Հաճախակի տրվող հարցեր

Պարզապես բարդացնել միլիգրամից մինչև կիլոգրամ


Պատվերով գնանշման հարցում


How to store peptides?


Լյոֆիլացված պեպտիդներ

Պեպտիդների երկարատև պահպանման համար, խորհուրդ ենք տալիս դրանք պահել որպես պինդ փոշի. Լյոֆիլացված պեպտիդները կարող են պահվել -20°C կամ ավելի ցածր ջերմաստիճանում՝ նվազագույն քայքայմամբ. Հաճախորդներին խորհուրդ է տրվում ամեն անգամ վերստուգել հարմարեցված պեպտիդները 2 տարիներ որակի հսկողության թողարկման օրվանից.

Պեպտիդները լուծույթում

Պեպտիդները լուծույթում ավելի քիչ կայուն են և հակված են քայքայման. Պեպտիդները լուծելու համար օգտագործվող ջրային լուծույթները պետք է լինեն ստերիլ և մաքուր.

Լուծման մեջ, որոշակի քանակությամբ պեպտիդ կարող է քայքայվել, կախված հաջորդականության մեջ առկա ամինաթթուներից. Որոշ օրինակներ թվարկված են ստորև:
– Մեթիոնին պարունակող պեպտիդներ, ցիստեինի կամ տրիպտոֆանի մնացորդները պետք է ունենան լուծույթի պահպանման սահմանափակ ժամանակ՝ օքսիդացման պատճառով. Այս պեպտիդները պետք է լուծվեն թթվածնազուրկ լուծիչի մեջ. –
Գլուտամինը և ասպարագինը կարող են վերածվել գլուտամինաթթվի և ասպարաթթվի, համապատասխանաբար. –
Ցիստեինը կարող է ենթարկվել օքսիդատիվ ցիկլացման՝ ձևավորելու ցիստեին-ցիստեին դիսուլֆիդային կապ (որոնք կարող են առաջանալ դիսուլֆիդային կապերի ներսում կամ դրանց միջև). –
Լիցքավորված մնացորդները (ասպարտիկ թթու, գլուտամիկ թթու, լիզին, արգինին, հիստիդին) հիգրոսկոպիկ են (օդից ջուր կլանելը) և հակված են մածուցիկ ձևավորելուն, պարզ յուղ. Այս ֆիզիկական փոփոխությունը չի կարող ազդել պեպտիդի բնույթի վրա. Խորհուրդ է տրվում, որ նման պեպտիդները լիոֆիլիզացվեն ջրի հետքի քանակությունը հեռացնելու համար, այնուհետև գազազերծվում է ազոտով, որպեսզի համոզվի, որ սրվակի մեջ ջրի գոլորշի չկա, իսկ հետո արագ փակվեց.

Կրկնվող սառեցման և հալեցման վնասը կանխելու համար, Մենք խորհուրդ ենք տալիս օգտվողներին լուծարել միայն ընթացիկ փորձի համար պահանջվող պեպտիդների քանակը. Լուծույթի ավելցուկը պետք է պահվի ≥ -20 o C մինչև անհրաժեշտ լինի.

Խուսափեք խոնավությունից.
Քանի որ խոնավությունը զգալիորեն նվազեցնում է պեպտիդների երկարաժամկետ կայունությունը, Մենք խորհուրդ ենք տալիս պեպտիդները չորացնող սարքում հավասարեցնել սենյակային ջերմաստիճանին՝ նախքան սրվակները բացելը. Պեպտիդների տրամադրման ավարտից հետո, Խողովակի մեջ մնացած պեպտիդները պետք է նրբորեն մաքրվեն անջուր ազոտով, ապա բեռնարկղը պետք է ծածկված լինի, կնքված կնքման թաղանթով, և պահվում է -20°C ջերմաստիճանում.


Տարբեր պեպտիդների լուծելիության բնութագրերը զգալիորեն տարբերվում են. Մնացորդներ, ինչպիսիք են ալանինը (Ալա), ցիստեին (Cys), isoleucine (Հետ), լեյցին (Լեյ), մեթիոնին (հանդիպեց), ֆենիլալանին (Ֆե), և վալին (Վալ) ավելացնել պեպտիդի հիդրոֆոբությունը և լուծելիությունը ջրային լուծույթներում, և խորհուրդ է տրվում, որ հաճախորդը հետևի այս ուղեցույցներին պեպտիդները հարմարեցնելիս.

Լուծելիության հատկություններ

Պեպտիդների լուծելիությունը մեծապես կախված է ամինաթթուների հաջորդականությունից. Բնական հիդրոֆոբ պեպտիդներ (Ա, Ֆ, Գ, Վ, Լ, Ի, Մ, Վ, Պ–ն ավելի բարձր հակումով) լուծարման համար պահանջում են օրգանական լուծիչներ. Թթվային պեպտիդներ (ավելի բարձր հակում դեպի Դ, E պեպտիդային հաջորդականությամբ) լուծելու համար պահանջում են հիմնական ջրային բուֆերներ, մինչդեռ հիմնական պեպտիդները (ավելի բարձր հակում դեպի Կ, Հ, և Ռ) պահանջում են թթվային ջրային բուֆերներ լուծելու համար.

Լուծիչների ընտրություն

Հաշվի առնելով ձեր վերլուծության սահմանափակումները, խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել հետևյալ ուղեցույցները՝ պեպտիդների լուծարման լավագույն լուծիչը որոշելու համար

Հիդրոֆոբ պեպտիդներ

Հիդրոֆոբ պեպտիդները նորից լուծելու համար, ավելացնել 100 µL DMSO և արտաձայնեք մինչև համասեռ լուծույթի ձևավորումը. Հաջորդը, ավելացրեք ձեր ընտրած բուֆերը՝ ա 1 մգ/մլ լուծույթ (այնքան բարձր է պեպտիդների կոնցենտրացիան, այնքան մեծ է պահանջվող DMSO-ի քանակը).

Հիդրոֆիլ (Թթվային) Պեպտիդներ

Թթվային պեպտիդները նորից լուծելու համար, ավելացնել 100 μL-ի 1% ՆՀ 4 OH դեպի 1 մգ պեպտիդ և հորձանուտ. Երբ լուծումը պարզ է, ավելացրեք ձեր ընտրած բուֆերը՝ ա 1 մգ/մլ լուծույթ.

Հիդրոֆիլ (Հիմնական) Պեպտիդներ

Հիմնական պեպտիդը վերականգնելու համար, ավելացնել թորած ջուր 1 մգ պեպտիդ և հորձանուտ.


Արդյունաբերության ստանդարտը պեպտիդների մատակարարումն է լիոֆիլացված տեսքով՝ որպես համախառն քաշ. Պեպտիդների համախառն քաշը դա լիոֆիլացված փոշու մեջ առկա բոլոր բաղադրիչների ընդհանուր քաշն է. Սա ներառում է հետաքրքրություն ներկայացնող պեպտիդը, ցանկացած պեպտիդային կեղտեր, ջուր, մնացորդային լուծիչներ, և հակահարված.

Ընդհակառակը Ցանց պեպտիդների քաշը, հաշվարկված է Պեպտիդների զուտ պարունակությունը, -ի քաշն է միայն պեպտիդը բաղադրիչ, որը առկա է լիոֆիլացված փոշու մեջ. Սա առաջարկում է ձեր հետագա պեպտիդային լուծույթների ավելի ճշգրիտ կոնցենտրացիաներ. Ուստի, մենք խորհուրդ ենք տալիս զուտ պեպտիդների քաշի քանակները Պատվերով պեպտիդ պատվերներ.

Զուտ պեպտիդային բովանդակության նկարազարդում

Զուտ պեպտիդային բովանդակություն չափումը կատարվում է ամինաթթուների վերլուծությամբ (AAA; սահմանափակ ճշգրտություն, բայց պահանջում է նյութի ցածր քանակություն) կամ տարրական վերլուծություն (CHN; պահանջում է միլիգրամ պեպտիդ, բայց ավելի ճշգրիտ է). Երկու մեթոդներն էլ տալիս են տոկոսային արժեք (այսինքն., 75% զուտ պեպտիդների պարունակությունը).

Պեպտիդների զուտ պարունակությունը կախված է առկա հակաիոնի քանակից*, որը կախված է պեպտիդային հաջորդականությունից. Ըստ էության, այնքան բարձր է պեպտիդային լիցքը, այնքան ցածր է պեպտիդների պարունակությունը

*Նշում: Պեպտիդների զուտ պարունակությունը հաշվարկելու համար օգտագործվող տարրը հիմնված է պեպտիդ հակաիոնի վրա. Սա արվում է ապահովելու համար, որ հակա-իոնը չի նպաստում պեպտիդների պարունակության քանակին. Օրինակ, երբ TFA-ն կամ ացետատը հակա-իոն են, ազոտն օգտագործվում է, քանի որ այն գտնվում է պեպտիդում, բայց ոչ TFA-ում կամ ացետատում. Ածխածինը կամ ազոտը կարող են օգտագործվել, երբ քլորիդը հակաիոն է նույն պատճառով.

Պեպտիդների զուտ քաշի հաշվարկներ:

Պեպտիդների զուտ քանակություն (ընդհանուր պեպտիդ) - մեթոդ, որը մենք օգտագործում ենք զուտ մաքսային պեպտիդային պատվերների համար.

Բազմապատկեք զուտ պեպտիդների պարունակության տոկոսը (տասնորդական ձև) ըստ պեպտիդների համախառն քաշի, ձեռք բերել զուտ պեպտիդ քանակի գումարը (ընդհանուր պեպտիդ).

Օրինակ:
Համար 5 մգ համախառն պեպտիդ/սրվակ:
Պեպտիդների զուտ պարունակությունն է 84%.
Ընդհանուր պեպտիդների ճշգրիտ քանակությունը = 0.84*5 մգ=4,2 մգ ընդհանուր պեպտիդ

Հետաքրքրությունների զուտ պեպտիդը` առավել ճշգրիտ — հաճախորդը կարող է ինքնուրույն օգտագործել այս մեթոդը՝ հետաքրքրող պեպտիդը հաշվարկելու համար.

Պեպտիդների զուտ պարունակության տոկոսը բազմապատկեք պեպտիդների համախառն քաշով, և պեպտիդային մաքրությունը (HPLC-ով), ձեր ունեցած հետաքրքրող պեպտիդի ճշգրիտ քանակությունը հաշվարկելու համար. Պեպտիդների զուտ տոկոսը (տասնորդական ձև) բազմապատկվում է պեպտիդային մաքրությամբ (տասնորդական ձև).

Օրինակ:
Համար 5 մգ համախառն պեպտիդ/սրվակ հետ:
Պեպտիդների զուտ պարունակությունն է 84%.
Հետաքրքրվող պեպտիդների ճշգրիտ քանակը = է 0.84*0.96*5 մգ=4,03 մգ


MOL Changes-ն օգտագործում է պինդ փուլի Fmoc քիմիան, այլ ոչ թե BOC քիմիան. Fmoc քիմիան թույլ է տալիս հեռացնել պաշտպանիչ խմբերը, օգտագործելով մեղմ պայմանները պեպտիդների երկարացման ժամանակ, մինչդեռ BOC քիմիան պահանջում է ուժեղ թթվի օգտագործումը պաշտպանիչ խմբերը պեպտիդների երկարացման ժամանակ հեռացնելու համար. Լրացուցիչ, Fmoc քիմիան օգտագործում է trifluoroacetic թթու (TFA) հեռացնել պեպտիդը խեժից, մինչդեռ BOC քիմիան օգտագործում է հիդրոֆտորաթթու (ՀՖ). HF-ն անգույն է, բարձր քայքայիչ, և կոնտակտային թույն.

Հետեւաբար, MOL Changes-ն օգտագործում է Fmoc քիմիան, քանի որ այն ավելի մեղմ է, ճկուն, և բազմակողմանի՝ համեմատած BOC քիմիայի հետ.


Մոլարությունը վերաբերում է լուծույթի մոլային կոնցենտրացիային, որը լուծված նյութի մոլերի թիվն է 1 լիտր լուծույթ, արտահայտված որպես մոլ/Լ, կամ Մ.

Մոլարություն [Մ] = Զանգվածային / (Ծավալ x մոլային զանգված); Խլուրդ = Համակենտրոնացում (գ/լ) x Ծավալ (Լ)/ՄՎտ (գ/մոլ)

Օրինակ:
Տրված է: 1մգ չոր պեպտիդ փոշի ՄՎտ: 20KDa (Պեպտիդի մոլային զանգվածն է 20 գ/մոլ)
Որոշել մոլարությունը հայտնի զանգվածով և հայտնի ծավալով
Այս պեպտիդի 1 մլ լուծույթի համար:
Մոլարություն = զանգված (0.001է) / (ծավալը (0.001Լ) x Մոլային զանգված (ՄՎտ 20,000) = 50 մկՄ

Որոշել զանգվածը՝ որոշակի մոլարության հասնելու համար:
Եթե ​​ձեր վերլուծության համար, Ձեզ անհրաժեշտ է 0,01մՄ աշխատանքային պեպտիդային լուծույթ 1մլ ջրի մեջ, ապա հաշվարկեք պահանջվող զանգվածը հետևյալ կերպ:

Զանգված = Մոլարություն x Ծավալ x Մոլային զանգված
Զանգված = 0,01 մՄ x (1/1000 Լ) x 20000գ/մոլ = 0,0002գ

Ուստի, Ձեզ անհրաժեշտ կլինի 0,2 մգ/մլ պեպտիդ՝ 0,01 մՄ աշխատանքային լուծույթ ունենալու համար:.


Մենք առաքում ենք լիոֆիլացված կամ հումքի փոշի և պեպտիդ լուծույթով.


Պեպտիդի լուծելիությունը տվյալ լուծիչում կախված է ամինաթթուների հաջորդականությունից և հաճախ դժվար է կանխատեսել. Կատալոգի պեպտիդների դեպքում, լուծելիության մասին տեղեկատվությունը նշված է QC տվյալների թերթիկում. Պատվերով պեպտիդների համար, խնդրում ենք տեսնել բաժինը վերնագրված “Ինչպե՞ս պետք է լուծեմ իմ պեպտիդը”.


Պեպտիդների պարունակությունը պեպտիդների մաքրության ցուցանիշ չէ, քանի որ դրանք երկու առանձին չափումներ են. Մաքրությունը որոշվում է վերլուծական HPLC-ով և ցույց է տալիս այլ պեպտիդային աղտոտիչների առկայությունը/բացակայությունը (այսինքն. կտրված պեպտիդներ).

Պեպտիդների զուտ պարունակությունը որոշում է պեպտիդի իրական քանակը (հետաքրքրություն ներկայացնող պեպտիդ, ինչպես նաև պեպտիդային աղտոտիչներ) առկա է նմուշում. Պեպտիդների զուտ պարունակությունը ավանդաբար չափվում է ամինաթթուների վերլուծությամբ (AAA; սահմանափակ ճշգրտություն, բայց պահանջում է քիչ քանակությամբ նյութ) կամ տարրական վերլուծություն (CHN; պահանջում է միլիգրամ պեպտիդ, բայց ավելի ճշգրիտ է).


MOL Changes պեպտիդները հիմնականում մաքրվում են հակափուլային նախապատրաստական ​​HPLC-ով, օգտագործելով 2 բուֆերներ պարունակող 0.1% տրիֆտորքացախաթթու (TFA). Առաջին բուֆերը (Բուֆեր Ա) կազմված է 0.1 % TFA դեիոնացված ջրի մեջ և երկրորդ բուֆերը (Բուֆեր Բ) կազմված է 0.1 % TFA ացետոնիտրիլում (ACN).

Ընդհանրապես, Հում պեպտիդները սկզբում լուծվում են բուֆեր A-ի լուծույթում, Բուֆեր Բ-ի որոշ քանակություն, կամ օրգանական բևեռային լուծիչ, ինչպիսին է DMSO. Եթե ​​օգտագործվել է օրգանական բևեռային լուծիչ կամ բուֆեր B, այս թափանցիկ լուծույթը նախ կնոսրացվի բուֆեր A-ով. Հաջորդը, պեպտիդային լուծույթը զտվում և բեռնվում է նախապատրաստական ​​HPLC համակարգի վրա. Օպտիմիզացված մեթոդի գրադիենտի օգտագործում, Այնուհետև ֆրակցիաները հավաքվում են կլանման ցուցանիշների հիման վրա. Յուրաքանչյուր ֆրակցիա այնուհետև վերլուծվում է վերլուծական HPLC-ի միջոցով՝ համոզվելու համար, որ յուրաքանչյուր ֆրակցիայի մաքրությունը համապատասխանում է մաքրության պահանջվող բնութագրին.

Այս «մաքուր» ֆրակցիաներն այնուհետև հավաքվում են միասին և լիոֆիլացվում. «Մաքուր» փոշին այնուհետև փորձարկվում է և՛ մաքրության, և՛ նույնականության համար՝ համոզվելու համար, որ ճիշտ պեպտիդ է արտադրվել:.

Վերջապես, Անկախ QC խումբը AnaSpec-ում կրկին փորձարկում է պեպտիդը՝ համոզվելու համար, որ փորձարկման բոլոր հատկանիշները համապատասխանում են պահանջվող բնութագրերին.


Միջազգային նոմենկլատուրան, որն օգտագործվում է հաջորդականության վերջնակետերի համար, հետևյալն է:

– N-տերմինալ: H նշանակում է ազատ ամին (NH2-), Ac-ը նշանակում է ացետիլ [CH3C(Օ)-NH-], Պիր նշանակում է պիրոգլուտամիկ թթու
– C-տերմինալ: OH նշանակում է ազատ թթու (-COOH), NH2 նշանակում է ամիդ [-CONH2]

– Ամինաթթուների կողային շղթայի փոփոխությունները պատկերված են համապատասխան ամինաթթուից հետո փակագծերում. Օրինակ; ֆոսֆորիլացված սերին = Ս(PO3H2) կամ էպսիլոն-N-ացետիլացված լիզին = Կ(Ակ)


Պեպտիդների արտադրության ժամանակ, Սինթեզի և մաքրման լուծույթներում իոնները կապվում են պեպտիդի լիցքավորված ամինաթթուների կողային շղթաներին, աղերի ձևավորում. Այս իոնները հայտնի են որպես պեպտիդ հակաիոններ և օգնում են հավասարակշռել պեպտիդի լիցքը.

Տրիֆտորքացախաթթու (TFA) սովորաբար օգտագործվում է պեպտիդների սինթեզի և մաքրման մեջ.

Հիմնական ամինաթթուներով առաջացնում է տրիֆտորացետատային աղեր (օր., լիզին, արգինին, հիստիդին) և ազատ N-տերմինալ ամինը. Հետեւաբար, տրիֆտորացետատը սովորաբար լռելյայն հակադարձ է.

Պեպտիդին կապված TFA մոլեկուլների նվազագույն թիվը համաչափ է տվյալ պեպտիդային հաջորդականության հիմնական մնացորդների քանակին. Այսպիսով, այնքան ավելի հիմնական մնացորդներ, որոնք առկա են պեպտիդում, այնքան ցածր է լիոֆիլացված փոշու զուտ պեպտիդների պարունակությունը. Նմուշում առկա TFA-ի կամ ջրի պարունակությունը հաշվի առնելու համար, խորհուրդ ենք տալիս կատարել պեպտիդների բովանդակության վերլուծություն յուրաքանչյուր հատուկ պեպտիդի համար.

Ջուր և տրիֆտորքացախաթթու (TFA) մաքրման գործընթացի կողմնակի արտադրանք են. Այնուամենայնիվ, TFA-ն կարող է թունավորության հետ կապված մտահոգություններ առաջացնել կենդանի և նախակլինիկական հետազոտություններ. Հետեւաբար, MOL Changes-ն առաջարկում է ոչ թունավոր ացետատ, քլորիդ, կամ ամոնիումի աղի փոխանակիչներ.


Cys պարունակող պեպտիդներ, հանդիպեց, կամ Trp-ը դժվար է սինթեզել և ստանալ բարձր մաքրության արտադրանք. Սա հիմնականում պայմանավորված է այս ֆունկցիոնալ խմբերի անկայունությամբ և օքսիդացման զգայունությամբ. Հատուկ ուշադրություն է պահանջվում այս պեպտիդների օգտագործման և պահպանման համար՝ սրվակների կրկնակի բացումից խուսափելու համար.

Մենք բաց ենք թողել ձեր հարցը? Մի գիծ գցեք մեզ և մենք կանենք
վերադառնալ ներսում 24 ժամեր.

 

Տուն Որոնում Whatsapp Ծառայություններ Արտադրանք