Ny fomba fandravana mety dia singa manan-danja amin'ny fahombiazan'ny fanandramana peptide. Ny fandravana tsy mety dia hahatonga ny fahaverezan'ny peptides sy ny tsy fahombiazan'ny fanandramana. na izany aza, Ny fitadiavana ny fomba fandravana idealy dia sarotra indraindray. Ireto manaraka ireto ny fomba fandravana natolotry ny vondrona teknika roa an'ny MOL Changes. FOMBA
MOL Changes Technology Group Dissolution Guide
Ny olana lehibe amin'ny famongorana ny peptide dia ny fananganana rafitra faharoa.
Na dia miharihary kokoa aza ny fananganana rafitra faharoa amin'ny rojo peptide hydrophobic, afa-tsy ny rojo peptide fohy indrindra, Ity trangan-javatra ity dia saika amin'ny rojo peptide rehetra, na inona na inona polarity. Ary noho izany, Ny fitsipika voalohany amin'ny famongorana polypeptides dia ny fampiasana rano distilled sterile na rano deionized (na rano tsy misy oksizenina raha mamela ny toe-javatra).
Ny vahaolana peptide dia mety hiharan'ny fahasimban'ny bakteria. Mba hialana amin'izany tranga izany, ny peptide dia tokony ho levona amin`ny rano distilled sterile, na voasivana amin'ny fonon'ny sivana amin'ny haben'ny pore 0.45 na 0.2 μm ho an'ny sterilization. Polypeptides misy Cys, Met, ary ny Trp dia tena mora voan'ny oxidation, ka tokony levona anaty rano tsy misy oksizenina. Ny rano tsy misy oksizenina dia azo atao amin'ny famongorana gazy amin'ny fanerena mihena amin'ny alàlan'ny fampidirana gazy tsy mihetsika (azota, hélium, ary argon).
Raha tsy levona anaty rano madio ny peptide, Ny fitsaboana amin'ny ultrasonic dia afaka manampy amin'ny famongorana ny poti ary mampitombo ny solubility. Fanamarihana: Ny fitsaboana ultrasonika dia miteraka hafanana ny vahaolana sy ny fahasimban'ny peptide.
Raha misy asidra amino fototra maromaro ny peptide, mampiasa 1 ~ 10% acetic asidra aqueous vahaolana; ho an'ny peptides tena hydrophobic, Ampiasao 50% asidra acetic.
Raha misy polypeptide be dia be ny asidra amine asidra, azo levona anaty a 1 ny 10% vahaolana ammonia na buffer alkaola mivadibadika toy ny ethyl morphine acetate na bikarbonate. Ny sandan'ny pH dia tsy maintsy ahitsy alohan'ny chromatography.
Raha ny peptide dia ho entina eo amin'ny tsanganana, ny habetsahan'ny solvent organika dia tsy maintsy ho kely dia kely, raha tsy izany dia ho voa mafy ny fotoana fihazonana.
Raha tena hydrophobic ny polypeptide satria misy rojo asiana hydrocarbon aromatika toy ny Val, Leu, Met, Phe, Tyr, Ala, Sns, na peptide tsy miandany, Ny fampiasana denaturants membrane toy ny DMF na DMSO dia afaka manampy amin'ny famongorana ny polypeptide:
ny. Ny denaturants membrane misy fifantohana avo dia manampy amin'ny famongorana ny polypeptide amin'ny famotehana ny rafitra faharoa.
amin '. Ny denaturants membrane dia mety amin'ny fanomanana vahaolana famakafakana peptide, fa mety hanelingelina ny fikarohana momba ny asa biolojika.
c. DMF no denaturant tsara indrindra (mety hahatratra ny fifantohana ambony indrindra 30%), ary ampiana tsikelikely mandra-pahalevon'ny peptide.
d. Amin'ny chromatography amin'ny dingana mivadika, Hivoaka miaraka amin'ny tampon'ny eluent ny DMF. Arakaraka ny habetsahan'ny tsindrona, mety ho avo be ny sandan'ny tampony. Ny ankamaroan'ny peptides dia afaka mivoaka ao anatin'ny minitra vitsy aorian'ny famafazana DMF be dia be. Raha kely ny rojo peptide ary elutes aloha loatra, hihena ny habetsaky ny peptide.
MOL Changes Technical Group II Dissolution Guide
Ahoana no hanavahana raha tsy miandany ny asidra amine, asidra na alkaline, ary kajy ny fomba fandravana:
1. Omeo ny asidra amino asidra tsirairay ao amin'ny filaharana polypeptide ao anatin'izany ny asidra aspartika Asp (D), asidra glutamika Glu (f) ary C-terminal carboxyl-COOH as -1; Ny asidra amino fototra tsirairay ao anatin'izany ny arginine Arg ( R), lysine Lys (K), histidine Ny (H) ary ny N-terminal amino-NH2 dia omena sandan'ny +1; asidra amino neutre 0. Mifototra amin'izany, kajy ny sandan'ny polypeptide manontolo, ary ny isa dia positive Peptides misy isa ratsy dia antsoina hoe peptides fototra, Ireo manana isa ratsy dia antsoina hoe peptides asidra, ary ireo manana isa aotra dia antsoina hoe peptides neutre.
2. Raha peptide alkaline izy io, andramo levonina amin'ny rano aloha; raha tsy mety levona, miezaka mampiasa 10% – 30% asidra acetic; raha mbola tsy mety levona ny peptide, Miezaha mampiasa asidra acetic madio sy asidra trifluoroacetic TFA (<50 μl) handrava azy, ary avy eo dia manalefaka ny vahaolana peptide amin'ny fifantohana irina.
3. Raha peptide asidra, andramo levonina amin'ny rano aloha; raha tsy mety levona amin'ny rano, miezaka mampiasa 13% rano amoniaka (v/v) handrava azy, ary manalefaka ny vahaolana peptide amin'ny fifantohana ilaina. Raha misy cystine Cys ny filaharan'ny peptide (C), tsy azo levona anaty vahaolana alkaline. Andramo azafady ny fomba etsy ambany.
4. Ny peptides tsy miandany dia matetika levona amin'ny solvents organika. VOALOHANY, Miezaha mampiasa acetonitrile (acetonitrile), na methanol (methanol) na isopropanol (isopropanol) levona; ho an'ny peptides tena hydrophobic, levona voalohany amin'ny dimethyl sulfoxide kely (DMSO) ary alevina amin'ny rano ho amin'ny fifantohana ilaina; raha misy cystine Cys ny filaharan'ny peptide (C), Ampiasao ny dimethylformamide (DMF) na N-methylpyrrolidone (NMP) ho fandravana. Ho an'ny peptides izay mora mitambatra, ampio aloha 6M guanidine·HCl na 8M urea (Urea) handrava azy ireo, ary avy eo dia manalefaka azy ireo amin'ny fifantohana ilaina.
Hazavao amin'ny ohatra:
1. Mba hanamora ny fitahirizana sy ny fampiasana manaraka, izany no nanolorana azy ho handrava ny peptide amin`ny fifantohana ny momba 1-2 mg/ml.
2. Ny vovony maina peptide mahazatra dia azo tehirizina amin'ny -20 ° C mandritra ny herintaona mahery. Ho an'ny peptides levona, izany no nanolorana azy ho aliquot sy mitahiry amin`ny -20 ° C; raha misy methionine Met ny filaharan'ny peptide (M), Cystine asidra (C) na tyrosine Tyr (Y) dia soso-kevitra ny tehirizina ao amin'ny tontolo tsy misy oksizenina mba hisorohana ny oxidation.
Lisitry ny asidra amino mipetaka:
1.Asidra amino tsy miandany: glycine, alanina, leucine, isoleucine, valine, cystine, methionine, threonine, serine, phenylalanine, tyrosine, asidra tryptophan, proline, asparagine sy glutamine
Features: Ity karazana molekiola amino asidra ity dia tsy misy afa-tsy vondrona amino iray sy vondrona karboksil iray
2.asidra amino asidra: asidra glutamika, asidra aspartika
Toetoetra: Ity karazana molekiolan'ny asidra amine ity dia misy vondrona amino iray sy vondrona carboxyl roa
3.Asidra amino fototra: lysine, arginine, histidine
Toetoetra: Ity karazana asidra amino ity dia misy vondrona diaminocarboxyl ao amin'ny molekiny; Ny histidine dia manana peratra azota ary malemy alkaline, ary asidra amino fototra ihany koa.
