Câu hỏi thường gặp

Đơn giản đến phức tạp từ miligam đến kilôgam


Yêu cầu báo giá tùy chỉnh


How to store peptides?


Peptide đông khô

Để lưu trữ peptide lâu dài, chúng tôi khuyên bạn nên lưu trữ chúng dưới dạng bột rắn. Peptide đông khô có thể được bảo quản ở -20°C hoặc thấp hơn với mức độ phân hủy tối thiểu. Khách hàng nên kiểm tra lại các peptide tùy chỉnh mỗi lần 2 năm kể từ ngày phát hành kiểm soát chất lượng.

Peptide trong dung dịch

Peptide trong dung dịch kém ổn định và dễ bị phân hủy. Dung dịch nước dùng để hòa tan peptide phải vô trùng và tinh khiết.

Trong dung dịch, một lượng peptide nhất định có thể bị phân hủy, tùy thuộc vào các axit amin có trong trình tự. Một số ví dụ được liệt kê dưới đây:
– Peptide chứa methionine, Dư lượng cystein hoặc tryptophan nên có thời gian lưu trữ hạn chế trong dung dịch do quá trình oxy hóa. Những peptide này nên được hòa tan trong dung môi không có oxy. –
Glutamine và asparagine có thể được khử amit thành axit glutamic và axit aspartic, tương ứng. –
Cysteine ​​​​có thể trải qua quá trình chu trình oxy hóa để hình thành liên kết disulfide cysteine-cysteine (có thể được hình thành bên trong hoặc giữa các liên kết disulphide). –
Dư lượng tích điện (axit aspartic, axit glutamic, lysine, arginin, histidin) hút ẩm (hấp thụ nước từ không khí) và có xu hướng tạo thành chất nhớt, dầu trong. Sự thay đổi vật lý này có thể không ảnh hưởng đến bản chất của peptide. Khuyến cáo rằng các peptide như vậy nên được đông khô để loại bỏ lượng nước còn sót lại, sau đó khử khí bằng nitơ để đảm bảo không còn hơi nước trong lọ, và sau đó nhanh chóng giới hạn.

Để ngăn chặn thiệt hại do đóng băng và tan băng nhiều lần, chúng tôi khuyên người dùng chỉ nên hòa tan lượng peptide cần thiết cho thử nghiệm hiện tại. Dung dịch dư phải được bảo quản ở ≥ -20 o C cho đến khi cần thiết.

Tránh ẩm.
Vì độ ẩm làm giảm đáng kể tính ổn định lâu dài của peptide, chúng tôi khuyên bạn nên cân bằng các peptide trong bình hút ẩm ở nhiệt độ phòng trước khi mở lọ. Sau khi hoàn thành việc phân phối peptide, các peptide còn lại trong ống phải được tẩy nhẹ bằng nitơ khan, sau đó thùng chứa phải được đậy nắp, niêm phong bằng màng niêm phong, và bảo quản ở -20°C.


Đặc tính hòa tan của các peptide khác nhau khác nhau đáng kể. Dư lượng như alanine (ôi), cystein (Cys), isoleuxin (Với), leucine (Lê), methionin (Đã gặp), phenylalanin (phe), và valine (Val) thêm vào tính kỵ nước và độ hòa tan của peptide trong dung dịch nước, và khách hàng nên tuân theo các nguyên tắc này khi tùy chỉnh peptide.

Tính chất hòa tan

Độ hòa tan của peptide phụ thuộc nhiều vào trình tự axit amin. Peptide kỵ nước tự nhiên (MỘT, F, G, V., L, TÔI, M, W, P có xu hướng cao hơn) cần dung môi hữu cơ để hòa tan. Peptide axit (xu hướng cao hơn cho D, E trong chuỗi peptit) yêu cầu dung dịch đệm cơ bản để hòa tan, trong khi các peptide cơ bản (xu hướng cao hơn cho K, H, và R) cần dung dịch đệm có tính axit để hòa tan.

Lựa chọn dung môi

Với những hạn chế của xét nghiệm của bạn, chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng các hướng dẫn sau để xác định dung môi tốt nhất để hòa tan peptide

Peptide kỵ nước

Để hòa tan lại các peptide kỵ nước, thêm vào 100 µL DMSO và siêu âm cho đến khi tạo thành dung dịch đồng nhất. Kế tiếp, thêm bộ đệm bạn chọn để tạo 1 dung dịch mg/mL (nồng độ peptide càng cao, lượng DMSO cần thiết càng lớn).

ưa nước (Có tính axit) peptit

Để hòa tan lại các peptit axit, thêm vào 100 µL của 1% NH 4 ồ để 1 mg peptide và xoáy. Một khi giải pháp đã rõ ràng, thêm bộ đệm bạn chọn để tạo 1 dung dịch mg/mL.

ưa nước (Nền tảng) peptit

Để tái tạo một peptide cơ bản, thêm nước cất vào 1 mg peptide và xoáy.


Tiêu chuẩn công nghiệp là cung cấp peptide ở dạng đông khô dưới dạng Tổng trọng lượng. Tổng trọng lượng peptide là tổng khối lượng của tất cả các thành phần có trong bột đông khô. Điều này bao gồm peptide quan tâm, bất kỳ tạp chất peptide, Nước, dung môi dư, và phản biện.

Ngược lại Mạng lưới trọng lượng peptit, tính từ Hàm lượng peptide ròng, là trọng lượng của chỉ peptit thành phần có trong bột đông khô. Điều này mang lại nồng độ chính xác hơn cho các dung dịch peptide tiếp theo của bạn. Kể từ đây, chúng tôi đã đề xuất lượng trọng lượng peptide ròng cho Peptide tùy chỉnh mệnh lệnh.

Minh họa nội dung peptide ròng

Hàm lượng peptide ròng phép đo được thực hiện bằng phân tích axit amin (AAA; độ chính xác hạn chế nhưng yêu cầu lượng vật liệu thấp) hoặc phân tích nguyên tố (CHN; cần miligam peptide nhưng chính xác hơn). Cả hai phương pháp đều mang lại giá trị phần trăm (tức là., 75% hàm lượng peptide ròng).

Hàm lượng peptide ròng phụ thuộc vào lượng phản ứng hiện diện*, phụ thuộc vào trình tự peptit. Thiết yếu, điện tích peptide càng cao, hàm lượng peptide càng thấp

*Ghi chú: Nguyên tố được sử dụng để tính hàm lượng peptit ròng dựa trên ion phản peptit. Điều này được thực hiện để đảm bảo rằng ion phản ứng không đóng góp vào hàm lượng peptide. Ví dụ, khi TFA hoặc axetat là ion phản ứng, nitơ được sử dụng vì nó có trong peptit nhưng không có trong TFA hoặc axetat. Carbon hoặc Nitơ có thể được sử dụng khi clorua là ion phản ứng vì lý do tương tự.

Tính toán trọng lượng peptide ròng:

Số lượng peptide ròng (tổng peptit) — phương pháp chúng tôi sử dụng cho các đơn đặt hàng peptide tùy chỉnh ròng.

Nhân tỷ lệ phần trăm nội dung peptide ròng (dạng thập phân) theo tổng trọng lượng của peptide, để có được số lượng Peptide ròng (tổng peptit).

Ví dụ:
Vì 5 tổng số mg peptide/lọ:
Hàm lượng peptit là 84%.
Lượng peptide tổng số chính xác = 0.84*5 mg=4,2 mg tổng peptide

Số lượng lãi suất ròng của peptide—chính xác nhất — khách hàng có thể tự mình sử dụng phương pháp này để tính peptit quan tâm.

Nhân phần trăm hàm lượng peptit ròng với tổng trọng lượng peptit, và độ tinh khiết của peptide (bằng HPLC), để tính toán chính xác lượng peptide quan tâm mà bạn có. Phần trăm peptide ròng (dạng thập phân) được nhân với độ tinh khiết peptide (dạng thập phân).

Ví dụ:
Vì 5 mg peptide tổng/lọ với:
Hàm lượng peptit là 84%.
Lượng peptide quan tâm chính xác là = 0.84*0.96*5 mg=4,03 mg


MOL Changes sử dụng hóa học Fmoc pha rắn thay vì hóa học BOC. Hóa học Fmoc cho phép loại bỏ các nhóm bảo vệ bằng cách sử dụng các điều kiện nhẹ trong quá trình kéo dài peptide, trong khi hóa học BOC yêu cầu sử dụng axit mạnh để loại bỏ các nhóm bảo vệ trong quá trình kéo dài peptide. Ngoài ra, Hóa học Fmoc sử dụng axit trifluoroacetic (TFA) để loại bỏ peptide khỏi nhựa, trong khi hóa học BOC sử dụng axit flohydric (HF). HF không màu, có tính ăn mòn cao, và chất độc tiếp xúc.

Vì thế, MOL Changes sử dụng hóa học Fmoc vì nó nhẹ hơn, linh hoạt, và linh hoạt so với hóa học BOC.


Độ mol đề cập đến nồng độ mol của dung dịch, là số mol chất tan hòa tan trong 1 lít dung dịch, biểu thị bằng mol/L, hoặc M.

nồng độ mol [M] = Khối lượng / (Thể tích x Khối lượng mol); Nốt ruồi = Nồng độ (g/L) x Khối lượng (L)/MW (g/mol)

Ví dụ:
Được cho: 1mg bột peptide khô với MW: 20KDa (Khối lượng mol của peptit là 20 g/mol)
Để xác định nồng độ mol với khối lượng đã biết và thể tích đã biết
Cho 1ml dung dịch peptit này:
Độ mol = Khối lượng (0.001g) / (âm lượng (0.001L) x Khối lượng mol (MW 20,000) = 50 µM

Để xác định khối lượng để đạt được nồng độ mol nhất định:
Nếu xét nghiệm của bạn, bạn cần dung dịch peptide hoạt động 0,01mM trong 1ml nước, sau đó tính khối lượng cần thiết như sau:

Khối lượng = nồng độ mol x thể tích x khối lượng mol
Khối lượng = 0,01mM x (1/1000 L) x 20.000g/mol = 0,0002g

Kể từ đây, bạn sẽ cần 0,2 mg/ml peptide để có dung dịch hoạt động 0,01mM.


Chúng tôi cung cấp dưới dạng bột đông khô hoặc bột thô và dung dịch peptide.


Độ hòa tan của peptide trong dung môi nhất định phụ thuộc vào trình tự axit amin và thường khó dự đoán. Trong trường hợp danh mục peptide, thông tin về độ hòa tan được liệt kê trên bảng dữ liệu QC. Đối với peptide tùy chỉnh, vui lòng xem phần có tiêu đề “Tôi nên hòa tan peptide của mình như thế nào”.


Hàm lượng peptide không phải là dấu hiệu cho thấy độ tinh khiết của peptide vì đây là hai phép đo riêng biệt. Độ tinh khiết được xác định bằng HPLC phân tích và cho biết sự hiện diện/không có của các chất gây ô nhiễm peptid khác (tức là. peptide cắt ngắn).

Hàm lượng peptide ròng xác định lượng peptide thực tế (peptide quan tâm cũng như các chất gây ô nhiễm peptide) có trong mẫu. Hàm lượng peptide ròng được đo theo cách truyền thống bằng phân tích axit amin (AAA; độ chính xác hạn chế nhưng yêu cầu lượng vật liệu thấp) hoặc phân tích nguyên tố (CHN; cần miligam peptide nhưng chính xác hơn).


Các peptide MOL Changes thường được tinh chế bằng HPLC chuẩn bị pha đảo, sử dụng 2 bộ đệm chứa 0.1% axit trifloaxetic (TFA). Bộ đệm đầu tiên (Bộ đệm A) bao gồm 0.1 % TFA trong nước khử ion và dung dịch đệm thứ hai (Bộ đệm B) bao gồm 0.1 % TFA trong axetonitril (ACN).

Nói chung là, peptide thô đầu tiên được hòa tan trong dung dịch đệm A, một lượng dung dịch đệm B, hoặc dung môi phân cực hữu cơ như DMSO. Nếu sử dụng dung môi phân cực hữu cơ hoặc Dung dịch đệm B, dung dịch trong suốt này trước tiên sẽ được pha loãng với Dung dịch đệm A. Kế tiếp, dung dịch peptid được lọc và nạp vào hệ thống HPLC chuẩn bị. Sử dụng gradient phương pháp được tối ưu hóa, các phân số sau đó được thu thập dựa trên kết quả đo độ hấp thụ. Sau đó, mỗi phần được phân tích thông qua HPLC phân tích để đảm bảo rằng độ tinh khiết của từng phần đáp ứng thông số kỹ thuật về độ tinh khiết cần thiết.

Những phần “tinh khiết” này sau đó được gộp lại với nhau và đông khô. Bột “tinh khiết” sau đó được kiểm tra cả về độ tinh khiết và nhận dạng để đảm bảo rằng peptide chính xác đã được sản xuất.

Cuối cùng, một nhóm QC độc lập tại AnaSpec kiểm tra lại peptide để đảm bảo rằng tất cả các thuộc tính kiểm tra đều đáp ứng các thông số kỹ thuật bắt buộc.


Danh pháp quốc tế được sử dụng cho trình tự termini như sau:

– Đầu N: H có nghĩa là amin tự do (NH2-), Ac có nghĩa là axetyl [CH3C(ồ)-NH-], Pyr có nghĩa là axit pyroglutamic
– Thiết bị đầu cuối C: OH có nghĩa là axit tự do (-COOH), NH2 có nghĩa là amit [-CONH2]

– Những thay đổi ở chuỗi bên của axit amin được mô tả trong ngoặc đơn sau axit amin tương ứng. Ví dụ; serine phosphoryl hóa = S(PO3H2) hoặc lysine epsilon-N-acetylated = K(Ac)


Trong quá trình sản xuất peptide, các ion trong dung dịch tổng hợp và tinh chế liên kết với chuỗi bên axit amin tích điện của peptide, hình thành muối. Những ion này được gọi là ion phản peptide và giúp cân bằng điện tích của peptide.

Axit trifloaxetic (TFA) thường được sử dụng trong tổng hợp và tinh chế peptide.

Nó tạo thành muối trifluoroacetate với các axit amin cơ bản (ví dụ., lysine, arginin, histidin) và amin đầu N tự do. Vì thế, trifluoroacetate thường là phản ứng mặc định.

Số lượng phân tử TFA tối thiểu liên kết với một peptide tỷ lệ thuận với số lượng gốc cơ bản trong chuỗi peptide nhất định. Như vậy, các dư lượng cơ bản hơn có trong một peptide, hàm lượng peptide ròng của bột đông khô càng thấp. Để tính TFA hoặc hàm lượng nước có trong mẫu, chúng tôi khuyên bạn nên thực hiện xét nghiệm hàm lượng peptide cho mỗi peptide tùy chỉnh.

Nước và axit trifloaxetic (TFA) là sản phẩm phụ của quá trình tinh chế. Tuy nhiên, TFA có thể làm tăng mối lo ngại về độc tính đối với còn sống và nghiên cứu tiền lâm sàng. Vì thế, MOL Changes cung cấp axetat không độc hại, clorua, hoặc thiết bị trao đổi muối amoni.


Peptide chứa Cys, Đã gặp, hoặc Trp đang gặp khó khăn trong việc tổng hợp và thu được các sản phẩm có độ tinh khiết cao. Điều này chủ yếu là do tính không ổn định và dễ bị oxy hóa của các nhóm chức này.. Cần đặc biệt chú ý khi sử dụng và bảo quản các peptide này để tránh mở lọ nhiều lần.

Chúng tôi có bỏ lỡ câu hỏi của bạn không? Gửi cho chúng tôi một dòng và chúng tôi sẽ
quay lại bên trong 24 giờ.

 

Trang chủ Tìm kiếm Whatsapp Dịch vụ Sản phẩm