Desarrollo de un ligando peptídico irreversible radiomarcado para imágenes PET del factor de crecimiento endotelial vascular

Los agentes de formación de imágenes basados ​​en sondas peptídicas tienen propiedades farmacocinéticas deseables siempre que tengan altas afinidades por su objetivo in vivo.. Un enfoque para mejorar la afinidad de un ligando peptídico por su objetivo es hacer que esta interacción sea covalente e irreversible.. Para este propósito, evaluamos una etiqueta peptídica de afinidad marcada con 64Cu, 64Cu-L19K-(5-fluoro-2,4-dinitrobenceno) (64Cu-L19K-FDNB), que se une de forma covalente e irreversible al factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) como agente de imágenes PET. Comparamos las propiedades in vivo de 64Cu-L19K-FDNB en xenoinjertos tumorales que expresan VEGF con sus análogos de unión no covalentes., 64Cu-L19K-(2,4-dinitrofenilo) (64Cu-L19K-DNP) y 64Cu-L19K. Métodos: El péptido L19K (GGNECDIARMWEWECFERK-CONH2) se construyó con ácido 1,4,7-triazaciclononano-1,4,7-triacético en el extremo N para radiomarcar con 64Cu con un espaciador de polietilenglicol entre el péptido y el quelato. 1,5-Se conjugó difluoro-2,4-dinitrobenceno en la lisina C-terminal para la reticulación con VEGF., resultando en L19K-FDNB. 64Se analizó la unión covalente de Cu-L19K-FDNB a VEGF in vitro. como control, L19K se conjugó con 1-fluoro-2,4-dinitrobenceno, resultando en L19K-DNP. Estudios de biodistribución y imágenes PET de 64Cu-L19K-FDNB., 64Cu-L19K-DNP, y el 64Cu-L19K nativo se compararon en xenoinjertos HCT-116. Los estudios de bloqueo de 64Cu-L19K-FDNB se realizaron con una coinyección de exceso de L19K-FDNB sin marcar.. Resultados: Los estudios de unión in vitro confirmaron la unión covalente e irreversible de 64Cu-L19K-FDNB a VEGF, mientras que 64Cu-L19K-DNP y 64Cu-L19K no se unieron covalentemente. Las imágenes PET mostraron una mayor captación tumoral con 64Cu-L19K-FDNB que con 64Cu-L19K-DNP y 64Cu-L19K, con valores medios estandarizados de absorción de 0.62 ± 0.05, 0.18 ± 0.06, y 0.34 ± 0.14, respectivamente, en 24 h después de la inyección (PAG < 0.05), y 0.53 ± 0.05, 0.32 ± 0.14, y 0.30 ± 0.09, respectivamente, en 48 h después de la inyección (PAG < 0.05). Los estudios de bloqueo con 64Cu-L19K-FDNB en presencia de exceso de péptido no marcado mostraron una 53% reducción de la captación tumoral en 48 h después de la inyección. Conclusión: En este estudio de prueba de concepto, el uso de un ligando peptídico de unión covalente contra VEGF mejora la acumulación de trazadores en el sitio del tumor in vivo, en comparación con sus análogos peptídicos de unión no covalente. Esta técnica es una herramienta prometedora para mejorar la potencia de las sondas peptídicas como agentes de formación de imágenes..