पेप्टाइड संशोधन
झल्लाहट पेप्टाइड
FRET पेप्टाइड क्या है??
FRET पेप्टाइड लेबलिंग में एक दाता अणु और एक स्वीकर्ता होता है (फोड़ने वाला एजेंट) अणु. ज्यादातर मामलों में, दाता और स्वीकर्ता जोड़े दो अलग-अलग रंग हैं. यदि स्वीकर्ता एक गैर-फ्लोरोसेंट डाई है (फोड़ने वाला एजेंट), फ्लोरोसेंट डोनर से स्थानांतरित ऊर्जा आणविक कंपन में परिवर्तित हो जाती है. जब FRET समाप्त हो जाता है (दाता और स्वीकर्ता को अलग करके), दाता प्रतिदीप्ति में वृद्धि का पता लगाया जा सकता है. जब दाता और स्वीकर्ता दोनों रंग फ्लोरोसेंट होते हैं, स्थानांतरित ऊर्जा लंबी तरंग दैर्ध्य प्रकाश के रूप में उत्सर्जित होती है, दाता और स्वीकर्ता प्रतिदीप्ति तीव्रता अनुपात में परिवर्तन को मापने की अनुमति देना. कुशल झल्लाहट विस्फोट के लिए, फ्लोरोफोर और बर्स्टिंग एजेंट अणु एक दूसरे के करीब होने चाहिए (~10-100 Å) और फटने वाले एजेंट का अवशोषण स्पेक्ट्रम फ्लोरोफोर के उत्सर्जन स्पेक्ट्रम के साथ ओवरलैप होना चाहिए. दाता-विस्फोट एजेंट FRET सिस्टम को डिजाइन करते समय दाता के प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रम और फटने वाले एजेंट के अवशोषण स्पेक्ट्रम की सावधानीपूर्वक तुलना की आवश्यकता होती है।.
FRET पेप्टाइड्स विज्ञान
FRET पेप्टाइड्स के मुख्य लाभ:
·एंजाइमी प्रतिक्रियाओं और प्रोटीन गतिविधि की वास्तविक समय की निगरानी.
अद्वितीय निकटता-आधारित ऊर्जा हस्तांतरण के कारण अत्यधिक उच्च पहचान संवेदनशीलता.
·इन विट्रो और इन विवो अनुप्रयोगों के लिए बहुमुखी प्रतिभा, जटिल जैविक प्रक्रियाओं में अंतर्दृष्टि प्रदान करना.
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फ्लोरोफोरे
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पीने की वस्तु
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पूर्व दाता
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|---|---|---|
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अब्ज़ |
डी.एन.पी 2,4-डाइनिट्रोफेनिल |
320 एनएम/420 एनएम |
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अब्ज़ |
डी.एन.पी 2,4-डाइनिट्रोफेनिल |
320 एनएम/420 एनएम |
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एमसीए |
डी.एन.पी 2,4-डाइनिट्रोफेनिल |
325 एनएम/392 एनएम |
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टीआरपी |
डी.एन.पी 2,4-डाइनिट्रोफेनिल |
280 एनएम/360 एनएम |
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परिवार |
डबसील4-([4'-डाइमिथाइलैमिनो)फिनाइल]कर सकना)बेन्ज़ोयल |
492 एनएम/517 एनएम |
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लूसिफ़ेर पीला |
डबसिल4(डाइमिथाइलैमिनो)एज़ोबेंजीन-4'-सल्फोनील |
430एनएम/520एनएम |
विशेष उद्धरण
प्रोटीज गतिविधि के अल्ट्रासेंसिटिव ट्यूमर-मर्मज्ञ नैनोसेंसर
अंतर्जात बायोमार्कर के साथ कैंसर के घावों की पहचान करने की क्षमता वर्तमान में ~ 1 सेमी व्यास वाले ट्यूमर तक सीमित है. हमने हाल ही में एक बहिर्जात रूप से प्रशासित ट्यूमर-मर्मज्ञ नैनोसेंसर की रिपोर्ट की है जो नष्ट हो जाता है, ट्यूमर-विशिष्ट प्रोटीज के जवाब में, पेप्टाइड के टुकड़े जिनका मूत्र में पता लगाया जा सकता है. यहाँ, हम अनुकूलन की रिपोर्ट करते हैं, फार्माकोकाइनेटिक गणितीय मॉडल द्वारा सूचित, ऑन-टारगेट प्रोटीज़ क्लीवेज को बढ़ाने और ऑफ-टारगेट क्लीवेज को कम करने के लिए पेप्टाइड सब्सट्रेट्स की सतह प्रस्तुति, और ट्यूमर-मर्मज्ञ लिगैंड के साथ नैनोसेंसर की कार्यप्रणाली, जो ट्यूमर माइक्रोएन्वायरमेंट में सक्रियता बढ़ाने के लिए सक्रिय तस्करी मार्गों को संलग्न करती है।. परिणामी नैनोसेंसर ने मानव उपकला ट्यूमर में उप-5 मिमी घावों का भेदभाव किया और मध्य व्यास से छोटे नोड्यूल का पता लगाया 2 डिम्बग्रंथि के कैंसर के ऑर्थोटोपिक मॉडल में मिमी. हम कोलोरेक्टल लिवर मेटास्टेस के एक प्रतिरक्षा सक्षम मॉडल में मूत्र में सिग्नल पीढ़ी की बढ़ी हुई रिसेप्टर-निर्भर विशिष्टता को भी प्रदर्शित करते हैं।, और फ्लोरोजेनिक ज्योग्राफी जांच के रूप में पुन: इंजीनियर किए जाने पर मानव ट्यूमर माइक्रोएरे में नैनोसेंसर का स्वस्थानी सक्रियण.
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