ペプチド修飾
FRETペプチド
FRETペプチドとは?
FRETペプチド標識にはドナー分子とアクセプター分子があります (破裂剤) 分子. ほとんどの場合, ドナーとアクセプターのペアは 2 つの異なる色素です. アクセプターが非蛍光色素の場合 (破裂剤), 蛍光ドナーから伝達されたエネルギーは分子振動に変換されます。. FRETが終了したとき (ドナーとアクセプターを分離することで), ドナー蛍光の増加を検出できる. ドナー色素とアクセプター色素の両方が蛍光性である場合, 伝達されたエネルギーはより長い波長の光として放出されます, ドナーとアクセプターの蛍光強度比の変化を測定できるようにする. 効率的なFRETバーストのために, 蛍光色素分子と破裂剤分子は互いに近接していなければなりません (~10~100Å) そして、破裂剤の吸収スペクトルは発蛍光団の発光スペクトルと重なる必要があります。. ドナー-破裂剤 FRET システムを設計する場合は、ドナーの蛍光スペクトルと破裂剤の吸収スペクトルを注意深く比較する必要があります。.
FRETペプチド科学
FRETペプチドの主な利点:
·酵素反応とタンパク質活性のリアルタイムモニタリング.
·独自の近接ベースのエネルギー伝達による非常に高い検出感度.
·in vitroおよびin vivoアプリケーション向けの多用途性, 複雑な生物学的プロセスへの洞察を提供する.
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蛍光色素
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クエンチャー
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元ドナー
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アブズ |
DNP 2,4-ジニトロフェニル |
320 nm/420nm |
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アブズ |
DNP 2,4-ジニトロフェニル |
320 nm/420nm |
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マカ |
DNP 2,4-ジニトロフェニル |
325 nm/392nm |
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トリップ |
DNP 2,4-ジニトロフェニル |
280 nm/360nm |
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ファム |
ダブシル4-([4'-ジメチルアミノ)フェニル]できる)ベンゾイル |
492 nm/517nm |
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ルシファーイエロー |
ダブシル4(ジメチルアミノ)アゾベンゼン-4'-スルホニル |
430nm/520nm |
注目の引用文献
プロテアーゼ活性の超高感度腫瘍貫通ナノセンサー
内因性バイオマーカーを使用してがん病変を特定できる能力は、現時点では直径約 1 cm の腫瘍に限定されています。. 私たちは最近、体外から投与された腫瘍貫通型ナノセンサーが脱落することを報告しました。, 腫瘍特異的プロテアーゼに応答して, 尿中で検出できるペプチド断片. ここ, 最適化を報告します, 薬物動態の数学的モデルによって情報を得る, ペプチド基質の表面提示を調整して、オンターゲットプロテアーゼ切断を強化し、オフターゲット切断を最小限に抑えます。, 腫瘍微小環境の活性化を高めるために活発な輸送経路に関与する腫瘍貫通リガンドによるナノセンサーの機能化について. 結果として得られたナノセンサーは、ヒト上皮腫瘍の 5 mm 未満の病変を識別し、直径の中央値が 5 mm 未満の小結節を検出しました。 2 卵巣がんの同所性モデルにおける mm. また、結腸直腸肝転移の免疫担当モデルにおける尿中のシグナル生成の受容体依存性の特異性が強化されていることも実証します。, 蛍光ザイモグラフィープローブとして再設計された場合の、ヒト腫瘍マイクロアレイのナノセンサーの in situ 活性化.
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