lisampole tsa bokaholimo, lipalo tse sa sebetseng hantle, lipalo tse fapaneng tsa khatello, data ea mocheso le mongobo, meeli ea liketso bakeng sa sebaka ka seng sa ho beha leihlo, le diketso tsa tokiso tse ngotsweng bakeng sa kgato e nngwe le e nngwe. Log e bontšang liphetho ntle le meeli ea liketso e ke ke ea hlahlojoa; log e bonts'ang feela data e sa sebetseng ntle le tlhahlobo e sebetsang ha ea phethahala bakeng sa <797> tumellano. Morekisi-boemo moralo oa taolo ea bafani bakeng sa lisebelisoa tse tala le ho thibela likokoana-hloko e fana ka mohlala o le mong oa hore na tlhahlobo ea tikoloho e hokahana joang le liqeto tsa tokollo ea lotho.

5. Analytical Release Records. Tsena ke lintlha tsa mohloli ka morao ho CoA: chromatogram e felletseng ea HPLC e nang le tafole ea kopanyo, spectrum e felletseng ea MS e nang le deconvolution moo ho hlokahalang, tlaleho ea tlhahlobo ea LAL endotoxin e kenyelletsang mokhoa o tloaelehileng oa curve, le tlaleho ea tlhahlobo ea sterility moo lotho e kopantsoeng tlas'a maemo a nyopa. Lirekoto tsa tokollo li tlameha ho bolokoa ka mokhoa o ka khutlisoang nako e tlase e hlalosoang ke maemo a sebetsang a boleng - hangata bonyane 3 lilemo tsa ho etsa lipatlisiso-grade thepa. Morekisi ea nang le tsebo o lokela ho khona ho hlahisa lirekoto tsena ha a li kopile ntle le ho hloka phatlalatso e hlophisitsoeng ea tlhahlobo..

Likheo Tse Tloaelehileng Tsa Litokomane Tse Hlolehang Litlhahlobo

Mefokolo e hlahang ka mokhoa o hlakileng litlhahlobong tsa barekisi ba li-peptide ha li rarahane kapa ha li tloaelehe. Ke likheo tse tloaelehileng tseo litsamaiso tsa boleng bo khannoang li koaloang ka tloaelo - le hore barekisi ba leseli la litokomane ha ba koale ntle le khatello ea kantle.. About

BUD e abetsoe ntle le data ea botsitso. BUD ea matsatsi a 30 kapa a 90 ka mokhoa o sa tsitsang oa hore ha ho na boithuto ba botsitso ke palo e sa tšehetsoeng.. Bahlahlobi ba botsa lintlha tse tšehetsang e le potso ea pele; "Ts'ebetso e tloaelehileng ea indasteri" ha se litšupiso tse amohelehang, 'me "motsoako o tšoanang o sebelisoang libakeng tse ling" hase data ea botsitso bakeng sa tlhahiso ea hau.

CoA e haelloa ke mokhoa kapa litlhaloso tsa kholomo. E tlalehiloeng bohloeki ba HPLC ea 98.5% e ke ke ea netefatsoa ka boikemelo ntle le mokhoa. Mokhahlelo oa ho ema, litekanyo, boholo ba karoloana, mokhahlelo oa mobile, gradient, sekhahla sa phallo, mocheso, le wavelength kaofela li tlameha ho hlaha ho CoA kapa tokomaneng ea litšupiso ea mokhoa e boletsoeng ke CoA. Haeba kholomo e fetohile pakeng tsa lotho, taba eo e tlameha ho ngoloa.

Moeli oa Endotoxin ha o boleloe. Bakeng sa lisebelisoa tse hloekisitsoeng, CoA e tlameha ho bolela moeli oa kamohelo (mohlala, <1 EU/mg kapa <0.5 EU/mg, ho itšetlehile ka kopo), Phapang ea mofuta oa LAL, le sephetho sa sebele. Sephetho se tlalehiloeng ntle le moeli o boletsoeng se siea sehlopha sa QA se sa khone ho lekola hore na lotho e fetisitse mokhoa o nepahetseng - e leng boemo bo sa atleheng tlhahlobong., ho sa tsotellehe boleng ba palo.

Ha ho na litokomane tsa ketso ea tokiso bakeng sa ho fetella ha tikoloho. Lethathamo la tlhahlobo ea tikoloho le bonts'ang ho fetella ha moeli oa ts'ebetso ntle le kenyo e latelang ea tokiso e bonts'a hore ha ho lipatlisiso tse entsoeng kapa hore ha lia ngoloa.. Ka bobeli li na le mathata. Bafuputsi ba nka sena e le ho hloleha ha boleng ba tsamaiso ho e-na le ho hloleha ho boloka tlaleho.

Boitsebiso bo tiisitsoe ke chromatography feela. Nako ea ho boloka HPLC e ka tiisa boitsebahatso empa e ke ke ea e netefatsa bakeng sa tatelano ea moetlo. Tatelano e qaphalelitsoeng, masala a racemized, 'me li-analogue tsa ho hlakoloa li ka sebetsa hammoho tlas'a maemo a tloaelehileng a RP-HPLC ka nako e lebelletsoeng ea ho bolokoa. Lintlha tsa MS ke eona feela mokhoa o fanang ka netefatso ea boitsebiso ba limolek'hule bakeng sa tatelano ea tloaelo; bosieo ba eona ho CoA ke lekhalo la litokomane tsa boitsebiso, eseng taba ea bohloeki.

Ho Lokahanya Litokomane tsa Bafani le QMS ea Hao ka Ntlong

Litlhoko tsa litokomane tse kaholimo li na le thuso ha feela li ka tsamaisa 'mapa ka mokhoa o hloekileng ho sistimi ea hau ea taolo ea boleng ba kahare. Mokhoa o atileng haholo oa ho hloleha ha se ho ba sieo ha lirekoto tsa bafani - ke sebopeho se sa lumellaneng. Li-CoA tse nang le li-labels tse sa tloaelehang, lirekoto tsa sehlopha ka liforomo tsa mong'a tsona, kapa litlaleho tsa tlhahlobo tse qotsang mekhoa ea ka hare ntle le phetolelo ea kantle li baka likhohlano mabapi le kamohelo ea thepa e kenang le ho eketsa linako tsa tlhahlobo bakeng sa lotho e 'ngoe le e 'ngoe..

Tharollo ke tumellano ea boleng eo ho buisanoeng ka eona pele ho theko ea pele, eseng ka lebaka la ho hana lotho ea pele. Tumellano ea boleng ba lisebelisoa tsa peptide e lokela ho hlakisa: masimo a nepahetseng a hlokehang ho CoA, sebopeho le melawana ya mabitso bakeng sa direkoto tsa sehlopha, nako ea ho fana ka data e tala ea tlhahlobo ka kopo, mokgoa wa ho buisana ka diphapano tsa kamora ho pepa, le ho tlaleha boitlamo ba ho boloka. Hang sebakeng, e fetola litlhoko tsa hau tsa QMS hore e be tse tlamang mofani oa thepa ho e-na le lintlha tsa lipuisano tsa ka mor'a.

Lintlha tse tharo li ke ke tsa buisanoa tumellanong efe kapa efe ea boleng, ho sa tsotelehe boemo ba thepa kapa bophahamo ba modumo: CoA e khethehileng haholo e nang le litšupiso tsa mekhoa e felletseng (eseng template e nang le palo e ngata e kentsoeng), data e tala e fumaneha ka kopo ka har'a fensetere e hlalositsoeng, le mokhoa o ngotsoeng oa phatlalatso oa ho kheloha o nang le linako tsa tsebiso. Ho theha tsena pele ho qalisoa ho felisa boholo ba likhohlano tsa boleng bo tlase tse jang nako ea projeke.

Bakeng sa lihlopha tsa lipatlisiso tse ahang kapa tse hlahlobang lenaneo la mangolo a bafani ba thepa, mokhoa o sebetsang oa ho ho haha ​​​​tsoelopele ea barekisi ba peptide pele ho thuto e qala ka sebopeho sa tumellano ea boleng, eseng ka tlhahlobo ea pele ea CoA. SOP e amohelang thepa e kenang e ke ke ea sebetsa joalo ka filthara ea boleng haeba e sebelisoa feela ka mor'a hore lisebelisoa li se li hlahisitsoe ka mokhoa o sa lumellaneng..

Bakeng sa tatelano e fetotsoeng kapa e rarahaneng - li-peptide tsa PEGylated, cyclic scaffolds, maemo a ka hare a isotope - khetho ea mokhoa oa tlhahlobo bakeng sa boitsebiso le netefatso ea bohloeki e hloka puisano pele ho qaptjoa, eseng ka mor'a hore lotho e lokolloe. The MOL E fetola sethala sa peptide synthesis ea tloaelo e fana ka li-CoA tse khethehileng haholo joalo ka mokhoa o tloaelehileng o ka tlisoang, ka li-chromatogram tsa HPLC, MS spectra, le litlaleho tsa endotoxin LAL tse fumanehang ha li kopuoa ka mokhoa oa ho ngola litokomane tsa boleng ba lintho tse hloekisitsoeng. Lihlopha tsa lipatlisiso tse hlokang ho netefatsa sephutheloana se felletseng sa litokomane pele li itlama ho tse ngata li ka kopa tlhahlobo e khethehileng ea data pele ho odara..

Haeba litlhoko tsa hau tsa litokomane tsa peptide tse kenang ha li so hlalosoe ka botlalo, kapa haeba o laola phetoho ho tsoa ho mofani oa thepa ea nakong e fetileng ka maemo a fapaneng a litokomane, mohato oa pele o sebetsang ke moqoqo oa tekheniki o reriloeng esale pele. Ikopanye le MOL E Fetola synthesis le sehlopha sa QC ho ikamahanya le litlhoko tsa tšimo ea CoA, litlhaloso tsa mokhoa oa ho hlahloba, le sebopeho sa rekoto ea batch pele synthesis e qalisoa - e potlakile haholo ho tiisa hore tokiso e ngotsoeng pele e ngata e le teng ho feta ho e buisana hape kamora.