Kedu ihe na-eme Peptides Lipidated na-abụghị nke Canonical na-agbaji Echiche Synthesis Standard

"Na-abụghị nke akwụkwọ" na "lipidated" na-akọwa anyụike abụọ dị iche iche, na arịrịọ nke na-emeso ha dị ka nke a na-akọwapụtaghị tupu ọ pụọ na tebụl gị. Axis nke mbụ bụ ihe fọdụrụ na-abụghị nke akwụkwọ: ngọngọ ụlọ na-ekwekọghị n'okike ma ọ bụ mimetic na-edochi amino acid proteinogenic. Nke abụọ bụ lipid noncanonical ma ọ bụ njikọ kemistri, nke na-ekpuchi dicarboxylic-acid na-enyere aka na echiche lipid nwere ike ihichapụ yana PEG-lipid hybrids.. Ndị na-ere ahịa na-edepụta ihe ndị a dị ka menus dị iche iche, ya mere arịrịọ na-akpọ naanị "peptide noncanonical lipidated" na-ahapụ onye na-ebu ya ka ọ chepụta ha abụọ. (Peptides okike).
Mkpebi nke abụọ na-anọdụ n'okpuru nkewa ahụ: ma lipid na-aga n'ihu na resin ma ọ bụ mgbe agbajichara na ngwọta. Ibu hydrophobicity, Nchekwa-otu mgbagha na adịghị ọcha ihe ize ndụ niile mgbanwe na nhọrọ ahụ, ya mere ọ bụ na nkọwapụta ma ọ bụ na nnọchi anya nke ndị na-ebubata ya (Peptides okike).

Chemistry na-akọwa ihe kpatara mgbagwoju anya ji dị ọnụ ahịa. Njikọ usoro siri ike nke ọgbara ọhụrụ na HATU ma ọ bụ HBTU reagents ruru 99 ka 99.5 Pasent kwa-njikọ arụmọrụ, mana okirikiri ọ bụla na-agba na 3 ka 10 ugboro reagent ngafe (Peptides ndị America, 2026-06-06). N'ime ogologo usoro lipophilic, nke fọdụrụ-larịị arụmọrụ ogige n'ime ezigbo adịghị ọcha ibu. Mkpokọta on-resin bụ ọnọdụ ọdịda kachasị maka usoro hydrophobic, na-eweda nwayọ nwayọ nwayọ nwayọ na-arụ ọrụ njikọta yana ịbawanye adịghị ọcha nchapụta n'ime n-1, n-2 na n-3 usoro (Bio-Syn).
Ntugharị igodo: Kwupụta kemịkalụ ihe fọdụrụ na-abụghị nke canonical yana kemịlụ lipid/linker dị ka ihe abụọ dị iche iche chọrọ, ma kwupụta ma lipidation na-eme na resin ma ọ bụ mgbe ọ gbasasịrị.
Ihe ekwesịrị ịkọwapụta na arịrịọ Peptide Synthesis Custom

Arịrịọ njikọ peptide omenala dị mma naanị ka ubi ọ na-ebu. Hapụ otu oghere ma onye na-ere ahịa juju ya na ndabara ị na-ahọrọghị. Ala ndị a na-arịọ arịrịọ-njikọ ahaziri ahazi ga-ebu bụ usoro N- ruo-C zuru ezu, ihe fọrọ nke nta ka ọ bụla na-abụghị nke akwụkwọ akụkọ aha ya na stereochemistry (D-ụdị, N-methyl, β-amino acid), njirimara egbugbere ọnụ, ihe mgbakwunye, njikọ ma ọ bụ conjugation chemistry, ebumnuche ịdị ọcha, ọnụ ọgụgụ, na analytical deliverables (Bachem; Thermo Fisher Sayensị).

|
Mpaghara nkọwapụta |
Ihe mere o ji dị mkpa |
Kedu ihe nkwụsị na-efu |
|---|---|---|
|
Usoro N- ruo-C |
Na-akọwapụta ebumnuche sịntetik |
Onye na-ere ahịa na-anọchi usoro ihe fọdụrụ na ndabara |
|
Ihe fọdụrụ na-abụghị nke akwụkwọ akụkọ, na stereochemistry |
D-ụdị na N-methyl mgbanwe njikọ kinetics |
Ịgba ọsọ ma ọ bụ ụgbọ mmiri isomer na-ezighi ezi |
|
Njirimara egbugbere ọnụ |
C12 vs C18:1 na-agbanwe solubility na njikwa |
Klas lipid ezighi ezi, ejighi otutu |
|
Ebe mgbakwunye |
N-okwu, Lys e-amin, Cys aka, ma ọ bụ ihe fọdụrụ index |
Ala lipid na saịtị na-ezighi ezi |
|
Linker/conjugation chemistry |
Amide, ester, thioster, ọzọ, disulfide na-akpa àgwà dị iche iche |
Njikọ na-adịghị akwụsi ike, akaghi aka cleavage |
|
Ọrụ Ebumnuche ịdị ọcha |
Peptide Synthesis Na-akwalite oge nchacha na ọnụ ahịa |
N'okpuru- ma ọ bụ ọkwa nke akọwapụtara n'elu |
|
Ọnụ ọgụgụ na aliquoting |
Na-edozi nhazi na atụmatụ nkwakọ ngwaahịa |
Ihe ezughi oke maka ikwugharị |
|
Analytical anapụta |
Na-akọwa ngwungwu data ntọhapụ |
Enweghị ihe akaebe maka nza |
Kemịkalụ egbugbere ọnụ na klaasị lipid, onye mmekọ njikọ na-enyekarị span amide, ester, thioster, ọzọ, na njikọ disulfide, na mgbakwunye na N-terminus, Lys e-amin, aka Cys, ma ọ bụ ihe fọdụrụ nwere hydroxyl, na onye nnọchi anya panel nke lauric C12, ihe omimi C14, palmitic C16, stearic C18, nke C18:1, na sterols dị ka cholesterol (Peptides okike).
Ogige abụọ kwesịrị ọnụọgụ doro anya karịa nsoro ị tụrụ anya ka onye na-ere ahịa tụgharịrị. A na-edepụta akara ala dị ọcha ngwa: n'elu 95% maka NMR, crystallography, receptor-ligand, na nyocha asọmpi; 90 ka 95% maka mmepụta monoclonal-antibody na ọnụọgụ ELISA ma ọ bụ RIA; n'elu 80% maka na-abụghị quntitative Western blotting, n'ime mkpokọta 80% ka 97% band maka ọrụ na-abụghị GMP (Bachem bipụtara ntụzịaka ịdị ọcha nke ngwa). Rịba ama isi iyi: nke a bụ ibe ndị na-ere ahịa na-ere ọkwa dị elu, ya mere na-emeso ala dị ka ebe mmalite, ọ bụghị ihe atụ na-anọpụ iche.
Ọnụ ọgụgụ na-agbaso otu echiche ahụ. Ọnụ ọgụgụ na ihe na-enye ihe dị iche iche nke onye na-ere ihe na-emepụta omenala na-ebipụta sitere na 5 mg na 100 g, na aliquoting si 0.5 mg kwa vial na ± 2% izi ezi na ọkọlọtọ QC nke HPLC gbakwunyere MALDI-MS (Bachem). Otu onye na-ere ahịa, otu mkpali: kwadoro panel ntọhapụ nke ịchọrọ n'ezie tupu ịnakwere ndabara.
Otu mkpebi ụzọ bụ ederede. Kwuo ma etinyere lipid na resin ma ọ bụ mgbe ọ gbajiri, ma ọ bụ nyefee nhọrọ ahụ n'ụzọ doro anya karịa site na ịhapụ. Inyefe mkpebi ụzọ n'ụzọ doro anya kama ịwepu bụ ihe na-eme ka onye na-ere ahịa ghara ịkwalite maka ụzọ njikọ ha dị ọnụ ala karịa nyocha gị..
Maka ndụmọdụ: Tapawa tebụl a n'ime arịrịọ gị wee rịọ onye na-ere ahịa ka ọ kwado ma ọ bụ tie ahịrị ọ bụla. Ọkụ n'edere ede bụ echiche edepụtara; ịgbachi nkịtị abụghị.
[nseta ihuenyo: Ụdị usoro nhazi ahaziri ahazi nke akọwapụtara na mpaghara nkọwapụta]
Otu esi enyocha egbugbere ọnụ saịtị akọwapụtara yana ebe ọgbaghara na-esi

Ọha na-akwadoghị mejupụtara, ọ bụghị ọnọdụ. Mgbanwe oke a na-ahụ anya na-agwa gị conjugate kpụrụ na ihe ruru ole lipid agbakwunyere; ọ dịghị, n'onwe ya, dozie kpọmkwem saịtị, nkesa zuru ezu, ma ọ bụ obere isomers ọnọdụ ọnọdụ. Nhazi obodo na-achọkarị ọkwa peptide ma ọ bụ ọkwa nke subunit site na LC-MS/MS ma ọ bụ ụzọ ndị metụtara ya. (Okike Proteomics, Nyocha Mass na-emebibeghị maka nkwenye nkwenye, 2026-03-12). Otu ahịrịokwu ahụ bụ ihe niile kpatara nnwale nyocha nke saịtị kpọmkwem ji sie ike karịa ka ọ dị: nza abụọ nwere ike kekọrịta oke ma dị iche na ebe lipid nọ ọdụ.
Iwu ịrị elu maka data enweghị oke na-esote oke ahụ. MALDI-TOF ezuru maka nlele ee / mba na-achịkọta ọnụ dị ọcha. Gbanwee na ESI-MS ma ọ bụ LC-MS mgbe ụdị na-agbakọta, otutu obibi steeti, ma ọ bụ envelopu gbasapụrụ agbasa na-apụta, ma na-emeso ubube nke envelopu ndị nwere oghere chiri anya dị ka ihe mgbaàmà nke ọtụtụ saịtị ma ọ bụ ntinye akwụkwọ karịa nsogbu ịdị ọcha. (Okike Proteomics, 2026-03-12).
Ngwungwu ihe akaebe nke akụkụ anọ maka egbugbere ọnụ saịtị akọwapụtara bụ njikọ nke ụkpụrụ ndị a dị elu karịa otu isi mmalite e hotara.: kpọmkwem saịtị kpọmkwem na imewe, egwuregwu LC-MS ma ọ bụ HRMS na-emebibeghị, digest gbakwunyere maapụ saịtị LC-MS/MS na-egosi lipid na iberibe echere, yana ihe akaebe na saịtị ndị ọzọ anọghị ma ọ bụ n'okpuru tere aka ziri ezi.
Ebe Ụzọ nyocha Orthogonal na-ebelata ihe mgbagwoju anya na nyocha mbụ
Ajụjụ ziri ezi abụghị nke otu nyocha kacha mma, mana ụzọ ụzọ abụọ na-ekpuchi ebe kpuru ìsì nke ọzọ. Nkọwa orthogonal, ọ bụghị otu nyocha, bụ ihe na-ebuli obi ike mgbe peptide lipidated nwere ike ịbụ ọtụtụ ụmụ irighiri ihe dị iche iche.
Uka spectrometry nwere mkpebi dị elu na-ekenye nhazi elementrị na ion precursor tupu ikewa., nke dị mkpa mgbe ụdị isobaric na-ekekọrịta oke ọnụ. NMR na-anọgide na-eguzobe n'azụ mgbe MS enweghị ike ikewapụta isomeric ma ọ bụ regioisomeric ambiguity.. Ntụle C18 na C4 selectivity na-agbakwụnye akụkụ nke abụọ nke nkewa, ebe ọ bụ na usoro abụọ ahụ guzoro na-edozi ụdị dị iche iche nwere ike ịdị iche iche. Were ya dị ka ntuziaka usoro kama ịbụ nhụta akwadoro: enweghị ike imeghe akwụkwọ mmalite n'oge ọsọ a.
Ịkọ akụkọ adịghị ọcha bụ ihe ọmụma karịa otu nọmba ịdị ọcha. Nzọụkwụ lipidation na-emepụta acylation na-ezughị ezu, over-acylation, isomers ọnọdụ na ụdị ndị nwere njikọ chiri anya, na ndị na-ebubata ngwaahịa ndị na-akọpụta usoro dị iche iche n'otu n'otu bụ ndị dị iche n'ụdị, usoro-dabara, ma ọ bụ ntụnyere- dabara, na-eso mgbakọ ICH Q3A/Q3B (Peptides okike). Maka njirimara nke lipopeptide, jụọ klaasị adịghị ọcha nke akwụkwọ ahụ nwere ike ịkpọ aha.
|
Usoro |
Ihe ọ na-egosi |
Ihe ọ na-apụghị igosi |
Na-abawanye mgbe |
|---|---|---|---|
|
Uka na-adịghị mma |
Arọ molekụla dabara n'ọrụ a tụrụ anya ya |
Ebe lipid na-anọdụ ala, ma ọ bụ na isomers na-ebikọ ọnụ |
Mass dakọtara mana ọrụ ma ọ bụ ndogide bụ ihe a na-atụghị anya ya |
|
LC-MS/MS mgbe mgbarichara |
Usoro na saịtị mgbanwe na iberibe hụrụ |
Enwetabeghị mgbanwe na iberibe |
Oghere mkpuchi na-ahapụ ihe fọdụrụ n'ime lipid na-adịghị ahụ anya |
|
HRMS |
Ngwakọta elementrị na ion precursor tupu MS/MS |
Isomeric ma ọ bụ regioisomeric iche |
Ụdị isobaric dị njikere |
|
NMR |
Ọrụ nhazi ebe MS enweghị ike idozi isomers |
Ntọhapụ oge a na-eme n'ọkwa |
Data MS enweghị mgbagwoju anya na njikọta |
|
Orthogonal RP-HPLC (C18 vs. C4) |
Ọdịiche nkewa na mgbanwe hydrophobicity |
njirimara nhazi zuru oke |
Otu usoro na-egosi otu ọnụ ọgụgụ kacha elu, nke ọzọ adịghị |
Ịtọlite ụkpụrụ nnabata dabere n'ihe ize ndụ maka otutu egbugbere ọnụ
Ekwesịrị iwulite njirisi mwepụta maka nza lipided site na ihe a ga-eme na-esote, Ọ bụghị site na ebumnuche ịdị ọcha e depụtaghachiri na ibe katalọgụ. N'ihi na ọtụtụ n'oge nyocha ojiji, njirisi nnabata gafere ọnụọgụ dị ọcha bụ njirimara nke ụdị lipidated nke ọma, Ọdịnaya peptide amaara nke a tụrụ site na nyocha ọnụọgụ dị ka nyocha amino acid, ụdị nnu doro anya na njirimara mgbagha na ọnụọgụ ya, na ihe dị n'ime mmiri ekpughere. Enweghị ndị ahụ, oke ị na-atụle gụnyere ihe na-abụghị peptide.
Ọ bụ ya mere ahịrị nyocha ahụ ji bụrụ ihe onye na-ere ahịa na-ehota ihe dị iche iche: net peptide net sitere na AAA ma ọ bụ CHN, mmiri na acid ọdịnaya, ọdịnaya counterion, ESI-MS/MS na ule endotoxin bụ nke a na-akọ akụkọ ọ bụla na ọnụ ahịa nke ọ bụla n'onwe ya. Ọkọlọtọ Thermo Fisher omenala-peptide QC na-egosi otu ọkwa: MS gbakwunyere HPLC maka peptides ọkọlọtọ, MS gbakwunyere HPLC nyocha yana AAA maka peptides dị arọ, nwere ihe a na-ebuga dị ka nnu TFA lyophilized ma ọ bụrụ na achọrọghị ụdị ọzọ. Ha abụọ bụ ibe ndị na-ere ahịa nwere ihe mkpali ire tinye-ons, ya mere were ha dika menu, ọ bụghị benchmark.
Usoro maka ịhọrọ oke bụ Usoro nnabata ICH Q6A, dị irè 1 Mee 2000, nke na-ekwu ka esi edobe njirisi nnabata na usoro ule na ezi omume. Na omume nke a bụ ntọala nkọwapụta dabara adaba na nkeji: Usoro ihe egwu QbD nke na-esetịpụ mgbanwe maka ihe egwu ngwaahịa karịa otu iwu ọnụọgụ.
⚠️ Ịdọ aka ná ntị: CoA nwere ọtụtụ ihe na-ejikọta nsonaazụ na otu batch, na-ebu nọmba nza, usoro, HPLC ịdị ọcha, njirimara MS, nkọwa usoro na chromatogram ma ọ bụ ụdịdị dị iche iche, na-enwekarị ọdịnaya peptide net, ule ụbọchị na laabu. Mpempe akwụkwọ nkọwapụta “nke a na-ahụkarị” enweghị ihe ọ bụla. Ọ bụrụ na akwụkwọ anaghị akpọ nza gị aha, ọ bụghị wepụta ihe akaebe maka ihe gị.
Mmejọ ndị a na-emekarị nke na-eme ka ọrụ Peptide Lipidated na-abụghị nke canonical
Ọdịda kachasị ọnụ na usoro ọrụ a abụghị ọdịda njikọ. Ha bụ nkọwapụta na ọdịda ntọhapụ: nza ahụ na-emezu ihe ekwuru na ya ma enweghị ike ịkwado nnwale ahụ e nyere ya iwu. Edere ndudue ọ bụla n'okpuru dị ka nleba anya, yabụ ị nwere ike lelee arịrịọ nke gị megide ya tupu onye na-ere ere amalite.
Na-emeso oke emebibeghị dị ka ihe akaebe nke nhọrọ saịtị. Ọha na-akwadoghị mejupụtara, ọ bụghị ọnọdụ. Nza nke jikọtara ọnụ nke ka na-ada ada bụ ikpe ochie: lipid dị, arọ molekụla ziri ezi, na mgbanwe na-anọdụ na-ezighị ezi fọdụrụnụ, ya mere nza na-agafe ntọhapụ ma daa na nyocha ahụ. Jụọ ihe akaebe na-akọwapụta lipid, ọ bụghị ihe akaebe na-atụ ya.
Na-akọ otu nọmba ịdị ọcha. Ọnụọgụ ịdị ọcha nke na-ezobe isomers ọnọdụ yana ụdị acylated karịrị akarị na-agwa gị na ọnụ ọgụgụ kachasị elu dị ukwuu., ọ bụghị na ọ bụ molekul ziri ezi. Ịdị ọcha na nhọrọ saịtị bụ nha dị iche iche, na ọnụ ọgụgụ dị elu dị ọcha nwere ike ibikọ ọnụ na ngwaahịa dị iche iche.
Ịhapụ mkpebi ụzọ n'ekwughị okwu. Mkpebi ụzọ a na-ekwupụtaghị nke onye na-ere ahịa na-ekpebi maka mkpụrụ bụ nnyefe n'ime nkịtị nke njikwa profaịlụ adịghị ọcha gị. Kwupụta ma lipidation na-eme na resin ma ọ bụ n'oge mkpochapụ, ma kwuo ụdị ụdị ị chọrọ ekpochapụ.
Wepụ stereochemistry maka ihe ndị na-abụghị nke akwụkwọ akụkọ. Stereochemistry hapụrụ na arịrịọ ahụ na-eme ka diatereomer nke ịchọrọ ka enweghị ike ịchọpụta na nnata., n'ihi na ọ dịghị ihe dị na nkọwapụta dị iche na nke ị nwetara.
Ịnabata CoA na-ejikọtaghị na nza. Enweghị ike ịchọta CoA nke na-ejikọtaghị na nza na ihe dị na friza gị, nke na-ewepụ ikike ị nyocha ma emechaa.
Ọdịda na-achịkọta mkpokọta na-egosi ụkpụrụ a na-amata: elu ma ọ bụ gbawara agbawa HPLC, Otu uka na otutu oge njigide, adịghị ọcha nke siri ike ikewa nso onye agbata obi, mgbanwe ogbe-na-ogbe, na insoluble crude mgbe cleavage (Bio-Syn, gụọ 2026). Ndị a bụ heuristics nchọpụta nsogbu ndị na-ere ahịa karịa ọnụego ọdịda ebipụtara, mana ha bụ mbinye aka ọdịda ọdịda nke usoro lipophilic na kwesịrị ịlele megide chromatogram ọ bụla ị nwetara..
|
Mmejọ |
Ihe mere o ji eme |
Ihe ndozi ahụ |
|---|---|---|
|
Ọnụ ọgụgụ na-adịghị mma dị ka ihe akaebe nke nhọrọ saịtị |
Mass bụ nha kachasị mfe iji kọọ akụkọ ma yie nke ọma |
Chọrọ ihe akaebe nke mpaghara, ọ bụghị naanị mejupụtara |
|
Otu nọmba ịdị ọcha maka ihe niile |
Ịdị ọcha bụ metrik ntọhapụ amaara |
Kpesa ịdị ọcha yana nhọrọ saịtị dị ka nsonaazụ dị iche |
|
Mkpebi ụzọ hapụrụ onye na-ere ya |
Arịrịọ ahụ anaghị ekwu ihe kacha mkpa adịghị ọcha |
Ezipụta on-resin ma ọ bụ mgbe mkpochapụ, na umu imechi |
|
Stereochemistry akọwapụtaghị ya |
A na-eche na ihe fọdụrụ na-abụghị nke akwụkwọ nsọ enweghị mgbagwoju anya |
Kwupụta diastereomer na usoro na-egosi ọdịiche ya |
|
CoA anaghị agbakọ ọnụ |
A na-ewere akwụkwọ dị ka usoro iwu |
Jụọ CoA ọ bụla na-eme ya Peptides sịntetik ghara ịmata nza |
Ihe ịga nke ọma dị ka yana otu esi agụ ngwugwu data
Nza emechara abụghị ọnụọgụ dị ọcha. Ọ bụ ngwugwu ihe akaebe nke akụkụ anọ maka egbugbere ọnụ saịtị akọwapụtara: akwụkwọ nyocha nke ejikọtara na batch ahụ akọwapụtara, uka emebibeghị nke dabara conjugate a na-atụ anya ya, nkewa-na-LC-MS/MS maapụ nke na-edobe egbugbere ọnụ n'iberibe ebu n'obi na saịtị ndị ọzọ na-anọghị ma ọ bụ n'okpuru ebe ekwuputara., na mkpughe nke ọdịnaya peptide net, njirimara counterion na ọdịnaya mmiri. Akụkụ ikpeazụ ahụ bụ ihe CoA jikọtara ya na ya. Enweghị ya, onye na-agụ na-anabata echiche banyere njirisi nnabata karịrị ọnụọgụ dị ọcha.
Gụọ ngwugwu ahụ n'usoro. Identity mbụ, n'ihi na otu egwuregwu naanị enweghị ike ịkọwa mgbanwe. Nkewa saịtị nke abụọ, n'ihi na ọ bụ naanị mmewere na-amata ọdịiche dị n'etiti isomer ọnọdụ ọnọdụ na ihe ọzọ dabara adaba. Ọdịnaya na mgbochi nke atọ, n'ihi na ha na-ekpebi ole ihe dị n'ezie na vial.
Maka nza mbụ nke ihe owuwu ọhụrụ, na-emeso njirimara orthogonal, ọ bụghị otu nyocha, dị ka ụkpụrụ ọrụ: mee nkewa orthogonal dị ka C18 megide C4, ma tinye NMR backstop ebe ihe owuwu ahụ kwadoro ya. Ụlọ ahịa Ozugbo egosiri nkwekọ n'ọtụtụ-na nza, panel nke na-emekarị nwere ike iburu ntọhapụ. Rịba ama na ntụzịaka orthogonal-panel dabere na nkwenye akụkụ, ya mere were ya dị ka nzọụkwụ mbelata ihe ize ndụ karịa usoro iwu kwadoro.
Ntugharị igodo: Mkpebi mwepụta kwesịrị ịgbaso usoro akọwapụtara: ịdị ọcha na njirimara zutere, wee zute eserese saịtị, emesia ekpughere ọdịnaya na mgbochi. Alaka nke na-ada ụzọ maka mmụba na nyocha, ọ bụghị akpaka ịjụ. Ihe gbasara
Ihe atụ nke usoro: usoro nyocha nke na-akwado mkpesa jikọtara ọnụ yana enwere ike iji dobe maapụ mgbari, ọdịnaya na data mgbagha n'otu ndekọ ntọhapụ na-enyere ndị nyocha aka ịchọpụta nzọrọ nke ọ bụla azụ na nza ọ sitere. MOL mgbanwe na-arụ ọrụ na oghere a dị ka onye mmekọ peptide synthesis omenala.
Ajụjụ a na-ajụkarị
Ogologo oge ole ka njikọ peptide na-abụghị nke omenala na-ewe?
Mee atụmatụ ogologo oge karịa usoro iheomume peptide ọkọlọtọ. A na-ehotakarị usoro peptide omenala n'ihe dị ka izu abụọ ma ọ bụ atọ maka nnyefe, na usoro ntọala ahụ na-ewere ihe ndị a na-eme kwa ụbọchị yana nchacha nke ọma. Chemistry lipidation, inweta ihe fọdụrụ na-abụghị nke iwu, na mgbakwunye chromatographic mgbake a yinye hydrophobic na-achọ onye ọ bụla wepụrụ usoro ihe omume ahụ. Jụọ onye na-ebubata gị maka usoro ihe omume dị mkpa nke na-ekewa njikọ, lipidation, na ime ka ọ dị ọcha, ya mere a na-ahụ anya n'otu ọkwa tupu ọ ghọọ igbu oge nnyefe.
Oke adịghị emebi emebi zuru oke iji kwado lipidation akọwapụtara saịtị?
Mba. Ọnụ ọgụgụ na-adịghị emebi emebi na-agwa gị mkpokọta ịdị arọ nke ihe nrụpụta ahụ, ọ bụghị ebe lipid na-anọdụ ala. Otu nza nke jikọtara ọnụ ka nwere ike iburu agbụ ahụ na ihe fọdụrụ na-ezighi ezi, na isomer ọnọdụ ahụ ga-akpa àgwà dị iche iche na njide ma ọ bụ nkwụsi ike nyocha. Na-emeso oke adịghị emebi emebi dị ka ọnụ ụzọ ntọhapụ maka naanị njirimara, wee gbasaa ruo maapụ ọkwa peptide mgbe saịtị ahụ dị mkpa. Iwu escalation kwụ ọtọ: MALDI-TOF zuru oke maka nlele oke ngwa ngwa, mana nkwenye lipidation kpọmkwem saịtị chọrọ ESI ma ọ bụ LC-MS nwere nkewa, n'ihi na naanị tandem nnwale localizes mgbanwe.
Gịnị ma ọ bụrụ na uka dakọtara mana nkewa mgbari adịghị?
Nke ahụ bụ ọnọdụ ọnọdụ-isomer, na a naghị ewepụta nza ahụ maka ọrụ nwere mmetụta saịtị. Rịọ data nkewa ọkwa peptide tupu ịnara ya, ma tụnyere nkewa C18 na C4 n'akụkụ n'akụkụ, ebe ọ bụ na kemịkalụ abụọ ahụ na-edozi ụdị lipopeptide dị iche iche. Ọ bụrụ na ambiguity isomeric na-adịgide mgbe nkewa orthogonal gasịrị, tụlee NMR iji wepụta mgbanwe ahụ ozugbo. Mmepụta Peptide
Ọkwa ịdị ọcha dị elu ọ nọchiri ihe akaebe nhọrọ saịtị?
Mba. Ịdị ọcha na njirimara saịtị bụ njirimara orthogonal. Otu nọmba ịdị ọcha, ọbụna otu kọrọ na 98%, nwere ike zoo ndị isomers ọnọdụ na ụdị acylated karịrị akarị nke na-ejikọta ya na ebumnuche. Rịọ maka chromatogram na data eserese n'azụ nọmba, ọ bụghị naanị pasentị.
Kedu ihe m ga-eme ma ọ bụrụ na peptide lipidated na-ejikọta ụdị mkpọnwụ?
Gbanwee nkewa ahụ karịa oke nnabata. Usoro gbajiri agbaji nke enweghị akụkụ nke yinye lipid nwere ike soro ngwaahịa ahụ zuru oke na gradient C18., ya mere, usoro nke na-edozi ha bụ ihe ngwọta bara uru. Gbalịa gradient na-emighị emi ma ọ bụ usoro nkwụsị dị iche, ma gosi site na oke ọnụ ọgụgụ ndị edoziri tupu ị hapụ nza ahụ.
Mmechi
Ị nwere ngwa ọrụ atọ ugbu a maka peptides lipidated na-abụghị akwụkwọ: ndepụta nkọwapụta nke na-amanye arịrịọ ikwupụta ihe fọdụrụnụ, lipid, na kemịkalụ mgbakwunye; matrix nkwenye nke na-ekewa ihe usoro ọ bụla na-egosi na ihe ọ na-apụghị; na njirisi nnabata nke dabere na ihe egwu na-eme ka ihe akaebe na-esi na ya pụta na-ezighi ezi. Omume kachasị ọnụ ahịa ijikọta ha ọnụ dị mfe: ekwela ka emebibeghị oke naanị ka ọ guzoro maka nhọrọ saịtị. Otu uka dakọtara, Nza dị oke ọcha ka nwere ike iburu lipid na ihe fọdụrụ na-ezighi ezi.
Ọ bụrụ na ịchọrọ ịgụ nke abụọ na ihe nrụpụta tupu ị banye n'ụzọ, Rịọ nyocha ihe nrụpụta na anyị ga-eso gị soro nkọwapụta na nnabata nnabata.
Mgbanwe MOL na-arụ ọrụ na ndị otu nyocha na nhazi peptide omenala na njirimara, ya mere, anyị nwere mmasị azụmahịa na ụkpụrụ àgwà peptide. Usoro ọrụ dị n'elu na-eguzo n'onwe ya n'agbanyeghị onye na-eweta ya.
