Azịza ngwa ngwa
Ọrụ nchacha peptide kacha baa uru mgbe arịrịọ ahụ kọwapụtara ma ogo achọrọ yana ọnụọgụ ebumnuche anabatara nke achọrọ ma emechaa.. For a hy…
Ọrụ nhicha Peptide - Dee mpempe akwụkwọ maka ịdị ọcha yana mgbake enwere ike iji ya
Ghk Ku Ọnụ ego peptide Ọrụ nchacha peptide kacha baa uru mgbe arịrịọ ahụ kọwapụtara ma ogo achọrọ yana ọnụọgụ ebumnuche anabatara nke achọrọ ma emechaa.. Maka onye na-akwado hydrophobic, chromatogram ikpeazụ dị mma nwere ike ibikọ ọnụ na oke mgbake ma ọ bụ ihe isi ike nkwadebe. Nkenkenke ahụ kwesịrị ime ka nsonaazụ ndị ahụ pụta ìhè karịa ilele uru mpaghara kachasị dị ọcha dị ka naanị ihe ọganiihu.
Atumatu ntule: ụlọ nyocha na-eziga peptide nyocha crude maka ịdị ọcha. Ihe eweghachiri nwere mpaghara HPLC dị elu-uru ịdị ọcha, mana ego e kenyere ebumnobi ewepụtara dị ala karịa ọrụ a tụrụ anya ya. Ndị otu ahụ na-enyo enyo na nhọpụta dị warara kpatara kpatara mfu ahụ, ọ bụ ezie na akụkọ dịnụ anaghị agụnye akụkụ dị mkpa ma ọ bụ ndekọ ndekọ ọkwa.
Nleba anya bụ oghere pụtara ìhè n'etiti ego ebumnuche achọrọ na enwetara. Ekwupụtaghị ihe kpatara ya. Ọrụ na-esote bụ ịkọwapụta ego ndabere, mgbake denominator, ihe akaebe dị ọcha, na ihe eji eme ihe ikpeazụ tupu ị rịọ mkpegharị.
Kọwaa ịdị ọcha, mgbake, na ihe ikpeazụ-eji chọrọ iche
Ịdị ọcha mpaghara HPLC na-akọwa nzaghachi ihe nchọpụta agbakwunyere ekenye na ebumnuche n'okpuru usoro ekwuputara. Iweghachite na-akọwa etu ebumnuche ruru n'ọkwa akọwapụtara n'ihe gbasara ntọala ntinye ziri ezi. Ụkpụrụ ndị a na-aza ajụjụ dị iche iche na e kwesịghị ijikọta ya na-enweghị ihe atụ nha ọnụ.
A naghị ebute mgbake na-akpaghị aka n'ihi na ihe mmalite na nke ikpeazụ nwere ike ịdị iche. Melanson na ndị ọrụ ibe 'ihe ọmụmụ-ekenye ọrụ na-akọwa ihe kpatara ọnụọgụ ebumnuche chọrọ nlere nha akọwapụtara yana ndozi. Debe ntọala ahụ ka ọ na-aga n'ihu n'ofe ọkwa nchacha.
Kọwaa oke ogbo. Iweghachite site na nbudata na elution, mgbake mgbe igwu mmiri, na mgbake dịpụrụ adịpụ ikpeazụ nwere ike Ọgwụ mgbochi natriuretic peptide iche. Otu nọmba n'ozuzu nwere ike ịba uru, mana ọ nweghị ike ịchọta mfu na-enweghị ozi etiti dabara adaba.
Jide ozi zuru oke iji kewapụ ebumnuche jụrụ na mfu na-akọwaghị. Ebumnuche atụnyere na obere akụkụ mana ewepụrụ site na njiri adịghị ọcha ziri ezi nwere echiche dị iche na ebumnuche anọghị na nsonye niile atụpụtara.. Ha abụọ na-ebelata ọnụọgụ ikpeazụ enwere ike iji, ma ọ bụ naanị nke mbụ ka a kọwara site na mkpebi ikpokọta. Ọsọ ọzọ dị ọcha kwesịrị ileba anya n'ezie ogbo ma ọ bụ nsogbu nkewa.
Kọwaakwa ihe anabatara maka nnwale ọzọ. Ụlọ nyocha ahụ nwere ike ịchọ opekempe ego e kenyere, oke adịghị ọcha dị mkpa, otu molekul Ss 31 ụdị, ma ọ bụ ndakọrịta na nkwadebe akwadoro. Ọnụ ụzọ ịdị ọcha na-enweghị ihe ndị a chọrọ na-ahapụ onye na-ahụ maka ọrụ ka ọ mara nke ahịa dị mkpa.
Maka oru echiche, nkenke kwesịrị ikwu ma obere ego na ịdị ọcha kacha enweta ọ bara uru, ma nzuko ọdọ mmiri ọzọ nkọwapụta ekwekọrịtara ga-anabata, na mgbe ụlọ nyocha chọrọ ka nyochaa mwepu. Ndị ahụ bụ mkpebi ọrụ, ọ bụghị eluigwe na ala iwu ọcha.
Na-arụ ọrụ nke ntakiri nhọrọ megidere ihe abụọ a chọrọ
Ihe omume ikpokọta echiche dị iche. Were nha nha kwesịrị ekwesị kenye 5 nmol nke target na 0.05 nmol nke otu adịghị ọcha dị egwu na ọdọ mmiri isi. Otu akụkụ akụkụ nwere nke ọzọ 4 nmol target na 0.45 nmol nke adịghị ọcha ahụ. Maka nkuzi naanị, oru ngo chọrọ opekata mpe 7 nmol lekwasịrị anya ma na-achọ ka oke ruru adịghị ọcha ga-ezubere iche ka ọ ghara karịa 2%. Ndị a bụ njirisi echepụtara, Ọ bụghị n'ozuzu peptide nkọwa.
Isi naanị ya nwere a 1% oke adịghị ọcha-na-ebumnuche mana ego ebumnuche ezughi oke. Ịgbakwunye akụkụ akụkụ dum na-enye 9 nmol target na 0.50 nmol adịghị ọcha, ma ọ bụ gbasara 5.56% ikwu na lekwasịrị anya. Ọdọ mmiri sara mbara na-eme ka ọnụọgụ ahụ dịkwuo mma ma ọ na-ada n'ụkpụrụ adịghị ọcha ekwuputara. Ọ dịghị ọdọ mmiri ọ bụla bụ ihe ịga nke ọma zuru oke megide ihe abụọ a chọrọ.
Ọ bụrụ na akụkụ akụkụ ahụ bụ otu ma nwee ike kewaa ya nke ọma na-enweghị mfu dị mkpa, na-agbakwunye ọkara ruru 7 nmol target. Ọ na-agbakwụnye 0.225 nmol adịghị ọcha na isi 0.05, inye 0.275/7, ma ọ bụ gbasara 3.93%. Nke ahụ ka na-ada n'echiche 2% akara. Naanị ịhọrọ oke etiti anaghị edozi azụmaahịa a; ọzọ nkewa, A ga-achọgharị oke agbazigharị ma ọ bụ mkpebi ọzọ akwadoro. P21
Mgbakọ a na-eji ọnụọgụ molar ekenyere nke adịghị ọcha na ebumnuche akọwapụtara. Ọ bụghị mgbako mpaghara-ọcha HPLC, anaghị agụnye ihe ọ bụla ọzọ mejupụtara ma na-eche na ọ dịghị mgbanwe ọhụrụ n'oge ikpokọta. Kwupụta oke ndị ahụ tupu itinye echiche ahụ na data pere mpe n'ezie.
Nye ozi mmalite-ihe achọrọ maka ntule ziri ezi
Nyefee kpọmkwem usoro, njedebe, nhazi, mgbanwe, na njirimara nhazi ọ bụla amaara. Kọwaa ọnọdụ ihe onwunwe na akụkọ ihe mere eme, ozi oke na ebumnuche ego dị, na ụzọ ndị na-akwado ha. A na-ekwu na usoro bụ hydrophobic bụ ndabere, ọ bụghị nkọwa zuru oke nke omume ya.
Gụnye usoro nyocha echere ma ọ bụ chromatogram dị na ihe nlegharị anya nwere njirimara nlele yana ọnọdụ usoro.. Kọwaa akụkụ nke ekenyere ebumnuche yana ọrụ ndị a na-ejighị n'aka. Achọghị ka ọrụ ahụ chee na ọnụ ọgụgụ crude kacha ukwuu bụ peptide achọrọ.
Kọwaa ihe nlele nkwadebe ama ama, dị ka mgbasa na-ezughị ezu ma ọ bụ ihe edobere ka ebufechara, na-atụgharịghị ha ka ọ bụrụ usoro a na-enyochabeghị. Onye na-eweta ya chọrọ nleba anya na ọnọdụ ya, ọ bụghị nchọpụta obi ike na-akwadoghị site na ndekọ ahụ.
Insusty Cepeda na ndị ọrụ ibe enyocha gradient-elution siri ike-phase mmịpụta maka peptides ahọpụtara. Ọrụ ha na-akwado ịtụle onye ga-achọ ikewapụta ebumnuche. Ọ naghị ewepụta usoro kachasị mma, nhọrọ ikpokọta ma ọ bụ mgbake maka nkwadebe echiche efu a.
Rịọ onye na-eweta ya ka ọ kọwaa nkewa a chọrọ na mkpa akaebe ya. Usoro nwere ike ịbụ onye mbido nwere ezi uche mgbe ọ ka na-achọ mmepe. Nhota ahụ kwesịrị ịmata ọdịiche dị n'ọkwa a ga-ekwe omume na nkwa nke nsonaazụ ikpeazụ akọwapụtara. Peptoids
Mezue nkenke nke na-eme ka azụmaahịa nkwụghachi dị ọcha pụta ìhè
| Ogige dị nkenke | Ntinye iji wuchaa | Mkpebi ọ na-akwado |
|---|---|---|
| njirimara ebumnuche | [Usoro, njedebe, nhazi, mgbanwe, na ihe owuwu chọrọ] | Na-akọwapụta ihe aga-enwetarịrị |
| Ihe mmalite | [Steeti, otutu, nnukwu ego, dị iche iche ọrụ, na akụkọ ihe mere eme] | Na-ewepụta ntinye na ejighị n'aka |
| Nyocha dị adị | [Chromatogram, ụdịdị dị iche iche, ụzọ, ọrụ kacha elu, na oke mkpa] | Na-akwado nhọrọ usoro na nsochi njirimara |
| Achọrọ ojiji ikpeazụ | [Nnwale, kacha nta bara uru iche ego, na àgwà àgwà kwesịrị ekwesị] | Na-akọwapụta ihe dị mkpa dị ka ihe ga-esi na ya pụta |
| Nkọwa mgbake | [Oke ọkwa, ndabere ego-ego ndabere, yana oke nha anabatara] | Na-egbochi ntụnyere oke oke na-eduhie eduhie |
| Mkpebi ọdọ mmiri na ewepu | [Nlebanya achọrọ tupu ị gbanwee njirisi ọdọ mmiri ma ọ bụ ibuga oke ọzọ] | Na-eme ka azụmaahịa kwekọọ na ọrụ ahụ |
| Ngosipụta ikpeazụ | [Enyere steeti, akpa, nkwupụta ego, na ozi nkwadebe dị mkpa] | Na-ejikọ ihe dị ọcha na nnwale ọzọ |
| Ngwungwu mkpesa | [njirimara jikọtara ọtụtụ, chromatography, nke ukwu, ntakiri ma ọ bụ ihe akaebe ọkwa dị ka achọrọ] | Na-akwado nyocha ma ọ bụrụ na nsonaazụ dị iche na nkwekọrịta ahụ |
Ihe atụ nzikọrịta ozi bụ: "Anyị chọrọ ihe dị ọcha maka iji nyocha agbakwunyere. Biko nyochaa ebumnuche na nyocha mmalite, kwupụta oke nchacha a chọrọ, ma kọwapụta otu a ga-esi kọọ ego ebumnuche ikpeazụ na mgbake. Kpọtụrụ anyị tupu ịnakwere mgbanwe nchikota ma ọ bụ nnyefe nke na-emetụta ogo ekwenyero ma ọ bụ ego kacha nta bara uru. "
Nkenkenke nkenke kwesịrị ịkọwa ego ole enwere ike iji ya na mmachi dị mkpa ọnụ. Ọ bụrụ na nkewa a chọrọ enweghị ike izute ha abụọ, chọrọ ntụleghachi ebe a ka nwere ike nyochaa akụkụ ndị ọzọ ma ọ bụ nhọrọ. Pasent ikpeazụ dị elu abụghị naanị ebe njedebe ga-ekwe omume, na onye na-eweta ya ekwesịghị ịgbachi nkịtị n'ihe gbasara adịghị ọcha ekwenyero iji mụbaa.
Jụọ ajụjụ ise ma kọwaa COA eweghachiri
- Gịnị bụ mgbake denominator? Jụọ ego e lekwasịrị anya n'oge a na-eji yana ihe akaebe na-akwado ya.
- Kedu ka a ga-esi soro njirimara lekwasịrị anya site na ịdị ọcha? Rịọ ọrụ dị mkpa na usoro usoro, kama ịdabere naanị na ọnụ ọgụgụ kacha elu.
- Kedu ihe akaebe na-akwado mkpebi ikpokọta? Jụọ ihe obere ozi echekwabara na mgbe ọdọ mmiri ọzọ chọrọ nyocha ọrụ.
- Kedu ihe nkwupụta ọnụọgụgụ ikpeazụ pụtara? Chọpụta ihe dịpụrụ adịpụ, mkpokọta peptide metụtara, na ekenye ego ebumnuche.
- Kedu ka a ga-esi nyochaa ego eji eme ihe na-atụghị anya ya? Kwekọrịta na ịnweta ndekọ ndekọ ọkwa dị mkpa, nyochaa ibu ọrụ, na omume ọzọ enwere ike.
| Ala eweghachitere | Nkọwa bara uru | Oke ichekwa |
|---|---|---|
| Nsonaazụ njirimara | Ihe akaebe na-akwado ebumnuche a tụrụ anya n'ime ikike nke usoro ahụ | Ọ bụghị ihe akaebe nke njirimara nhazi ọ bụla |
| Mpaghara ịdị ọcha | Nsonaazụ chromatographic akọpụtara maka nlele ikpeazụ | Ọ bụghị akụkụ dị nta nke ebumnuche akpaka ma ọ bụ uru mgbake |
| Ọnụọgụ ikpeazụ | Ọnụ ego dabere n'ụzọ doro anya | Oke oke naanị nwere ike ọ gaghị akwado ntinye ebumnuche achọrọ |
| mgbake | Mgbasa ozi ebumnuche gafere oke ọkwa akọwapụtara | Enweghị ike ịchọta mfu na-enweghị ndekọ nkwado kwesịrị ekwesị |
| Ozi mmiri ma ọ bụ mgbochi | Ihe akaebe mejupụtara dabara na ụdị ego ma ọ bụ ojiji | Adịnyela mgbazi n'okirikiri na-aghọtaghị ọrụ ahụ |
Na hypothetical anomaly, buru ụzọ mekọrịta nkọwa ntinye na mmepụta. Wee nyochaa nhọrọ ntakiri na usoro ndị ọzọ nwere ezi uche, dị ka nkwadebe, nbudata, nyefe, ma ọ bụ ikewapụ ikpeazụ. A elu ikpeazụ ọcha adịghị guzobe nke ogbo mere a belatara ego.
Hoofnagle na ndị ọrụ ibe jikọtara ọnụ ọgụgụ peptide na njikwa ya na iji nyocha. Echiche ahụ bara uru na ntinye aka: Ekwesịrị iji ozi zuru ezu sonye ihe ikpeazụ iji kwadebe ya na ndabere e bu n'obi, n'echeghị na ngwọta ọ bụla na-esote nwere mgbake zuru oke.
Nyocha ọzọ kwesịrị ileba anya n'ezie ọdịiche ahụ. Ọnụ kasị elu na-atụghị anya ya, njirimara edozighi ya, nkọwa ọnụọgụgụ ekwekọghị, ma ọ bụ ọnwụ ogbo na-akọwaghị nwere ike kwado ọrụ ezubere iche. Ikwughachi ntule HPLC ikpeazụ naanị nwere ike ọ gaghị edozi ihe mgbake na-efu efu.
Kwado usoro ndekọ ego ọkwa, ntakiri akaebe na mwepu mkpebi tupu ikpe ikpeazụ pụta. Maka ebumnuche n'ezie, tulee ego akwadoro na adịghị ọcha dị mkpa kama ịnyefe oke ihe atụ n'elu. Dekọọ ihe achọrọ n'ụzọ doro anya wee chọpụta ma nkọwapụta, nkewa ọzọ ma ọ bụ ohere ọhụrụ nwere ike dozie ya.
Ajụjụ a na-ajụkarị
Ịdị ọcha mpaghara ikpeazụ dị elu ọ pụtara ịrụ ọrụ ọcha ka mma? Ọ nwere ike igosi mmụba n'àgwà chromatographic ahụ, mana arụmọrụ dabere na njirimara ebumnuche, ego eji eme ihe, mgbake, na ihe ezubere iji mee ihe.
Nwere ike nkụ uka tupu na mgbe ọcha guzobe iche mgbake? Ọ bụghị na-akpaghị aka. Ihe mejupụtara na ntọala ego nwere ike ịdị iche. Jiri agụmagụ lekwasịrị anya dakọtara nwere oke ọkwa akọwapụtara.
Kwesịrị ka a na-ahọrọ ọdọ mmiri dị nta karịa ka ọ na-amụba mkpụrụ? Mba. Ọ nwere ike ịgbanwe profaịlụ adịghị ọcha dị mkpa. Nyochaa ụzọ ọ bụla megidere ogo ekwenyero na ego achọrọ yana ihe akaebe pere mpe na-akwado.
Kedu ihe onye mbido kwesịrị ibu ụzọ ziga ndị otu nchacha? Zipu nkọwa ebumnuche zuru oke, ndekọ mmalite-ihe, nyocha dị, ikpeazụ-eji mkpa, na ọnụ ọgụgụ ma ọ bụ ajụjụ nkwadebe edozibeghị. Ntinye ndị ahụ na-eme ka ntule teknụzụ bara uru karịa arịrịọ maka pasent dị elu naanị.
