Lipheo tse telele tsa Peptide - Bapisa Chemical Synthesis, Polelo ea Protheine le Litsela Tse Kopantsoeng
Khampani e Molemohali ea Peptide Peptide Karolo e thata ea peptide e telele e ka nka masala a seng makae feela. Phetoho e hlalositsoeng haufi le ntlha e le 'ngoe e ka rata karolo ea maiketsetso, athe ketane e setseng e ka fumaneha ka polelo. Sepheo se seng se ka fokotsoa ka ho mena kapa ho arohana ho e-na le hoo. Bapisa litsela tsa tlhahiso ho latela k'hemistri eo ba tlamehang ho e boloka le ts'ebetso eo ba tlamehang ho e phetha, eseng ka molao o le mong oa palo ea masala.
Papiso e rutang haholo hangata e kenyelletsa menyetla e meraro: kopano ea lik'hemik'hale tse tobileng, recombinant expression, le tsela e kopantseng e kopanyang karolo e hlahisitsoeng ho ea maiketsetso. E mong le e mong o fetisetsa mosebetsi o boima karolong e fapaneng ea morero. Bolelele ba tatelano bo bohlokoa, empa ha se phapang pakeng tsa k'hemistri le biology.
Mohlala oa masala a 120 ka tlase ke mohlala oa moralo, eseng sehlahisoa se entsoeng. Sepheo sa eona ke ho bontša hore na tatellano e hokahanya joang, lihlopha tsa bofelo ba likaroloana le ts'ebetso e itšetlehileng ka eona e fetola kopo e pharaletseng hore e be tsela e ka batlisisoang.
Hlalosa k'hemistri e ke keng ea fetoha
Ngola tatelano ka tatellano ea N-to-C 'me u khetholle termini ea ho qetela, litlhophiso tse setseng, mabitso a isotope, liphetoho, le likhokahano tsohle tse hlokahalang tsa covalent. Haeba sepheo se mennoe, bolela hore na ke thepa efe ya sebopeho kapa ya tshebetso e leng bohlokwa. Ketane ea mela e nang le boima bo nepahetseng ha se eona ntho e lakatsehang e mennoeng.
Khetholla litlhoko tse tsitsitseng ho tenyetseha e lumelletsoeng ea moralo. Motsoako oa matsoalloa o ka 'na oa hlokahala bakeng sa tlhaloso ea mochine, athe sehokedi se kantle ho sebaka se ithutoang se ka amoheleha tekong e nngwe. Liqeto tseo ke tsa moralo oa saense 'me ha lia lokela ho etsoa ka mokhoa o sa tobang ke sehlopha sa tlhahiso.
Kopano e tobileng ea lik'hemik'hale e ka beha liphetoho tse khethiloeng le li-block tsa mohaho tse sa tloaelehang, ha feela k'hemistri ea bona e lumellana le tsela. Hartrampf le basebetsi-'moho le bona ba sebetsa ka mokhoa o ikemetseng oa protheine e bonts'a phihlello ea lik'hemik'hale ho liketane tse telele tse khethiloeng. Karolo ea eona papisong ena ke ho tlosa mohopolo o bonolo oa "polelo e telele"., eseng ho bolela esale pele monyetla oa tatellano e ncha.
Expression e fana ka tsela e 'ngoe ea ho fumana karolo, empa tatellano e lokollotsoeng e bohlokoa ho feta bongata ba fusion. Ho Thuto ea SUMO-fusion ea Malakhov le basebetsi-'moho, mesaletsa hang ka mor'a hore sebaka sa cleavage se ame ts'ebetso, ho kenyelletsa mokhelo oa proline tsamaisong e lekiloeng. Leo ke lebaka le utloahalang la ho hlahloba moeli o lakatsehang ho e-na le ho nahana hore fusion leha e le efe e hlalositsoeng e tla lokolla sepheo leha e le sefe se hōlileng.
Sebelisa sefate sa qeto ea tsela se bolokang sepheo
| Node ea liqeto | Haeba e tšehetsoa | Haeba e sa tšehetsoe kapa ke sa tsitsa |
|---|---|---|
| Na polelo le leano la ts'ebetso li ka fana ka k'hemistri ea ho qetela? | Lekola polelo, ho hlaphoheloa, meedi e hodileng, le ho phutha | Nahana ka kopano ea lik'hemik'hale kapa tsela e kopantsoeng bakeng sa tšobotsi e sa fumaneheng |
| E ka tsamaisa kopano ea lik'hemik'hale ka mokhoa o hlakileng e fana ka tse arohaneng, lintho tse bonahalang? | Etsa moralo oa ho khoneha bakeng sa tatellano e feletseng le liphetoho | Hlahloba meeli ea likhechana le karolo e thata ka ho fetisisa |
| Na ho na le mateano a ligation a lumellanang ntle le phetoho e sa amoheleheng ea tatelano? | Bapisa likaroloana tsa lik'hemik'hale le likhechana tse hlahisitsoeng-plus-synthetic | Lekola hape k'hemistri ea mateano kapa tsela; u se ke ua fetola sepheo ka khutso |
| Na sekhechana ka seng se ka lokisoa ka "terminus" e hlokahalang? | Lekola ho kopanya, tlhoekiso, le liphetoho tse latelang | Kenyelletsa tokisetso ea terminus mosebetsing o ka khonehang pele o tšepisa ho fana |
| Na khokahanyo ea ho qetela le boemo bo hlophisitsoeng bo nepahetseng bo ka netefatsoa? | Hlalosa kamohelo ho potoloha litekanyo tseo le tlhahlobo e reriloeng | Theha bopaki ba tlhahlobo pele o nka papali ea bongata e le phetho |
Classical native native ligation e hloka liphetho tse nepahetseng ho balekane ka bobeli. Muir le basebetsi-'moho le bona ba hlahisitse liteko tsa protheine ligation kopanya motsoako o hlalositsoeng Peptide Product Catalog e nang le karolo ya maiketsetso. Ka hona, tlhahiso ea tsela e tlameha ho hlalosa hore na polelo e hlahisa substrate e ka sebelisoang; sekhechana se tloaelehileng se hloekisitsoeng le sekhechana se jereng sephetho se hlokahalang se sebetsang ke lintho tse ka fanoang ka tsela e fapaneng.
Tsela e kopaneng ha e bonolo ka bo eona. E ka fokotsa bolelele ba karolo e boima haholo ea maiketsetso ha e ntse e hlahisa polelo, tokiso ya reactive-terminus, ligation, le tlhoekiso e eketsehileng. Bapisa tsela eohle le bopaki ba ho qetela ho e-na le ho bala masala a entsoeng ke theknoloji ka 'ngoe.
Etsa litšepe pele u eketsa linako tsa phetoho
Ha re re, bakeng sa ho hlophisa papiso feela, karolo e hlalositsoeng e hloka matsatsi a robeli le karolo ea maiketsetso matsatsi a leshome le motso o mong ka mor'a hore meralo ka bobeli e amoheloe. Haeba mesebetsi eo e ka sebetsa ka boikemelo ka ho bapisa, ho kopanya ho ka qala kamora letsatsi la leshome le motso o mong, eseng letsatsi la leshome le metso e robong. Kenya matsatsi a mararo bakeng sa ho kopanya le a mane bakeng sa mosebetsi o hlahlobiloeng oa ho theosa le noka, mme tsela e nolofaditsweng e fihla matsatsing a leshome le metso e robedi ho feta mashome a mabedi a metso e tsheletseng.
Linako tseo tse iqapetsoeng ha se bolepi ba mofani oa thepa. Ho tšoana hoa nyamela haeba tšobotsi ea karolo e le 'ngoe e tlameha ho khetholla moralo oa e 'ngoe, kapa haeba mohloli o tšoanang o thibetsoeng o etsa mesebetsi ka bobeli. Ho sebetsa hape lekaleng le liehang ho ka boela ha tšoara tsela eohle. Botsa hore na ke mesebetsi efe e ka tsamaisanang hantle, e leng mohato oa bohlokoa o lumellang ts'ebetso e latelang le hore na ke tšobotsi efe e sa rarolloang e ka qobellang ho hlophisa bocha.
Kakaretso e khuts'oane ea tatellano e telele e nang le phetoho e hlalositsoeng
Morero oa boikaketsi. Sehlopha se hloka sepheo sa lipatlisiso sa masala a 120 se nang le phosphoserine e boletsoeng maemong 105. Tatelano e reriloeng e kenyelletsa cysteine boemong 91, ho etsa hore moeli oa 90–91 e be mokhethoa oa moralo oa khale oa ligation. Tatelano e felletseng, menahano ya sebopeho, 'me ho lumellana ha substrate ho ntse ho lokela ho hlahlojoa; sena ke mohlala oa moralo, eseng tsela e netefalitsoeng ea ho kopanya.
Kopano e tobileng ea lik'hemik'hale e ka nkoa haeba tatellano le phetoho li lumellana le tsela e sebetsang le tlhoekiso. Polelo ea sepheo se felletseng e tla hloka mokhoa o bonts'itsoeng oa ho fumana phetoho e boletsoeng le sehlahisoa se seng se holile. Tsela e kopantsoeng e ka beha phosphoserine e hlalositsoeng karolong ea maiketsetso ea C-terminal ha e ntse e fumana karolo ea N-terminal ka polelo., ha feela ho ka lokisoa termini e sebetsang e hlokahalang.
Mokhethoa cysteine ha a rarolle qeto. Likarolo li tlameha ho qhibiliha 'me li fumanehe tlas'a maemo a loketseng, mateano a tlameha ho bopeha ka nepo, 'me liphetoho life kapa life tsa morao-rao tsa ho mena kapa ho fetola li tlameha ho boloka sepheo. Moeli o bonahalang o loketse o ka hloleha ka lebaka la ho lokisoa kapa ho arohana ha likotoana.
Tsamaisa litsamaiso tsa linomoro ka bobeli ka moralo
Ka moeli o inahaneloang pakeng tsa mesaletsa 90 le 91, karolo ea N-terminal e na le 90 mesaletsa le karolo ea C-terminal e na le 30. Sepheo sa masala 105 e fetoha masalla 15 tsa Peptide ea protheine karolo ea maiketsetso hobane 105 − 91 + 1 = 15. Kopo ea phetoho e reng feela "phosphoserine 15" e fetoha e sa hlakang hang ha tatellano e kopitsoa tokomaneng e reriloeng ka botlalo..
Hlahisa sepheo se felletseng le likhokahano tsa likarolo hammoho, ho kenyelletsa masala a mateano le lihlopha tsa ho qetela. Netefatsa hore mabala a mabeli a tatellano a kopana hang, e se nang koelano kapa masalla a sieo. Boloka li-tag tse nkiloeng ka har'a li-tag le masalla a ts'ebetso kantle ho linomoro tsa sepheo sa ho qetela ntle le haeba sebopeho se amohetsoeng se li kenyelletsa ka ho hlaka.. Poelano ena e bonolo e ka thibela motsoako o nepahetseng oa karolo e sa baloeng hantle.
The cysteine e sebakeng sa sepheo 91 hape ke karolo ea molek'hule e boletsoeng. Tlhahiso e tla e tlosa kapa e e nkele sebaka ka mor'a ho kenela e hloka tlhahlobo ea mahlale haeba phetoho eo e ka fetola sehlahisoa se hlokahalang. Ka ho tšoanang, ligation ha e rarolle kabelo efe kapa efe ea morao-rao ea disulfide. Arola khokahanyo e entsoeng moeling oa sekhechana ho tsoa ho likhokahano tsa ketane ea mahlakoreng tse hlokahalang sepheong se mennweng sa ho qetela..
| Tšimo e khuts'oane | Keno e ka tlatsang | Qeto ea e nolofalletsa |
|---|---|---|
| Sebopeho sa ho qetela | [Tatelano e felletseng, palo, termini, tlhophiso, liphetoho, le lihokelo] | E khetha hore na ke litsela life tse ka hlahisang ntho e tšoanang ea molek'hule |
| Sepheo sa mahlale | [Teko, lihlopha tsa papiso, le ho hloka tlhaloso] | E hlalosa mokhoa o amohelehang oa ho fetoha le taolo ea bohlokoa |
| Meeli ea mokhethoa | [Likarolo tse reriloeng tsa likhechana le mabaka a ho li nahana] | E tsamaisa tlhahlobo ea li-termini tse sebetsang le boitšoaro ba karolo |
| Lisebelisoa tse teng | [E ahang, likaroloana, litšupiso tse ngata, le lirekoto tsa bona tsa tlhahlobo] | E arola bopaki bo teng mosebetsing bo ntseng bo hlokahala |
| Litšitiso tsa 'mele | [Ho tsebahala ho solubility, kopanelo, ho phutha, kapa mefokolo ea ho sebetsana] | E khetholla mathata a ka bang teng ts'ebetsong le tlhahlobo |
| Qetello ea thomello | [Chelete e abetsoeng, tlhabollo, aliquots, kemiso ea nako, le litokomane] | Lokisa mantsoe a qotsitsoeng tseleng ho latela boitsebiso bo amohelehang |
| Leano la ho amohela | [Phutheho, phetolo-sebaka, topology, litšila, le bopaki bo sebetsang] | E thibela phetho ho hlalosoa ke sephetho se le seng sa boima |
Bakeng sa morero o inahaneloang, tlhahiso ea pele e lokela ho ba tlhahiso ea ho khonahala e bapisoang. E lokela ho supa hore na tsela ka 'ngoe e se e ntse e ka tšehetsa eng, se tlamehang ho lekoa, le hore na ke phello efe e neng e tla fetola qeto. Tšepiso e tsitsitseng ea ho fana ka pele ho ho rarolla lipotso tsena e tla ba bopaki bo fokolang ho feta heke ea ntlafatso e hlalositsoeng hantle.
Botsa lipotso tse hlano pele u khetha le ho phahamisa tsela
- Tsela e 'ngoe le e 'ngoe e reriloeng e tla hlahisa termini ea ho qetela le phetoho joang sebakeng se boletsoeng?
- Ke karolo efe kapa ts'ebetso e lebelletsoeng ho laola tahlehelo, heterogeneity, kapa bothata ba tlhoekiso, le hore na ke bopaki bofe bo tšehetsang tebello eo?
- Ho tla joang hore ho reriloe ligation junction, selikalikoe, lekala, kapa khokahanyo ea disulfide e netefatsoe ntle le boima bo sa fetoheng?
- Ke bokae ba motheo le boemo ba sampole bo tla sebelisoa ha ho bapisoa ho hlaphoheloa le ho tsamaisoa ho pholletsa le litsela?
- Ke liphetho life tsa ho khonahala le ho pheta-pheta li tlamehang ho finyelloa pele ho eketsa sekhahla kapa ho fetisa ts'ebetso?
Bakeng sa sepheo sa ligated, bopaki bo nepahetseng bo lokela ho khetholla sehlahisoa se kopantsoeng ho tloha ho likhechana tse sa sebetsaneng le mekhoa e meng e tšepahalang. Bakeng sa phetoho e khethehileng ea sebaka, kakaretso e ka 'na ea se ke ea lekana ho fumana sebaka. Bakeng sa sepheo se menahantsoeng kapa se nang le disulfide, topology e amehang le boemo ba tšebetso li hloka tlhahlobo ea tsona.
Ho kopanya ho ka thatafatsa tlhahiso le tlhahlobo. Pholiso e bonahalang e le tlase e ka 'na ea bontša tahlehelo nakong ea kopano, poleloana, tlhoekiso, phetiso, kapa ho itokisetsa ho metha. Boloka mekhahlelo eo e arohane tlalehong ho e-na le ho beha tahlehelo e 'ngoe le e' ngoe tseleng e khethiloeng.
Sebelisa ntlha e lumellanang ha u bapisa lintlha tsa ho khoneha. Tlhahiso e le 'ngoe e ka tlaleha tlhahiso ea polelo pele e sebetsa, lik'hemik'hale tse ling tse tala, le palo e 'ngoe e hloekisitsoeng ea sepheo. Lintlha tsena li ke ke tsa beoa maemong ka kotloloho. Kopa ho leka-lekana ha lintho le bopaki bo hlokahalang ho hokahanya sephetho se seng le se seng sa mahareng ho sehlahisoa se amoheloang sa ho qetela. Peptide Product Catalog
Tlhahiso e sebetsang ea ho khoneha e lokela ho pepesa monahano oa eona o turang haholo. Bakeng sa kopano e tobileng, seo e ka 'na ea e-ba ho hlaphoheloa ha ketane e tletseng e thata. Bakeng sa polelo, e ka 'na ea e-ba ho lokolloa ha moeli o hōlileng ka ho feletseng. Bakeng sa tsela e kopaneng, e kanna ea ba ho lokisa sekhechana se sebetsang kapa karohano kamora ho kenella. Etsa boithuto bo bonyenyane ka ho fetesisa bakeng sa monahano oo pele o nka tlhaloso ea sethala e le moralo oa tlhahiso. Li-pepetides
Boloka tsela e khutlelang morao e ka bapisoa ka ho boloka liphetoho tse tšoanang, palo ea masalla le litlhoko tsa boemo ba ho qetela. Ketane e bonolo e sa fetoloang e ka ba taolo e thusang ea nts'etsopele, empa e ke ke ea sebetsa e le sebaka se lekanang sa sepheo sa lipatlisiso se nang le phosphoserine. Tlaleha hore na taolo e theha eng le hore na ke eng e setseng e tobileng ho molek'hule ea sebele.
Sekhahla le ho pheta-pheta li lokela ho latela k'hemistri e bontšitsoeng. Tokisetso e nyane e atlehileng e ts'ehetsa ho khoneha, empa phetiso e ka fetola ho kopanya, moroalo wa karohano, ts'oara linako, le ho tshwara. Ngola maemo a hlahisitseng sephetho mme u hlalose licheke tse tsepamisitsoeng bakeng sa mefuta e fetohang.
Romella lintlha tse tlatsitsoeng ho lihlopha tse khonang ho hlalosa khetho ea tsona ea litsela. Kopa mekhoa e meng ha ho hloka botsitso e le ntho e bonahalang, le ho boloka sebopeho se tšoanang sa ho qetela ho pholletsa le mekhoa e meng eo. Seo se boloka qeto e tsepame holim'a teko ho e-na le sethaleng seo mofani oa thepa a fanang ka sona.
Lipotso tse botsoang khafetsa
Na ho na le bolelele bo tsitsitseng ka holim'a polelo eo kamehla e leng molemo? Che. Liphetoho, boits'oaro ba tatellano, ho phutha, tlhoekiso, 'me chelete e hlokahalang e ka feta bolelele. Bapisa litsela tse felletseng bakeng sa sepheo se tšoanang sa ho qetela.
Na cysteine ka tsela e iketsang e etsa sebaka se setle sa ligation junction? E ka etsa hore moralo oa khale oa li-chemical ligation o hlahlojoe, empa ho lokisa sekhechana, phihlello, ho qhibiliha, 'me sebopeho sa ho qetela se ntse se tiisa ho khoneha.
Nomoro ea phetoho e ka ba e sa hlakang joang tseleng e nyalisitsoeng? Masala a na le boemo ho sepheo se feletseng le se seng ka sekhechana sa sona. Boloka likhokahano ka bobeli li bonahala; moahong wa boikgopotso, boemo ba sepheo se felletseng 105 ke fragment position 15.
Se lokelang ho nkoa e le ho fana ka katleho? Chelete eo ho lumellanoeng ka eona ea boitsebiso ba ho qetela bo boletsoeng bo nang le boitsebiso bo lekaneng, sebopeho, litšila, le bopaki bo amanang le tšebeliso. Polelo e atlehileng ea selelekela kapa boima bo lebelletsoeng bo sa fetoheng feela ke sephetho se fokolang.
