Azịza ngwa ngwa
Ụlọ nyocha na-ebu ụzọ nweta ndekọ ndekọ aha lysine, ebe peptide nyere iwu na-amalite na glycine. Nkwekọrịta ahụ pụtara ìhè nwere ike bụrụ ihe na-emekarị…
Ntuziaka Synthesis Peptide - Ọgụgụ usoro N-to-C dị iche site na Mgbakọ
Ụlọ Peptides na protein Ụlọ nyocha na-ebu ụzọ nweta ndekọ ndekọ aha lysine, ebe peptide nyere iwu na-amalite na glycine. Esemokwu ahụ pụtara ìhè nwere ike ịbụ ihe nkịtị. A na-edekarị usoro peptide site na njedebe N ruo na njedebe C, mana njikọ peptide siri ike nke a na-ahụkarị na-achịkọta ụdọ ahụ n'usoro ihe fọdụrụ na-abụghị. Usoro ederede na mgbagwoju anya na usoro mgbakọ nwere ike iduga onye nleba anya ka ọ gbanwee ebumnuche ziri ezi.
Nkebi ahịrịokwu ọchụchọ "peptide synthesis N ruo C terminus" ya mere chọrọ azịza kpọmkwem ụzọ.. Ntụgharị asụsụ Ribosomal na-agbatị agbụ na njedebe C-terminal ya, na-enye N-to-C uto. SPPS na-emekarị na-amalitekarị site na ihe fọdụrụ C-terminal nke agbakwunyere na nkwado ma na-agbakwụnye ihe fọdụrụ na njedebe N.. Atụmatụ kemịkal pụrụ iche dị, ya mere ndekọ okporo ụzọ dị mkpa karịa iwu zuru oke gbasara njikọ niile.
Ebumnuche nke ntuziaka a bụ nfegharị nwere ike imegharị. Ụlọ nyocha ọzọ kwesịrị inwe ike wughachi molekul a chọrọ, ghọta ihe ndekọ mgbakọ, ma kewaa ihe akaebe maka usoro ihe fọdụrụ site na ihe akaebe na-akwado naanị ihe mejupụtara.
Tụlee ụzọ ndị ahụ site na ebe a na-eme nkekọ ọhụrụ
Na omenala SPPS, A na-ejigide yinye na-eto eto na nkwado siri ike ebe nchebe na-aga n'ihu na njikọ njikọ na-ekpughe ma gbatịa njedebe N-terminal ya.. Ọmụmụ Merrifield izizi hibere ọgbakọ siri ike na otu ihe atụ tetrapeptide. Mmezu nke oge a na-agbakwunye ọtụtụ nchebe, njikọ, na nhọrọ ngwá ọrụ, ma ha anaghị agbanwe nkwekọrịta maka ide usoro ikpeazụ.
Na ntụgharị asụsụ ribosomal, A na-ejikọta amino acids dịka usoro ntinye akwụkwọ ntụgharị asụsụ si dị, na agbụ na-amalite amalite site na N ruo C. Ọrụ nhazi nke Nissen na ndị ọrụ ibe ya na-enye ihe akaebe bụ isi gbasara ebe ribosomal peptide-bond-forming center.. Ọdịiche ntụzịaka ahụ achọghị ịnakwere nkọwa usoro ihe mere eme ọ bụla site na akwụkwọ ahụ.
| Ụzọ | Mgbagha mgbako | Ozi achọrọ maka inyefe | Oke dị mkpa |
|---|---|---|---|
| Mgbakọ SPPS | Ihe fọdụrụ C-terminal bụ nkwado; ndọtị agbụ na-aga n'ihu na njedebe N | Usoro N-ruo-C ikpeazụ, njirimara loading, atụmatụ nchebe, njikọ, na cleavage pụta | Iwu mgbakọ anaghị akọwapụta usoro usoro; njedebe ikpeazụ dabere na ụzọ ahụ |
| Okwu ribosomal | Yinye atụgharịrị na-eto N ruo C | wuo, precursor atụgharịrị, nhazi usoro, na ntozu ngwaahịa nkọwa | Ihe nrịbama egosipụtara abụghị peptide tozuru oke na akpaghị aka |
| Ngwọta-usoro kemịkalụ njikọ | A na-ejikọta ihe mpụta ma ọ bụ iberibe echekwabara dịka ụzọ ahọpụtara siri dị | Njirimara iberibe, agwụ agwụ, usoro njikọ, na akụkọ nchebe | Ọ dịghị otu ntụzịaka mkpirisi na-akọwa atụmatụ mkpirisi mkpirisi ọ bụla |
| Ngwakọta kemịkalụ ala | A na-ejikọta peptide thioester kwesịrị ekwesị na mpempe cysteine N-terminal na njikọ a kapịrị ọnụ. | Oke iberibe, njikọ kemistri, na mgbanwe ọ bụla na-esote | Njikọ na-aga nke ọma anaghị ewepụta n'onwe ya mpịachi ikpeazụ ma ọ bụ ihe nhazi ọ bụla |
Dawson na ndị ọrụ ibe ọmụmụ ligation kemịkalụ na-enye echiche ụzọ dị iche: A na-ejikọta iberi na-emeghachi omume nke ọma ka ọ bụrụ nwa afọ Budata njikọ nke peptide. Agaghị ejikọta ibe ya chọrọ n'ime otu eserese mgbakwunye nke fọdụrụ dị ka SPPS. Agbụ ikpeazụ ka nwere usoro N-to-C ọbụlagodi mgbe ọtụtụ iberibe na arụ ọrụ mechaa mepụta ya.
Ọrụ nkuzi: mee ka usoro ahụ dị n'otu n'ebughị ụzọ gbanwee
Atumatu nkuzi echiche. Ebumnuche bụ H-Leu-Ala-Phe-Thr-OH linear, edere H-LAFT-OH, na nhazi L e bu n'obi, free termini na enweghị ọzọ mgbanwe. A na-edozi usoro ebumnuche tupu ahọpụtara ụzọ. Enweghị mkpụrụ, A na-eche na ọ dị ọcha ma ọ bụ njikọ na-aga nke ọma na mmemme atụmatụ a.
Na omenala SPPS, Thr4 bụ ihe fọdụrụ C-terminal agbakwunyere site na nkwado/njikọ ahọpụtara. Phe3, E mechara webata Ala2 na Leu1 na njedebe N. Nke American Peptide Society SPPS primer na-akọwa echiche ọgbakọ izugbe, mana ihe atụ Rink-amide arụrụ ọrụ anaghị akọwapụta nkwado maka ebumnuche acid efu a. A ghaghị ịhazi otu njedebe ikpeazụ iche iche.
Ndepụta arụmọrụ Thr, Phe, Ala, Ya mere Leu dakọtara na LAFT. Akara ngwaahịa ikpeazụ TFAL na-akọwa usoro ihe fọdụrụ dị iche. Tupu ikwuwapụta njehie mgbagha, chọpụta ma ndepụta ahụ dekọtara ngwaahịa achọrọ, nkwado nbudata, ma ọ bụ mmemme mgbakwunye na-esote. Ngwa njikọ nwere ike nabata ebumnuche N- ruo-C ikpeazụ wee mepụta usoro arụ ọrụ; ịtụgharị ndenye ahụ n'onwe gị ga-emepụta njehie. FAQ
Soro yinye nkwado gachara usoro echiche ọ bụla na-aga nke ọma: T, mgbe ahụ FT, mgbe ahụ AFT, wee LAFT. Edere N na C, ihe fọdụrụ ọhụrụ ọ bụla na-egosi n'aka ekpe nke yinye dị. Ihe omume nchọgharị a ka a pụrụ ịdabere na ya karịa iburu n'isi na njikọ ahụ bụ "azụ azụ,” n'ihi na ọ na-egosi nke njedebe molekụla na-agbanwe ma na-ejigide ọnụọgụ ndị fọdụrụ iche n'oge niile.
Ọ na-akọwapụtakwa nghọtahie log log. Ọ bụrụ na mmemme mgbakwunye Ala2 adịghị, Mgbakwunye Leu na-esote na FT ga-adaba na onye na-achọ ihichapụ LFT n'okpuru akụkọ ihe mere eme ahụ dị mfe. Ọ bụrụ na ihe fọdụrụ anọ niile dị mana ndekọ ikpeazụ kwuru TFAL, Okwu a metụtara ịtụ ma ọ bụ labeling kama nke fọdụrụ na-efu. Ndị a bụ ndị chọrọ nyocha, ọ bụghị diagnoses si a log naanị: mmeghachi omume na-ezughị ezu na arụ ọrụ na-edeghị ede nwere ike ịmepụta ụdị ndị ọzọ.
LAFT na TFAL nwere otu ihe ndị fọdụrụ na otu usoro iwu na-adịghị emebi emebi mgbe ụdị ọnụ ha dabara.. Uka a na-atụ anya ya nwere ike inye aka chọpụta ihichapụ ụfọdụ, mana ọ nweghị ike idozi mgbanwe a. Họrọ ihe akaebe na-enwe mmetụta nke usoro maka esemokwu iwu yana ihe akaebe ngwụcha-otu maka esemokwu free-acid-versus-amide; otu igbe nrịbama njirimara na-ezochi ihe dị iche.
Maka onye anamachọihe Ala dị mfe LFT, Nnọpụiche a na-atụ anya ya dị ala karịa LAFT site na otu onyinye fọdụrụ alanine, ọ bụghị site na oke amino acid efu. Nhichapụ na-agbanwe ma ngwa ahịa fọdụrụnụ yana ọnụ ọgụgụ nke B Ụdị Peptide agbụ azụ; Ndekọ ndekọ ego abanyelarị na ọdịiche ahụ. Ọnụ ọgụgụ kasị elu na oke kwekọrọ ga-egosi na nyocha ihichapụ, mana ọrụ ndị ọzọ na ụdị ion ka chọrọ mwepu tupu ịkpọ ya aha.
Ya mere eserese ụzọ nwere ike iwepụta ajụjụ nyocha abụọ dị iche. Ntugharị a na-enyo enyo na-ajụ ma otu ihe fọdụrụ na-eme n'usoro na-ezighi ezi; Nhichapụ a na-enyo enyo jụrụ ma otu ihe fọdụrụ adịghị. Nke mbụ nwere ike ichekwa oke emebibeghị, ebe nke abụọ na-agbanwe mejupụtara. Ikwupụta ọdịiche ahụ tupu ịrịọ nyocha ọzọ na-eme ka nyocha ahụ pụta ìhè karịa ịrịọ naanị maka asambodo nke abụọ. Ụlọ ọrụ Peptide Synthesis
Ụzọ nchikota ga-achọ ụzọ ntụgharị ntụgharị asụsụ na ụzọ dabara adaba iji nweta tripeptide tozuru oke achọrọ.. Maka ebumnuche nkuzi obere echiche a, SPPS omenala na-enye usoro atụmatụ kwụ ọtọ n'ihi na enwere ike ịkọwapụta otu ngwụcha nke achọrọ ozugbo. Nke a bụ nhọrọ ọrụ ezi uche dị na ya, Ọ bụghị n'ụwa nile na-ekwu na peptide ọ bụla dị mkpụmkpụ dị mfe ma ọ bụ dị ọnụ ala karịa kemịkalụ.
Ọ bụrụ na ọrụ ahụ gbanwere gaa na akụkụ protein apịaji ogologo, ntụnyere ụzọ na-agbanwe. Nkwuputa, iberibe ligation, ma ọ bụ atụmatụ kemịkal ọzọ nwere ike ịma mma. Ogologo naanị anaghị edozi mkpebi ahụ; mgbanwe, mpịachi, mgbake, na ihe akaebe maka ngwaahịa ikpeazụ dịkwa mkpa.
Chekwaa ndekọ kacha nta site na ebumnuche gaa na nlele dịpụrụ adịpụ
Eserese usoro abụghị ọrụ nrụpụta zuru oke. Debe nkọwapụta ebumnuche iche na ntuziaka mgbakọ, ma debe ha abụọ jikọtara na nlele dịpụrụ adịpụ. Nke a na-egbochi usoro mkpirisi ka ihie ụzọ maka nkọwa ngwaahịa.
| Ndekọ kacha nta | Nkọwa achọrọ | Kedu ihe na-enweghị ike ikwubi ma ọ bụrụ na-efu |
|---|---|---|
| Ebumnuche ikpeazụ | Usoro N- ruo-C, nhazi ihe fọdụrụ, njedebe, mgbanwe, na njikọ | Mpụta ụzọ abụọ ahụ na-akọwa otu molekul |
| Maapụ ụzọ | Na-akwado nbudata ma ọ bụ njirimara precursor, oke iberibe, na usoro ọrụ | Ma ọ̀tụ̀tụ̀ mgbanwe nke usoro pụtara ìhè bụ ezi mperi |
| Akụkọ nhazi | Nchedo, ikpochapu, mkpado mwepụ, ligation, na mgbanwe ndị ọzọ dị mkpa | Na ngwaahịa ahụ dịpụrụ adịpụ nwere otu njedebe echere |
| Ndekọ ọcha | Nkeji irighiri, ikpokọta mkpebi, usoro ọnọdụ, na nke ikpeazụ sample maping | Na obere akụkụ nyochara na-anọchi anya vial ewepụtara |
| Ngwungwu nyocha | Ihe akaebe njirimara, usoro chromatographic, data raw, na njedebe | Usoro, nhazi, na ịdị ọcha zuru oke site n'otu ọnụ ahịa oke |
| Ọnụọgụ na ojiji | Ndabere ego, steeti sample, echere nnwale, na ụkpụrụ nnabata kwetara | Ọ̀tụ̀tụ̀ nha nha nhata ahụ na-enye nha nhata nke ebumnuche |
Maka nkwupụta, gụnyere ezigbo N- na C-terminal ókèala mgbe nhazi. Mkpado fusion nwere ike inye aka mmepụta mana hapụ ihe fọdụrụ na-achọghị ma ọ bụ ndị na-enweghị ntụpọ ma ọ bụrụ na atụmatụ nhazi ezughị ezu.. Maka SPPS, detuo ngwaahịa a na-ezube imebi kama ịnye acid efu ma ọ bụ amide site na mkpụrụedemede usoro naanị.
Maka ụzọ iberibe, jigide njirimara nke iberibe ntinye ọ bụla yana ihe akaebe maka saịtị njikọ ya. Ngwugwu ikpeazụ dabara na nchikota akụrụngwa anaghị egosi na e hiwere njikọ ọ bụla n'ebe e bu n'obi. Ajụjụ nhazi kwesịrị ikpebi ajụjụ nyocha.
Nyochaa nghọtahie n'usoro edoziri
Buru ụzọ gụọ nkọwapụta ikpeazụ n'olu dara ụda n'usoro N- ruo-C. Nke abụọ chọpụta ma ndepụta usoro ọ bụla na-akọwa usoro ebumnuche, usoro mgbakwunye, ma ọ bụ iwu iberibe. Map nke atọ ọrụ ọ bụla ruo na njedebe molekụla dabara adaba. Nke anọ tụnyere ngwaahịa a na-atụ anya ya na ihe akaebe nyocha nke dịpụrụ adịpụ.
Chekwaa usoro nhazi abụọ na ndekọ: mgbakwunye mmemme atọ nwere ike ịdekọ na nke fọdụrụ abụọ nke agbụ ikpeazụ, dabere ma a na-agụ nkwado nkwado dị ka ihe omume. Kwuo usoro ngụta ahụ. Akuko akpaghị aka na-arụ ọrụ naanị ọnụ ọgụgụ 1, 2, 3 na 4 nwere ike kenye nlele ma ọ bụ njikọ dara ada na ihe fọdụrụ na-ezighi ezi. Jiri nchikota ebumnuche ikpeazụ maka ọrụ nyocha ma jigide ọnụọgụ ọrụ maka nyocha usoro.
Ọ bụrụ na naanị ozi efu bụ akara na ndepụta mgbakwunye, Rịọ nkọwa ahụ tupu ịtụpụta resynthesis. Ọ bụrụ na akọwapụtaghị kemistri ọnụ n'ezie, njirimara ngwaahịa na-anọgide na-ezughị ezu ọbụlagodi mgbe usoro ihe fọdụrụ doro anya. Ọ bụrụ na uka na-enyo enyo dabara na ọtụtụ isomers usoro, gbagoro n'usoro nke nwere ike ileba anya n'ihe mgbagwoju anya.
Ọdịda ndị a na-ahụkarị gụnyere iṅomi ndepụta mgbakwunye azụ ka ọ bụrụ ụdị usoro, na-emeso usoro mmalite dị ka ngwaahịa tozuru okè, ma na-eche na pasentị mpaghara chromatographic dị elu na-egosi usoro fọdụrụnụ ziri ezi. Ndị a bụ nsogbu ndekọ na nkọwa dịka nsogbu kemistri.
Maka mbufe ụzọ, kọwapụta otu nghọtahie kama itinye ndepụta ọgụgụ na-enweghị ntụzịaka. “Nkọwa ahụ depụtara mgbakwunye C na N, ebe akwụkwọ iwu na-edepụta agbụ ikpeazụ N ruo C” na-edozi okwu nrịbama. "Edebeghị kemịlụ ntọhapụ linker" na-akọwapụta okwu njedebe na-edozibeghị. Ọ nweghị nkwupụta ọ bụla na-egosi na ihe vial dịpụrụ adịpụ nwere n'ezie.
Ajụjụ a na-ajụkarị
Ngwakọta peptide na-aga n'ihu N ruo C mgbe niile? Mba. Ntụgharị asụsụ Ribosomal na-eme, ebe SPPS na-emekarị na-agbakọta site na C-terminal residue n'ebe N njedebe.. Usoro nkewa kemịkalụ chọrọ nkọwa ụzọ nke ha.
M ga-atụgharị usoro ahụ mgbe m na-enye iwu SPPS? Mba. Nyefee usoro ikpeazụ na mgbakọ N-to-C kwekọrịtara. Otu njikọ ahụ na-asụgharị ebumnuche ahụ ka ọ bụrụ atụmatụ mgbakọ na-arụ ọrụ.
Onwere ike ịnwapụta na usoro ahụ ziri ezi? Otu uka na-adịghị emebi emebi naanị enweghị ike ịmata usoro isomers nwere otu ihe mejupụtara ya. Ntụnye usoro kwesịrị ekwesị nwere mmetụta nwere ike inyekwu ihe akaebe, dabere na ebumnuche na usoro.
Kedu ihe ụlọ nyocha ọzọ kwesịrị ibu ụzọ nweta? Nkọwapụta ebumnuche ikpeazụ zuru oke yana maapụ ụzọ akpọrọ nke ọma. Ndị a na-eguzobe molekul e bu n'obi na ihe ndekọ usoro pụtara tupu a kọwaa nsonaazụ nyocha.
