Azịza ngwa ngwa
Amyloid beta 1-42 A kọwapụtara nkwadebe peptide site n'ihe karịrị usoro ya na ịdị ọcha kemịkal kọrọ. Ọnọdụ mgbakọ ya na akụkọ nkwadebe nwere ike imetụta…
Amyloid Beta 1–42 Mkpokọta - Nyochaa Ntụnyere Nkwadebe
Amyloid beta 1-42 A kọwapụtara nkwadebe peptide site n'ihe karịrị usoro ya na ịdị ọcha kemịkal kọrọ. Ọnọdụ mgbakọ ya na akụkọ nkwadebe nwere ike imetụta ihe nnwale nnwale. Ihe nlele abụọ nwere otu aha ngwaahịa nwere ike ịchọkwu ihe akaebe tupu enwee ike ịgwọ ha dị ka ihe mmalite atụnyere.
Echiche ọdịda ikpe: ụlọ nyocha na-akwado Aβ(1–42) ugboro abụọ na-eji otu ntinye uche. Akwụkwọ ndị na-eweta ngwaahịa na-akọ na ịdị ọcha chromatographic yiri ya. Na nyocha nke Thioflavin T, nke abụọ nkwadebe na-egosi na mbụ fluorescence ịrị elu. Ndị otu ahụ kwubiri na nza ọhụrụ ahụ dị ike karị ma kwesịrị dochie ihe gara aga.
Nlebanya enwetara bụ usoro oge fluorescence dị iche n'okpuru ọnọdụ edekọtara. Ike ndu kariri, otu mkpokọta ọnụ ọgụgụ, ma ọ bụ ọtụtụ ntụpọ eguzobebeghị. Nnyocha ahụ kwesịrị ikewapụta njirimara kemịkal, ego, steeti mgbakọ, njikwa akụkọ ihe mere eme, na agụ nke dabere na agba.
Kọwaa ihe ahụ na ọnọdụ ya tupu ịkọwa usoro
Gosipụta iberibe Aβ kpọmkwem, ụdị ma ọ bụ usoro isi mmalite, ụdị ọnụ, mgbanwe, aha, na otutu nkewa. Aβ(1–42), obere iberibe, na ihe ewepụtara gbanwetụrụ bụ nkọwapụta molekụla dị iche iche. Aha katalọgụ dị mkpirikpi ekwesịghị dochie ndekọ zuru ezu.
Mgbe ahụ chọpụta njirimara kemịkalụ site na njirimara mgbakọ. Nsonaazụ HPLC nwere ike ịkọwa ihe nlele n'okpuru usoro nyocha ya, mana ọ naghị ewepụta mkpokọta ọnụ ọgụgụ ndị nọ na nkwadebe nyocha dị iche. Ọnọdụ dị mkpa nwere ike ịgbanwe n'oge nkwadebe ma ọ bụ nha.
Stine na ndị ọrụ ibe 'Aβ nkwadebe ọmụmụ na-akwado mkpa nke ọnọdụ mgbakọ na mmalite nkwadebe. Ọ naghị enye ọrụ steeti zuru ụwa ọnụ maka vial ma ọ bụ guzobe nha nha nke ihe nlele nyocha akwadoro onwe ya..
Ime ụlọ Dekọọ steeti ewepụtara, nkwadebe ọkara, ndabere itinye uche, akpa, na-enyefe, oge gafere, nchekwa, na ihe ọ bụla mara mkpughe ma ọ bụ ịgwakọta iche. Ogologo oge amaghi ama kwesiri ka a na-ahụ anya. Aha nhazi ma ọ bụ nkwupụta nke "akwadoro ọhụrụ" abaghị uru karịa akụkọ ihe mere eme n'ezie.
Debe afọ nkwadebe iche na elekere ngwá ọrụ
Nkwekọrịta oge echiche efu. Nkwadebe A na-amalite nnweta nkeji iri ka emechara mmemme nkwadebe ahọpụtara wee gosi ncha ọkụ na-ebili nkeji iri atọ n'ime nnweta.. Nkwadebe B na-amalite inweta Pancragen nkeji iri atọ ka emechara ihe omume kwekọrọ na ya wee bilie nkeji iri n'ime nnweta. Abụọ ịrị elu na-eme nkeji iri anọ ka emechara mmemme nkwadebe ahụ akọwapụtara, n'agbanyeghị dị iche iche egosipụta ugboro mgbe ngwá efu.
Oge ndị echepụtara na-egosi enweghị mgbagwoju anya ndekọ, ọ bụghị ihe akaebe na usoro ndị dị n'okpuru bụ otu. Ihe nlele abụọ ahụ ka nwere ike ịdị iche na steeti mmalite, n'ezie ikpughe ma ọ bụ nha. Kọwaa oge efu — mgbasa, ịgwakọta na akụrụngwa, nlele ma ọ bụ nweta mbụ-ma chekwaa oge gafere n'etiti ihe omume ndị ahụ. A òkè uzommeputa aha adịghị hụ na otu nkwadebe afọ na nha.
Beta Endorphins A nkwadebe nwekwara ike n'ihu nke e dere window. Ọ bụrụ na uru mbụ ọ nwetara adịlarị n'elu ebe mgbama ekwuputara, ngafe ahụ mere tupu ma ọ bụ na nlele mbụ n'okpuru usoro nyocha. Nchọgharị ahụ anaghị enye oge ngafe ziri ezi n'ime oge na-efu efu. Kpesa oke ma chekwaa akụkọ ihe mere eme tupu ị nweta ya kama ịkwado mmalite obi ike site na data anaghị achọpụta ya.
Mmachi ahụ dị mkpa ma e jiri mgbanwe ahụ a na-ahụ anya tụnyere nkwadebe nke akparamagwa ya agbagharaghị. Ọdịda dị mkpụmkpụ akọpụtara nwere ike igosipụta mpio nleba anya dị iche. Hazie nkọwa mmemme wee kwupụta ihe achọpụtara tupu ị na-ele ya anya dị ka ihe anụ ahụ nwere ọtụtụ ihe..
Dekọọkwa igbu oge ewepụtara site na ibu efere ma ọ bụ ijikwa usoro. Ọ bụrụ na otu nkwadebe na-anọ n'ọnọdụ mbụ n'usoro nkwụnye ego, oge nnweta nwere ike jikọta ya na afọ nkwadebe. Ntụnyere nke na-ekwu na nsonaazụ ya bụ naanị nza kwesịrị ịkọ maka mmekọrịta ahụ ma ọ bụ kwuo ya dị ka oke. Ekenyeghachila steeti mmalite na-enweghị akwụkwọ n'azụ. Prostamax
Hoofnagle na ndụmọdụ peptide-assay nke ndị ọrụ ibe jikọtara ọnụọgụ na njikwa. Maka ntụnyere a, Nleba anya n'ọnụ kwesịrị ịbụ nke a ga-achọpụta na ntinye ego na ndekọ nkwadebe kwesịrị ekwesị. Otutu ntụ ntụ aha nhata anaghị ewepụta ntinye ma ọ bụ mgbake nha nhata ozugbo.
Jiri akara ngosi họrọ ihe akaebe karịa nkọwa kachasị amasị
| Achọpụtara akara | Nkọwa enwere ike | Ihe akaebe chọrọ | Nzọụkwụ ọzọ |
|---|---|---|---|
| Na mbu ThT fluorescence bilitere | Mgbakọ mmalite dị iche iche, ego, ọnọdụ nyocha, ma ọ bụ ihe esiji ákwà | Ndekọ nkwadebe dabara adaba, mkpa mgbakọ ozi, na njikwa ịgụ ihe | Tulee ọnọdụ mmalite tupu ekenye usoro |
| Otu ntinye aha aha mana mgbama dị iche iche | Ndabere ego dị iche iche, mgbake, ma ọ bụ nzaghachi dabere na ndị mmadụ | Ọnụọgụ ọrụ na akaebe nkwado / mgbake | Nyochaa ihe banyere nyocha ahụ, ọ bụghị naanị ngwaahịa ngwaahịa |
| Ntụnyere HPLC mpaghara-ụkpụrụ ịdị ọcha | Profaịlụ kemịkalụ yiri nke a kọrọ na-enweghị steeti mgbakọ dakọtara | Ọnọdụ usoro na njiri mara mgbakọ dị mkpa | Debe nkwupụta kemịkalụ na steeti anụ ahụ iche |
| Ihe a na-ahụ anya ma ọ bụ na-agbanwe agbanwe | Mmiri ozuzo, mgbakọ, ma ọ bụ mgbanwe nlele ọzọ | Ngosipụta dabara adaba nke steeti nlele n'ezie | Detuo ihe nleba anya; akọwapụtala ụdị dị iche iche site na ọdịdị naanị |
| Ọgụgụ ọgụgụ ọrụ dị iche ebe ThT yitere | Onu ogugu di iche iche ma obu ihe nleba anya nke ThT edozighi ya | Njikwa arụ ọrụ nọọrọ onwe ya yana ihe nrụnye ma ọ bụ akaebe ọnụọgụgụ dabara adaba | Nyochaa njedebe ọrụ na usoro nke aka ya |
Ọmụmụ Cohen na ndị ọrụ ibe Aβ42 nyochara nucleation nke abụọ na usoro akọwapụtara. Ọ na-eme mgbakọ dị adị Peptides na-egosi dabara na ajụjụ mechanistic, mgbe na-ahapụ ihe kpatara nke a hypothetical mbụ fluorescence ịrị elu na-edozighị. Otu ọkpụkpụ enweghị ike ịkenye ụzọ ahụ obere ihe.
Ọtụtụ echiche nwere ike iwepụta nkuzi oge yiri nke ahụ. Ntụle na-esote kachasị mma bụ nke na-amata ọdịiche dị iche iche dị iche iche, ọ bụghị nke kacha yie nkọwa kachasị amasị.
Kọwaa Thioflavin T dị ka usoro na-adabere na ọgụgụ
Xue na ndị ọrụ ibe' ThT ọmụmụ na-eleba anya nzaghachi agba na nha mkpokọta maka sistemu anwalela. Kọwaa fluorescence n'okpuru ọnọdụ ya n'ezie kama ịgwọ ya dị ka ọnụ ọgụgụ ndị oligomers niile, nkọwa mgbakọ zuru oke ma ọ bụ nleba anya nke ike ndu.
Maka ntụnyere echiche, nyochaa ọnọdụ ndị metụtara agba agba, ntọala ngwá ọrụ, ọgwụgwọ ndabere, oge nleba anya, na nkọwa nke nsonaazụ a kọrọ. Ngbanwe n'okirikiri ahaziri ahazi nwere ike ịchọ nkọwa dị iche site na mgbanwe na mgbama zuru oke.
Jido usoro oge zuru oke yana nhọrọ nyocha izizi. Ejila ngwucha ahọpụtara atụnyere site na otu nkwadebe yana paramita dabara adaba site na nke ọzọ mgbe ị na-akpọ ha otu nsonaazụ ahụ. Mwepu ọ bụla ma ọ bụ ngbanwe ọ bụla kwesịrị ịchọta ya.
Olulu mmiri ugboro ugboro site na otu ngwaahịa a kwadebere na-adreesị isi mmalite dị iche iche nke mgbanwe sitere na ebuka akwadoro onwe ya. Olulu mmiri isii nwere ike ịkekọrịta otu mmalite mgbakọ nkesa na njehie nkwadebe. Ọ bụrụ na nkwupụta ahụ metụtara ntule nkwadebe, chekwaa ihe njiri mara nkwadebe maka olulu mmiri ọ bụla wee mata ọdịiche dị n'ime nkwadebe site na ntụnyere nkwadebe onwe ya. Nchọpụta nke ọma naanị anaghị ewepụta usoro nkwadebe.
Nkọkọ agbakwunyere nwere ike ịza ajụjụ ndị agụpụta agba anaghị edozi. Nhọrọ kwesịrị ekwesị dabere ma ọ dị mkpa iji nyochaa nkesa nha, morphology, mejupụtara, ma ọ bụ akụkụ ọzọ. Otu nha orthogonal nwekwara oke; Ekwesịrị ịkọwa nsonaazụ ya maka steeti nlele ma jụọ ajụjụ ọ na-enyocha n'ezie. Oxytocin Peptides
Ọrụ njirimara nwere ike n'onwe ya gbanwee ihe a hụrụ. Dilution, nkewa, Ndokwa elu ma ọ bụ oge nlele gafere nwere ike iwepụta ọnọdụ nlele dị iche na ngwakọta nyocha mbụ. Debe mgbanwe ndị ahụ na nsonaazụ ya wee zere ịlele nha na aliquot emebere ka ọnụ ọgụgụ zuru oke nke ndị bi na-emebeghi ya.. Họrọ nkwado nkwado nwere oke dị iche iche dị mkpa kama ịtinye aha ngwa ọzọ.
Ihe mgbochi bara uru bụ na nchịkọta abụghị mgbe niile ọdịda achọghị. Ọmụmụ nwere ike kpachaara anya chọọ nkwadebe fibrillar mara mma. N'ọnọdụ ahụ, ajụjụ nnabata ahụ gbasara ọgbakọ akọwapụtara na ihe akaebe ya, Kama iche na Aβ niile anabatara ga-abụrịrị otu.
Dezie ntụnyere ma kọwaa arịrịọ ihe na-esote
| Ngwa mkpa | Nkọwapụta ịtụ na nkwadebe | Njikwa igodo | Nkọwa ọdịda |
|---|---|---|---|
| Tulee ihe ọmụmụ oge nchịkọta | Kpọmkwem iberibe na ihe akaebe kemịkalụ dabara adaba, na akwụkwọ nkwado mmalite | Ndabere ego dakọtara, njikwa agba/ ndabere, na nyocha na-agbanwe agbanwe | Ọdịiche mgbanaka anaghị achọpụta usoro nchịkọta pụrụ iche |
| Mụọ ọnụ ọgụgụ ndị mgbakọ akọwapụtara | Nkọwapụta nkọwapụta chọrọ yana ihe akaebe dabara na nzọrọ ahụ | Nkọwapụta ọnụọgụgụ na ndekọ njikwa ndị dị mkpa | Naanị ịdị ọcha kemịkalụ enweghị ike igosi ọnụ ọgụgụ ndị achọrọ |
| Tulee nzaghachi ndu | Ihe ndekọ ihe onwunwe na steeti jikọtara na nnwale arụrụ arụ | Njikwa akara njedebe kwụụrụ onwe ya | Myiri ThT ma ọ bụ ike anaghị ewepụta ọrụ nha anya |
| Tulee nza ma ọ bụ ụlọ nyocha | Ọtụtụ maapụ, ndabere nke ukwu, akụkọ nkwadebe, na nkọwapụta nsonaazụ kekọrịtara | A imewe na-agwa nnọkọ na nkwadebe iche | A naghị edozi ọtụtụ mmetụta ma ọ bụrụ na mgbanwe ndị ọzọ nwere mgbagwoju anya |
Ndozi mbụ n'okwu a na-eche echiche bụ imegharị nkwubi okwu ahụ: "Nkwadebe nke abụọ nyere ịrị elu ThT fluorescence mbụ n'okpuru ọnọdụ edere." Chekwaa nlebanya ahụ ka ị na-egbochi nkwupụta ike anaghị akwado.
Osote, wughachi akụkọ ihe mere eme abụọ ahụ wee chọpụta ndịiche enwere ike ịnwale ma ọ bụ dozie site na ndekọ ndị dị ugbu a. Ọ bụrụ na ozi mmalite steeti adịghị, kwenye na mmachi ahụ kama ịtụgharị uche na-ekwupụta ma sample monomeric.
Mgbe ị na-arịọ ihe ma ọ bụ ntụnyere ọhụrụ, kọwaa ajụjụ a chọrọ na ihe akaebe achọrọ. Jụọ àgwà ewepụtara nke onye na-ere ahịa hibere yana ajụjụ nkwadebe steeti ka fọdụrụ maka ụlọ nyocha.. E kwesịghị iwepụta asambodo izugbe dị ka ihe nkwenye nke ọnụ ọgụgụ mmadụ ga-emecha mechaa.
Debe nkọwa nke molekụla, ọtụtụ ndekọ, ngụkọta oge, akụkọ nkwadebe, mkpa njirimara, usoro oge, yana nsonaazụ ọrụ jikọtara. Nke a na-enye onye nlegharị anya ọzọ ohere ịmata ọdịiche dị n'ihe nchọta na nlebanya akọwapụtara.
Kwupụta ntụnyere na-esote n'usoro oge edozibeghị, ihe dị iche ma ọ bụ nha nha. Kpesa ihe nleba anya fluorescence na elekere a kapịrị ọnụ ma debe nkwuputa usoro ma ọ bụ arụ ọrụ ọ bụla iji kewaa ihe akaebe.. Nsonaazụ jikọtara ọnụ na vitro anaghị ewepụta mmetụta ọgwụgwọ na ndị mmadụ..
Ajụjụ a na-ajụkarị
Ịdị ọcha HPLC dị elu ọ pụtara na nlele nyocha bụ monomeric? Mba. Ịdị ọcha kemịkalụ n'okpuru usoro akọwara na steeti mgbakọ na nyocha dị iche iche. Kọwaa ọnọdụ nkwadebe dị mkpa mgbe nkwubi okwu dabere na ya.
ịrị elu ThT mbụ ọ na-egosi nsi ma ọ bụ ike ka ukwuu? Mba. Ọ bụ nlebanya metụtara mkpokọta dabere na usoro. Mmetụta ndụ chọrọ ihe akaebe nọọrọ onwe ya na njikwa dabara adaba.
Enwere ike ngwọta doro anya na-ewepụ esemokwu mgbakọ dị mkpa? Mba. Ọdịdị a na-ahụ anya enweghị ike idozi ọnụọgụ mmadụ ma ọ bụ mgbanwe kemịkal ọ bụla dị mkpa. Jiri usoro dabara adaba na steeti achọrọ.
Kwesịrị ịtụfu nkwadebe ọ bụla agbakọtara? Ọ bụghị na-akpaghị aka. Nnwale e bu n'obi nwere ike ịchọ ọnọdụ mkpokọta ama ama. Kpebie megide ojiji na ihe akaebe akọwapụtara, kama ilekọta mkpokọta dị ka ihe a na-anakwere n'ụwa niile ma ọ bụ ihe a na-anabataghị.
