开发用于血管内皮生长因子 PET 成像的放射性标记不可逆肽配体

基于肽探针的成像剂具有理想的药代动力学特性，前提是它们对其体内靶点具有高亲和力. 提高肽配体与其靶标的亲和力的一种方法是使这种相互作用共价且不可逆. 为此目的, 我们评估了 64Cu 标记的亲和肽标签, 64铜-L19K-(5-氟-2,4-二硝基苯) (64铜-L19K-FDNB), 与血管内皮生长因子共价且不可逆地结合 (血管内皮生长因子) 作为 PET 显像剂. 我们比较了 64Cu-L19K-FDNB 在表达 VEGF 的肿瘤异种移植物中与其非共价结合类似物的体内特性, 64铜-L19K-(2,4-dinitrophenyl) (64铜-L19K-DNP) 和 64Cu-L19K. 方法: L19K 肽 (GGNECDIARMWEWECFERK-CONH2) 在 N 末端用 1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸构建，用于用 64Cu 进行放射性标记，并在肽和螯合物之间使用聚乙二醇间隔基. 1,5-二氟-2,4-二硝基苯缀合在 C 末端赖氨酸上，用于与 VEGF 交联, 产生L19K-FDNB. 64体外测定 Cu-L19K-FDNB 与 VEGF 的共价结合. 作为对照, L19K 与 1-氟-2,4-二硝基苯缀合, 产生L19K-DNP. 64Cu-L19K-FDNB 的 PET 成像和生物分布研究, 64铜-L19K-DNP, 与 HCT-116 异种移植物中的天然 64Cu-L19K 进行比较. 通过共注射过量未标记的 L19K-FDNB 进行 64Cu-L19K-FDNB 的封闭研究. 结果: 体外结合研究证实 64Cu-L19K-FDNB 与 VEGF 具有共价且不可逆的结合, 而 64Cu-L19K-DNP 和 64Cu-L19K 不共价结合. PET 成像显示 64Cu-L19K-FDNB 的肿瘤摄取高于 64Cu-L19K-DNP 和 64Cu-L19K, 平均标准化摄取值为 0.62 ± 0.05, 0.18 ± 0.06, 和 0.34 ± 0.14, 分别, 在 24 注射后h (磷 < 0.05), 和 0.53 ± 0.05, 0.32 ± 0.14, 和 0.30 ± 0.09, 分别, 在 48 注射后h (磷 < 0.05). 在存在过量未标记肽的情况下使用 64Cu-L19K-FDNB 进行的封闭研究表明 53% 肿瘤摄取减少 48 注射后h. 结论: 在这项概念验证研究中, 使用针对 VEGF 的共价结合肽配体可改善体内肿瘤部位示踪剂的积累, 与其非共价结合肽类似物相比. 该技术是增强肽探针作为显像剂效力的有前途的工具.