Azịza ngwa ngwa
peptides akpọrọ nwere ike ime ka nnwale ahụ pụta ìhè na-emeghị ka nkọwa ya dị mfe. Mgbama na-egbukepụ egbukepụ nwere ike igosipụta mmekọrịta echere, elu-akpa…
Ihe nrịbama nke akpọrọ Peptide dị mma - njikwa maka nkọwa asọmpi
peptides akpọrọ nwere ike ime ka nnwale ahụ pụta ìhè na-emeghị ka nkọwa ya dị mfe. Mgbama na-egbukepụ egbukepụ nwere ike igosipụta mmekọrịta echere, ihe jikọrọ elu, ndabere metụtara akara, ichekwa nkwadebe, ma ọ bụ ntọala nha. Ịkpọ nsonaazụ dị mma bara uru naanị mgbe ikwupụtachara nkwubi okwu kwesịrị ịkwado.
Nfefe echiche: Laboratory A na-elele fluorescence jikọtara ya na mkpụrụ ndụ mgbe ejirichara peptide akpọrọ ma kọwaa ya dị ka iwelite.. Laboratory B na-enweta onyonyo ahọpụtara yana aha mkpirisi peptide mana enweghị ike imepụtaghachi mmetụta pụtara ìhè. Ihe ndekọ dị adịghị akọwapụta saịtị mgbakwunye, ihe fọdụrụ free labelụ, akụkọ nkwadebe, ma ọ bụ ntọala nyocha ihe onyonyo.
Nke a bụ nyocha nke nkọwa nwere ike ịbụ ụgha, ọ bụghị ihe akaebe na nlebanya mbụ bụ ụgha. fluorescence metụtara cell, intracellular localization, kpọmkwem njikọ, na ndu omume bụ iche iche na-ekwu. Ntinye aka kwesịrị idobe ihe akaebe zuru oke iji nyochaa nke ọ bụla iche iche.
Ezipụta nyocha na ntụnyere nke welitere nzọrọ ahụ
Dekọọ usoro peptide zuru ezu, ọnụ ọnụ, nhazi ebe ọ dị mkpa, njirimara fluorophore, saịtị mgbakwunye, njikọ, na ezubere ịkpọ stoichiometry. Gụnye ma nkwadebe ahụ bụ ụdị akpọpụtara aha ma ọ bụ nkesa ngwaahịa. Aha agba na peptide aha njirimara abụghị nkọwa mkpụrụ ndụ zuru oke.
Nke ọkọlọtọ ProForma na-akwado nkọwa ụdị peptide a na-achịkwa, gụnyere ụdị ikpeazụ dị ugbu a 2.1. Debe nkọwa nhazi zuru oke na ihe akaebe saịtị dị mkpa na ndekọ ahụ. Ihe nrịba ama ama ama ma ọ bụ ihe mejupụtara emebibeghị adịghị ewepụta mpaghara ekwentị.
Jikọọ nkọwa molekụla na onye na-ebubata ya, otutu, vial ma ọ bụ aliquot, na ihe akaebe nyocha. Tinye ụzọ chromatographic dị mkpa, ọnọdụ nchọpụta, na nyocha nke peptide na-agbanweghị agbanwe, ezughị ezu ngwaahịa, akara n'efu, ma ọ bụ ụdị ndị ọzọ dị mkpa maka nkọwa. Ihe nchọta nke fluorescence na-achị nwere ike ọ gaghị akọwapụta akụrụngwa ọ bụla n'otu ụzọ ahụ.
Kwupụta ihe ndabere maka ma nyocha nke akpọrọ na ihe atụ ọ bụla. Nha nhata mkpokọta conjugates dị iche iche apụtaghịcha na nha nha molar. Ntinye uche nke edere na akwụkwọ ndetu kwesịrị ịdị na-achọpụta uru e kenyere na ngụkọ nkwadebe.
Cavaco na ndị ọrụ ibe ya ọmụmụ fluorophore na-akwado ịgwọ ụcha dị ka ihe nwere ike ịkpaghasị n'ime sistemu peptide na-arụ ọrụ akpụkpọ ahụ nyochara. Ọ naghị ewepụta nnabata maka nyocha a ma ọ bụ buo amụma na ịgbanwe agba ga-edozi nghọtahie nke ụlọ ọrụ.. Nyocha njirimara na nkọwa nha chọrọ nyocha nke ha.
Chekwaa ndekọ kacha nta nke ụlọ nyocha nke abụọ chọrọ
Ụdị Peptides Ihe ndekọ kacha nta gụnyere nkọwa nyocha zuru oke, nyocha nwere ọtụtụ njikọ, oke ọrụ, na akụkọ nkwadebe. Dekọọ ọkara, pH dị mkpa na ndabere ntinye uche, akpa, na-enyefe, nchekwa, oge gafere, na ndịiche ikpughe mara amara. Kaa akara na-efunahụ akụkọ ihe mere eme.
Ihe ndekọ nke ndu kwesịrị ịmata ihe nlereanya ahụ, mkpa cell ma ọ bụ sample akụkọ ihe mere eme, usoro ọgwụgwọ, njikwa, na windo nleba anya kpọmkwem. Ụlọ nyocha na-anata kwesịrị ịma ihe atụnyere, ọ bụghị naanị nke onyonyo ahọpụtara maka ngosi.
Ndekọ nha kwesịrị ichekwa data izizi, ntọala nnweta, mkpa ndabere njikwa, na usoro nyocha. Maka onyonyo, jigide usoro nhazi nke na-emetụta mgbama egosiri, gụnyere normalization, ọnụ ụzọ, nkewa, na mwepu. Onyonyo agbaziri agbaziri abụghị nnọchi maka nha n'okpuru.
Debe ngbanwe ngosi dị iche na ọnụọgụ. Ịgbatị onyonyo ọ bụla n'onwe ya na nke kacha nta na nke kachasị nwere ike ime ka akara adịghị ike na nke siri ike na-enwu n'otu aka ahụ. Ngosipụta ahọpụtara nwere ike ịkpakọrịta oghere Ntụle ọnụ ahịa Peptide nkọwa, mana otu nchapụta anya ahụ anaghị ewepụta ike nha nha. Jido ụkpụrụ ndị dị adị na mgbanwe ngosi kama ịnwa ịgbakọ ọnụọgụ n'etiti ụlọ ọrụ site na onyonyo ngosi.
Debe nkeji na ọnụọgụ nke nsonaazụ ọ bụla akọpụtara doro anya. Mgbama pụtara n'otu mpaghara, mgbaàmà kwa cell, ntakiri n'elu ọnụ ụzọ, na akara ngosi mpaghara n'ime mpaghara akọwapụtara bụ nsonaazụ dị iche iche. Ụlọ nyocha abụọ nwere ike ịmepụta nchịkọta dị iche iche site na otu ụdị nlele ma ọ bụrụ na ha ejiri nkọwa dị iche iche.
Lelee ọnụọgụgụ tupu imekọrịta ihe ngosi
Nkwekọrịta echiche echiche. Ogige abụọ nke ọ bụla nwere mkpokọta emeziri n'okirikiri 10,000 nkeji mgbaàmà. Otu nwere 100 gụnyere sel na ndị ọzọ 200. Ngụkọta ha kwenyere mgbe ego ha dị 100 na 50 nkeji kwa cell gụnyere. Nke ahụ bụ ihe dị iche na mgbakọ na mwepụ, ọ bụghị ihe akaebe nke ọdịiche ndu. Nhọrọ cell, Nkeji na mpaghara nha akọwapụtara na-ekpebi ihe denominator pụtara.
Myristoyl Hexapeptide 16 Ụzọ nha anya nwekwara ike izochi nkesa dị iche iche. A hypothetical ubi na 100 sel niile na 100 nkeji nwere otu pụtara dị ka ubi nwere mkpụrụ ndụ iri na 1,000 na iri itoolu na efu. Iberibe dị n'elu ebe ekwenyeburu ụzọ nwere ike ịdị iche nke ọma. Chekwaa nkesa ma ọ bụ nsonaazụ achọrọ maka nkwupụta ekwuputara kama ịhọrọ nchịkọta nke na-eme ka ụlọ nyocha ahụ kwenye..
Ọnụ ụzọ ziri ezi bụ nhọrọ nyocha nwere nsonaazụ. Dekọọ otu esi akọwa ya na tinye ya n'ọrụ, gụnyere ihe ewepụrụ na ọgwụgwọ ndabere. Ọ bụrụ na ndị otu nke abụọ na-eji ụzọ dị iche ma ọ bụ gụọ mpaghara dị iche iche, tulee nhọrọ ndị ahụ tupu ịkọwa esemokwu dị ka ọdịda nke nrụpụta nyocha. Agbanwela ọnụ ụzọ mgbe ịlele nsonaazụ ya naanị ka iwepụta akụkụ dị mma masịrị.
Hoofnagle na ndị ọrụ ibe jikọtara njirimara peptide, quantification, na ijikwa ndụmọdụ nyocha ha. Ihe nkuzi ndekọ n'ozuzu bụ ijikọ ihe ahụ na nha. Ọnọdụ ha dị oke-spectrometry anaghị enye ụkpụrụ onyonyo akwadoro maka ọmụmụ ihe echiche a.
Nke Ụkpụrụ ziri ezi kwado data enwere ike ịchọta na nke enwere ike iji ya na ọnọdụ ohere kwesịrị ekwesị. Aka aka bara uru na-ejikọta nza nyocha, faịlụ mbụ na ụdị nyocha. Nke ahụ Myristoyl Hexapeptide 23 nzukọ ikike nyochaa; ọ naghị akwado nkọwapụta nke ọma ma ọ bụ chọọ ka mkpughe ihe nzuzo na-enweghị njedebe. Ịmepụta Peptide Bonds
Họrọ njikwa na-ekewapụta nkọwa ndị na-asọmpi
| Ebumnuche nnwale | Nhọrọ nyocha ma ọ bụ mgbanwe | Njikwa mkpa | Gụpụta na oke |
|---|---|---|---|
| Mepụta akara n'elu ndabere | Peptide fluorescent akọwapụtara nke ọma | Ihe nlele enweghị akara, ugbo ala, yana njikwa ndabere dabara adaba akụrụngwa | Mgbama sitere na ndabere ekwuputara; Nwelitebeghị ma ọ bụ njikọ kpọmkwem |
| Nyochaa ntinye metụtara akara | Nyochaa akọwara nwere atụmatụ comparator dabara adaba | Mkpa akara akara efu na njikwa otu akụkụ ebe ọ nwere ihe ọmụma | Ihe akaebe maka usoro ndabere pụrụ iche; enweghị ihe akaebe zuru ụwa ọnụ na mgbakwunye na-anọpụ iche |
| Chọpụta njikọ dị n'elu na mpaghara intracellular | Ihe nyocha nke ejiri mara na ụdị akọwapụtara | Nlereanya dabara adaba na njikwa akara elu | Ntụle kwadoro ebe; Ọ bụghị site na mkpokọta fluorescence naanị |
| Nyochaa ọrụ ndu | Nyochaa na onye ndoro-ndoro ochichi na-enweghị akara na ntọala ego ziri ezi | Ntụle akọwapụtara nke ọma, adịghị mma, na njikwa ụgbọ ala | Nzaghachi arụ ọrụ nke onwe; fluorescence naanị ezughi oke |
| Tulee ụlọ nyocha | Nkọwa nyocha dabara na nza edepụtara | Atụmatụ ntụaka ma ọ bụ ntụnyere ekekọrịtara na nkọwapụta arụpụta ọrụ ekwekọrịtara | Nkwekọrịta n'ime ọnọdụ enyochara na oke nyocha |
Agba n'efu abụghị kemịkalụ na agba agbadoro na peptide. Njikwa agba agba na-adịghị mma nwere ike ilebara otu nkọwa a tụrụ aro anya na-egosighi na conjugate na-akpa àgwà ka peptide nke ala.. N'otu aka ahụ, fluorophore dị iche iche nwere ike ịgbanwe ma ngwa anya na ihe molekul, yabụ ngbanwe ihe eji esiji esiji abụghị mgbanwe dịpụrụ adịpụ na nchapụta.
Ekwesịrị ịhọrọ njikwa maka nkwubi okwu esemokwu. Njikwa dị mma n'ozuzu na-egosi na ngwa ahụ na-achọpụta fluorescence adịghị egosi na peptide ahụ na-ejikọta kpọmkwem ebumnuche ya ma ọ bụ rute n'akụkụ a chọrọ..
Nyochaa ọdịiche ahụ n'usoro enwere ike imepụtagharị
- Kwupụta nkwupụta mbụ ahụ nke ọma. Mgbama metụtara mkpụrụ ndụ iche iche site na nhazi mpaghara, njide, na ọrụ.
- Gwakọta ihe ahụ. Tulee usoro nyocha, nkesa akara, otutu, ndabere ego, na ihe akaebe adịghị ọcha dabara adaba.
- Dekọọ nkwadebe na ihe nlereanya akụkọ ihe mere eme. Chọpụta ndịiche nwere ike imetụta ihe ruru nha.
- Mekọrịta nnweta na nyocha. Tulee data izizi, ntọala, nkọwapụta nsonaazụ, ọnụ ụzọ, na mwepu.
- Nyochaa njikwa megide nkọwa ndị na-eduga. Kpebie echiche nke ihe akaebe dị ugbu a na-amata ọdịiche na nke chọrọ mgbakwunye ọrụ.
- Kwuo nkwubi okwu nwere oke. Kwuo ihe a hụrụ, ihe akwadoro, na nke nkọwa ka edozibeghị.
N'okwu echiche, Ebe mgbakwunye na-efu efu yana ozi labelụ na-egbochi nkwupụta obi ike na otu abụọ ahụ jiri nyocha nhata.. Ichefu onyonyo izizi na ntọala nyocha na-egbochi ntụle a pụrụ ịdabere na ya nke nsonaazụ fluorescence akọpụtara. Ọnweghị oghere ọ bụla na-egosi na nnabata emebeghị ma ọ bụ emeghị.
Ọ bụrụ na reanalysis agbanwe nkwubi okwu, chekwaa nsonaazụ izizi wee detuo nlegharị anya. Ejila nwayọ dochie onyonyo ahọpụtara ma ọ bụ kọwapụta nsonaazụ ya mgbe ị hụchara nhọrọ na-enye nkwekọrịta. Onye nyocha ọzọ kwesịrị inwe ike ịgbaso mgbanwe ahụ. Myristoyl Pentapeptide 17
Ntụle mbụ bara uru nwere ike iji otu dataset mbụ nwere ụdị nyocha abụọ ekwuputara. Ọ bụrụ na ndịiche a kọrọ na-agbanwe, nyochaa nkọwa, ihe nkpuchi, mwepu na mgbanwe tupu ikwughachi nkwadebe ndu. Ọ bụrụ na ọ na-aga n'ihu n'okpuru nyocha kwesịrị ekwesị nkekọrịta, wee nyochaa ihe, nkwadebe na ihe nlereanya iche. Echiche a agbagoro agbapụta egosighi ihe kpatara ya; ọ na-achọpụta oyi akwa edozighị adreesị ntụnyere na-esote.
Arịrịọ nnye aka lekwasịrị anya bụ: “Biko wepụta nkọwapụta molekul na nza nke nyocha ahụ, dị mkpa ntule adịghị ọcha, ọnụ ọgụgụ na ndekọ nkwadebe, faịlụ nha mbụ, njikwa, na ụdị nyocha. Chọpụta ihe akaebe na-egosi ọdịiche dị n'ihe mgbama metụtara elu site na nhazi mpaghara ma ọ bụ nkwupụta ọrụ."
Buru ụzọ kpebie ma esemokwu ahụ metụtara nleba anya nke ọma, nchịkọta nyocha ma ọ bụ nkọwa ndu. Chekwaa ihe akaebe achọrọ maka ọkwa ahụ wee kọọ ihe na-edozibeghị. Imegharị nnwale ahụ niile na-enweghị nkọwapụta nsonaazụ nwere ike iwepụta otu arụmụka ahụ na onyonyo ọhụrụ.
Ajụjụ a na-ajụkarị
Mgbama metụtara cell na-egbuke egbuke na-egosi na ọ na-ewelite ya? Mba. Mepụta ọnọdụ na adreesị dị mkpa n'elu na nkọwa ndabere site na iji ụzọ na njikwa dabara na ihe nlereanya.
Mgbama mgbama na-acha ọcha na-adịghị efu nwere ike wepụ ihe niile akara ngosi? Mba. Conjugate jikọtara nwere ike ịkpa àgwà dị iche na agba agba efu. Njikwa ahụ na-aza ajụjụ nwere oke ma ekwesịrị ịtụgharị ya n'ime oke ahụ.
Kedu ndekọ a na-achọkarị mgbe ụlọ nyocha ekwenyeghị? Usoro nyocha ahụ zuru oke na ọtụtụ ihe akaebe, ego na nkwadebe akụkọ ihe mere eme, data mbụ, ntọala nnweta, njikwa, na nkọwa nkọwa kpọmkwem bụ isi mmalite dị mkpa.
Kedu mgbe nsonaazụ izizi bụ ezigbo ụgha ekwenyela? Mgbe ihe akaebe dabara adaba na-egosi na nkọwapụta nke ọma akwadoghị ma ọ bụ kọwapụta ya site na ebe ọzọ n'okpuru ọnọdụ nwalere. Naanị inyefe na-ezughị ezu na-ebute ejighị n'aka, ọ bụghị nkwubi okwu ikpeazụ ahụ.
