Modificações de Peptídeos
Peptídeos Marcados com Isótopos
O que são peptídeos marcados com isótopos?
A marcação com isótopos estáveis é um reagente químico no qual as moléculas de um composto contêm um ou mais átomos de isótopos estáveis e são analisadas e determinadas usando suas propriedades traçadoras exclusivas..
As técnicas de marcação com isótopos estáveis baseiam-se no princípio de rotular um reagente substituindo átomos específicos por um isótopo, que então faz com que o reagente sofra uma reação e detecte os átomos com uma mudança no número de nêutrons, que pode ser rastreado por reações, vias metabólicas ou células. Isótopo estável (13C, 15N, 13C15N) peptídeos marcados são comumente usados como ‘marcadores químicos’ em proteômica quantitativa para a detecção e rastreamento de amostras biológicas. Os métodos proteômicos quantitativos usam principalmente espectrometria de massa de alta resolução para separar íons peptídicos marcados com isótopos e não marcados ou íons peptídicos, e usar os valores de intensidade de seus sinais detectados para cálculos quantitativos.
A tecnologia de rotulagem de isótopos estáveis tem as vantagens de alta sensibilidade, posicionamento simples e quantificação precisa, o que faz com que a modificação de isótopos receba cada vez mais atenção no campo da medicina e da bioquímica.
Peptídeos Marcados com Isótopos
Ferramentas de precisão para pesquisa
Peptídeos marcados com isótopos estáveis são sintetizados pela substituição de átomos específicos em aminoácidos naturais por isótopos pesados, como substituir 12C por 13C, 14N com 15N, ou 1H com 2H (deutério). Essas modificações resultam em compostos marcados com isótopos que retêm as mesmas propriedades físico-químicas e reatividade química que seus equivalentes não marcados.. Isso os torna indispensáveis em uma ampla gama de aplicações científicas, incluindo espectrometria de massa, Estudos de RMN, e análises farmacocinéticas.
|
Aminoácido
|
Isótopo
|
Diferença de massa para AA não rotulado
|
|---|---|---|
|
Alanina |
Você- 13C3, U-15N |
+4 E |
|
Arginina |
Você- 13C6, U-15N4 |
+10 E |
|
Leucina |
Você- 13C6, U-15N |
+7 E |
|
Lisina |
Você- 13C6, U-15N2 |
+8 E |
|
Fenilalanina |
Você- 13C9, U-15N |
+10 E |
|
Prolina |
Você- 13C5, U-15N |
+6 E |
|
Valina |
Você- 13C5, U-15N |
+6 E |
Citações em destaque
Usando marcação com isótopos estáveis para avançar na nossa compreensão da etiologia e patologia da doença de Alzheimer
Rotulagem de isótopos estáveis com espectrometria de massa (EM)-a análise proteômica baseada tornou-se uma estratégia poderosa para avaliar os níveis de proteína no estado estacionário, rotatividade de proteínas, e localização de proteínas. A aplicação destas plataformas de análise a doenças neurodegenerativas pode revelar novos aspectos da etiologia destas doenças devastadoras. Recentemente, isótopos estáveis-MS têm sido usados para investigar mecanismos patológicos precoces da doença de Alzheimer (ANÚNCIO) com modelos de ratos com patologia semelhante à DA. Nesta revisão, resumimos esses projetos experimentais de isótopos estáveis-MS e a recente aplicação no contexto da patologia da DA. Também descrevemos nossos esforços atuais visando o uso de ressonância magnética nuclear (RMN) análise de fibrilas amilóides marcadas com isótopos estáveis de cérebros de modelo de camundongo com DA. Coletivamente, essas metodologias oferecem novas oportunidades para estudar alterações proteômicas na DA e outras doenças neurodegenerativas, elucidando mecanismos para tratamento e prevenção.
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