Modificações do peptídeo C-Terminal revelam papéis diretos e indiretos da colesterilação do morfogênio Hedgehog

Ouriço (Ahhh) morfogênios estão envolvidos no desenvolvimento embrionário e na biologia das células-tronco e, se mal regulamentado, pode contribuir para o câncer. Uma importante modificação pós-tradução com profundo impacto na biofunção do Hh é a sua colesterilação C-terminal durante a biossíntese. A hipótese atual é que a porção colesterol é um fator decisivo na associação do Hh com o folheto externo da membrana plasmática das células produtoras, multimerização Hh de superfície celular, e seu transporte e sinalização. Ainda, não está decidido se a porção colesterol está diretamente envolvida em todos esses processos, porque sua interdependência funcional levanta a possibilidade alternativa de que o colesterol inicie diretamente os processos iniciais e que esses processos possam então orientar os estágios posteriores da sinalização de Hh, independentemente do lipídio. Geramos variantes do peptídeo Hh C-terminal e observamos que esses peptídeos colesterolados prejudicaram variavelmente vários processos pós-traducionais na produção de células e na biofunção de Hh no desenvolvimento de olhos e asas de Drosophila melanogaster. Descobrimos também que quantidades substanciais de Hh separadas de marcadores peptídicos colesterolizados in vitro e in vivo e que variantes de Hh marcadas e não marcadas sem suas porções C-colesterol permaneceram bioativas. Nossa abordagem confirma, portanto, que a colesterilação de Hh é essencial durante as etapas iniciais da produção e maturação de Hh, mas também sugere que é dispensável para a recepção do sinal de Hh nas células receptoras..