Пептидное соединение согласно USP 795 и 797: Документация

Какая глава USP регулирует ваш пептид?

Синтез пептидов Решение об объеме зависит от того, должен ли готовый препарат быть стерильным в момент введения, а не от того, является ли исходный материал пептидом., биологический, или маленькая молекула.

Общая глава Фармакопеи США <795> для нестерильного приготовления применяется, когда препарат не должен быть стерильным при введении: большинство пероральных жидкостей, сухие порошковые наполнители, актуальные решения, и лиофилизированные исследовательские материалы, используемые исключительно для работы in vitro.. Общая глава Фармакопеи США <797> для стерильного приготовления применяется, когда препарат должен быть свободен от жизнеспособных микроорганизмов и соответствовать пределам содержания эндотоксинов в месте введения — инъекционные препараты, офтальмология, интратекальные препараты, и любой маршрут, где загрязнение создает прямой риск для безопасности пациентов или животных..

Практическое значение для закупок заключается в том, что маршрут и форма должны указываться в заказе на поставку, а не вытекать из последовательности.. Поставщик, который не спрашивает о предполагаемом использовании перед выставлением цены, не может предоставить пакет документации по конкретной главе., поскольку требования существенно различаются в разных строках таблицы выше.. Письменное документирование этого разговора защитит обе стороны при последующей проверке лота..

Документация, удостоверяющая личность: Что на самом деле означает «подтверждено» для пользовательских последовательностей

В соответствии с логикой начисления процентов согласно Фармакопее США, подтверждение личности категорически отличается от оценки чистоты. Идентичность отвечает на категоричный вопрос — правильная ли это молекула?? - хотя чистота отвечает количественному вопросу - сколько правильной молекулы присутствует? Ссылка только на данные ВЭЖХ в качестве доказательства идентичности является ошибкой документации, которую инспекторы, обученные стандартам составления рецептур, будут отмечать как обычное дело..

Масс-спектрометрия как первичное доказательство идентичности

Для индивидуальных и модифицированных пептидов, ESI-MS или MALDI-TOF — общепринятый основной метод подтверждения личности.. Критерием приемлемости стандартных пользовательских последовательностей для приборов с единичным разрешением является соблюдение [М+Ч]⁺ или многозарядный [М+nH]Ион ⁿ⁺ в пределах ±0,5 Да от теоретической моноизотопной массы. Для данных ESI-MS высокого разрешения, критерий ужесточается до ��2 ppm.

Счетная палата должна сообщить о трех пунктах, ни один: теоретическая масса, наблюдаемая масса, и измеренная дельта. Заявление о прохождении без подтверждающего числового контекста не воспроизводится и не поддается проверке группой контроля качества принимающей лаборатории..

Для меченных изотопами или обогащенных дейтерием пептидов, используемых в качестве внутренних стандартов., требуются две дополнительные точки данных: форма изотопной оболочки должна соответствовать теоретическому распределению изотопов для заявленного уровня обогащения, и Δмасса относительно немеченого аналога должна находиться в пределах ожидаемого окна.. Заявление об обогащении, не подтвержденное анализом оболочки, не может быть подтверждено только по молекулярной массе..

Для ПЭГилированных, сшитый степлером, или макроциклические пептиды, молекулярная масса которых превышает надежный диапазон MALDI-TOF или где оболочки заряда являются диффузными., ЖХ-МС со спектральной деконволюцией или подтверждение фрагмента иона МС/МС должно быть указано в ссылке на аналитический метод в Сертификате счетов.. Если стандартная платформа поставщика не может учесть молекулярную сложность, это информация, которая нужна покупателю до начала синтеза, а не после выдачи сертификата подлинности..

Хроматографическое подтверждение идентичности

ОФ-ВЭЖХ действует как ортогональный, подтверждающий метод — не основной. Воспроизводимость времени хранения для разных партий, измерено в идентичной колонке, подвижная фаза, и градиентные условия, подтверждает, что материал имеет ожидаемый профиль гидрофобности и удерживания.. Это особенно полезно для обнаружения эпимеризации., где замена D-остатка может привести к образованию соединения с правильной молекулярной массой, но с измененным поведением удерживания.

В Счетной палате должно быть указано: время удерживания основного пика, Стационарная фаза и размеры колонки, размер частиц, состав подвижной фазы (как водные, так и органические компоненты), градиентная программа, скорость потока, температура колонки, если она контролируется, и длина волны обнаружения. Время удерживания без контекста метода не может быть воспроизведено и, следовательно, не имеет подтверждающей ценности..

Форма противоиона обеспечивает систематический эффект, который редко раскрывается без вопросов.. Пептиды, высвобождаемые из Fmoc SPPS с остаточным противоионом TFA, абсорбируются при 214 нм и может давать завышенный процент чистоты за счет нормализации площади относительно того же пептида, что и ацетатная соль.. Если партия будет использоваться в клеточных анализах, где остаточная ТЖК является цитотоксичной, План действий должен явно подтвердить обмен противоионов и указать окончательную форму соли.. Эта деталь относится к MFR и CoA., не в цепочке электронных писем после получения.

Стандарты чистоты и требования CoA для модифицированных пептидов

Определение критериев приемки до начала синтеза

Наиболее предотвратимым источником отклонения партии при закупке пептидов по индивидуальному заказу является спецификация чистоты, которая не была согласована до начала синтеза.. Для стандартных партий исследовательского уровня, Чистота ≥95% по данным нормализации площади ОФ-ВЭЖХ является широко применяемым порогом приемлемости.. Для материала, предназначенного для стерильного приготовления или использования с возможностью IND., Чистота ≥98% по данным ВЭЖХ является типичным для отрасли ожиданием., хотя применимая спецификация должна быть задокументирована в соглашении о качестве, а не предполагалась. Это типичные отраслевые практические ориентиры., не предусмотренные главой числовые ограничения, что делает их четкое документирование в спецификации заказа на поставку еще более важным..

Полная спецификация чистоты перед синтезом для комплексно модифицированного пептида должна определять: (1) минимальная чистота основного пика по данным ОФ-ВЭЖХ, (2) максимально допустимые уровни для наиболее вероятных продуктов разложения — дезаминирование, окисленные виды в Met или Trp, Продукты гидролиза связи Asp-Pro, последовательности удаления — (3) предел эндотоксина в ЕС/мг, если соединение будет разработано для стерильного использования., и (4) форма противоиона. Запишите их перед заказом, чтобы превратить предпочтения покупателя в обязательное соглашение о качестве.. Их установление после поставки превращает разочарование покупателя в переговорную позицию поставщика..

Что должен содержать соответствующий CoA

Сертификат счета, который не включает следующие поля, не может служить полной квалификационной записью в соответствии с логикой документации по рецептуре сложных процентов Фармакопеи США.:

CoA, в котором отсутствует какое-либо поле в этой таблице, является неполным для целей документации на уровне начисления процентов.. Соответствующим действием является запрос недостающих данных перед приемкой партии, а не аннотирование пробела в записи о приеме и продолжение работы..

⚠️ Внимание: Принятие неполного плана счетов и документирование пробелов в вашей записи IMA не устраняет пробел для целей аудита.. Это создает отслеживаемое подтверждение того, что стандарт входящего материала был сознательно не соблюден..

Условия хранения, Знакомства за пределами использования, и данные о стабильности, стоящие за ними

Датирование за пределами использования — одна из наиболее часто неправильно понимаемых концепций в интерфейсе поставщик-покупатель.. BUD не имеет срока годности. Срок годности назначается оригинальным производителем в соответствии с исследованиями стабильности, отвечающими требованиям ICH Q1A, и отражает подтвержденный срок годности.. BUD рассчитывается на основе даты или времени приготовления и отражает, как долго ожидается, что препарат будет сохранять свой состав при определенных условиях хранения., как консервативно установлено составителем рецептуры (АШП, Руководство для фармацевтов по назначению даты прекращения использования).

Регулирующее правило назначения BUD: БАД должен быть ранее предела по умолчанию, основанного на стерильности, и любого более короткого предела, налагаемого истечением срока годности компонента., дата повторного тестирования ингредиента, или документально подтвержденное заключение о стабильности. Условия хранения не расширяют BUD за пределы количества ингредиентов — они определяют, какая категория BUD по умолчанию применяется, когда не существует ограничений, ограничивающих количество компонентов..

Для нестерильных препаратов под <795>, значения по умолчанию при отсутствии подтверждающих данных о стабильности:: водные растворы, 14 дней при контролируемой холодной температуре; неводные жидкости и твердые составы, 6 месяцы. Для лиофилизированных пептидных порошков, с которыми обращаются как с нестерильным сырьем., 6-месячный замороженный бутон можно защитить только в том случае, если контейнер запечатан., высушенный, в инертной атмосфере, и выдерживается непрерывно при температуре -20°C или ниже.. Циклическое замораживание-оттаивание сбрасывает подверженность риску и должно вызвать документированную переоценку..

Для стерильных препаратов под <797>, расширенный БУД (за пределы 12-часовой комнатной температуры или 24-часовой температуры в холодильнике по умолчанию для категории 1 поставщики услуг связи) требуются документированные данные о стабильности фактического состава в реальной системе закрытия контейнера в реальных условиях хранения. (Общая глава Фармакопеи США <797> Часто задаваемые вопросы, 2023). Поставщик, указывающий 30-дневный BUD для стерильного раствора пептида без ссылки на исследование стабильности, присваивает номер, не научно подтвержденная дата.

Уязвимости, специфичные для пептидов, имеющие отношение к решениям о хранении и BUD, включают: окисление в Мет, Цис, и остатки Trp в аэробных условиях; Гидролиз Asp-Pro в кислых условиях и при температуре выше контролируемой комнатной температуры.; агрегация в гидрофобных или дисульфидсодержащих последовательностях при циклическом замораживании-оттаивании; и рацемизация определенных остатков при длительном охлаждении. Эти уязвимости должны быть указаны в техническом досье поставщика (а не предполагается покупателем), поскольку они напрямую влияют на то, какие условия хранения являются подходящими и насколько консервативно следует устанавливать BUD..

Требования к маркировке, которые выдерживают проверку

Минимальное содержание этикетки составного стерильного препарата указано в Общей главе USP. <797>: названия и количества или концентрации всех активных ингредиентов, БУД (как дата, или час и дата, если применяется 4-часовое административное окно), условия хранения, личность составителя, и четкое указание на то, что препарат составлен. Когда препарат распределяется, а не вводится напрямую, на этикетке также должен быть указан период времени, в течение которого должно начаться введение..

Для индивидуальных исследовательских пептидов, метка должна дополнительно содержать идентификатор последовательности или сокращенный код модификации.. Это особенно важно для вариантов библиотек., изотопно-меченные аналоги, или варианты степени ПЭГилирования, когда визуальный осмотр не дает оснований для различения.. Этикетка с надписью «Пептид А», 5 мг/мл», когда четыре структурно родственных пептида находятся на хранении, не готов к проверке для регулируемой исследовательской среды..

Для сухих пептидных порошков, выпускаемых в качестве нестерильного сырья под <795>, содержание этикетки, необходимое для приемки входящего материала, является практическим стандартом.: номер лота, последовательность, масса или мольное количество, результат чистоты (или номер сертификата подлинности), форма противоиона, температура и условия хранения, и дата повторного тестирования или BUD. QR-код, связанный с цифровым сертификатом подлинности, является передовой практикой: он уменьшает ошибки транскрипции и ускоряет проверку IMA, хотя это не является требованием главы..

Пять аналитических записей, которые должен предоставить каждый поставщик стерильных смесей

Для стерильных пептидных материалов, пять категорий записей создают надежную цепочку доказательств от исходного ингредиента до выпущенной партии. Каждый из них выполняет определенную функцию системы качества.. Коллективно, они отвечают на вопрос, который должен задать аудитор: правильно ли сделан этот лот, квалифицированными людьми, в контролируемой среде, и выпущено на основе полных данных?

1. Мастер-формула рекорда (МФР). MFR является постоянной процедурой: каждый ингредиент по названию и сорту, количества, идентификация оборудования, пошаговая процедура синтеза и обработки, критерии приемки в процессе, и контрольно-пропускные пункты контроля качества. Для индивидуальных пептидов, MFR зависит от синтеза — он относится к содержанию смолы, параметры цикла сцепления, условия расщепления, и метод очистки. Это эталонная базовая линия, относительно которой оценивается любое отклонение.. Отклонение без MFR не имеет контекста.

2. Сложная запись (ЧР) / Пакетная запись. В CR документируется, что на самом деле произошло с конкретной партией.: личность и дата оператора, фактические количества и использованные инструменты, идентификация оборудования, условия окружающей среды на момент приготовления, отклонения от ПМР и их диспозиция, и проверка как оператора, так и второго лица. CR отличается от MFR — он зависит от партии., не зависит от процедуры. У лота только с MFR и без CR нет записей об исполнении.

3. Записи об обучении и компетентности персонала. USP <797> требует документально подтвержденной компетентности всего персонала, участвующего в стерильном приготовлении рецептур, включая взятие проб из кончиков пальцев и большого пальца в перчатках, квалификация медиазаполнения, отбор проб поверхности, умение одеваться и убираться, и ежегодная или периодическая переквалификация (Рекомендации ASHP по приготовлению стерильных препаратов, 2014). Сертификаты об окончании обучения необходимы, но недостаточны: требуются документированные результаты оценки компетентности..

4. Журнал экологического мониторинга. Классификация чистых помещений является единоразовой сертификацией.; журнал мониторинга окружающей среды является постоянным свидетельством того, что условия, входящие в эту классификацию, сохраняются.. Журнал должен включать действительные результаты отбора проб воздуха и проб с поверхности., количество нежизнеспособных частиц, показания перепада давления, данные о температуре и влажности, пределы действий для каждого места мониторинга, и документированные корректирующие действия для каждого превышения. Журнал, показывающий результаты без ограничений на действия, не может быть оценен.; журнал, в котором показаны только данные о нежизнеспособных частицах без эффективного мониторинга, является неполным для <797> согласие. Уровень поставщика система управления поставщиками сырья и стерилизации предоставляет одну модель того, как экологический мониторинг связан с решениями о выпуске партии..

5. Аналитические релизы. Это исходные данные, лежащие в основе CoA.: полная хроматограмма ВЭЖХ с таблицей интегрирования, полный спектр МС с деконволюцией, где это применимо, отчет об анализе эндотоксина LAL, включая стандартную кривую метода, и отчет об испытаниях на стерильность, в которых партия была составлена ​​в стерильных условиях.. Записи о выпуске должны храниться в доступной для извлечения форме в течение минимального периода, определенного применимым стандартом качества — обычно не менее 3 лет на материал исследовательского уровня. Квалифицированный поставщик должен иметь возможность предоставить эти записи по запросу, не требуя формального аудиторского заявления..

Распространенные пробелы в документации, из-за которых не проходят проверки

Недостатки, которые наиболее предсказуемо появляются в обзорах документации поставщиков пептидов, не являются сложными или необычными.. Это стандартные пробелы, которые системы качества, ориентированные на процесс, регулярно устраняют, а поставщики, занимающиеся документацией, никогда не закрывают их без внешнего давления.. О

БАД назначен без данных о стабильности. 30-дневный или 90-дневный BUD для стерильного препарата, который не ссылается на исследования стабильности, является неподтвержденным числом.. Инспекторы запрашивают подтверждающие данные в качестве первого запроса.; «стандартная отраслевая практика» не является приемлемой ссылкой, и «то же самое соединение, использованное где-либо еще» не является данными о стабильности вашего препарата..

В CoA отсутствует ссылка на метод или спецификация столбца.. Сообщаемая чистота ВЭЖХ 98.5% не может быть независимо проверено без метода. Колонка стационарной фазы, размеры, размер частиц, подвижная фаза, градиент, скорость потока, температура, и длина волны должны быть указаны в Сертификате счетов или в справочном документе по методу, на который ссылается Сертификат счетов.. Если столбец изменился между лотами, этот факт должен быть документально подтвержден.

Предел эндотоксина не указан. Для стерильных материалов, в СоА должен быть указан предел приемки (например, <1 ЕС/мг или <0.5 ЕС/мг, в зависимости от приложения), вариант метода ЛАЛ, и реальный результат. Результат, сообщенный без установленного предела, лишает команду контроля качества возможности оценить, соответствует ли партия соответствующему критерию, что является неудовлетворительным условием аудита., независимо от числового значения.

Отсутствие документации по корректирующим действиям в отношении экологических превышений.. Журнал экологического мониторинга, в котором показано превышение пределов действий без записи последующих корректирующих действий, указывает либо на то, что расследование не проводилось, либо на то, что оно не было задокументировано.. Оба проблематичны. Следователи рассматривают это как системный провал качества, а не как ошибку в ведении учета..

Идентичность подтверждена только хроматографией. Время удерживания ВЭЖХ может подтвердить идентичность, но не может подтвердить ее для пользовательских последовательностей.. Зашифрованные последовательности, рацемизированные остатки, и аналоги делеции могут совместно элюироваться в стандартных условиях ОФ-ВЭЖХ при ожидаемом времени удерживания.. Данные МС — единственный метод, который обеспечивает однозначное подтверждение молекулярной идентичности индивидуальных последовательностей.; его отсутствие в CoA является пробелом в документации, удостоверяющей личность., это не вопрос чистоты.

Согласование документации поставщика с вашей внутренней системой управления качеством

Приведенные выше требования к документации полезны только в том случае, если они четко соответствуют вашей внутренней системе управления качеством.. Наиболее распространенной причиной неисправности является не отсутствие записей о поставщиках, а несоответствие формата.. Сертификаты подлинности с нестандартными метками полей, пакетные записи в собственных форматах, или аналитические отчеты со ссылками на внутренние коды методов без внешнего перевода создают трудности при приемке входящего материала и продлевают сроки проверки для каждой партии..

Решением является соглашение о качестве, заключенное до первого заказа на поставку., не в ответ на отказ от первой партии. В соглашении о качестве пептидных материалов должно быть указано:: точные поля, необходимые в CoA, формат и соглашения об именах для пакетных записей, сроки предоставления исходных аналитических данных по запросу, процесс сообщения об отклонениях после поставки, и обязательства по хранению записей. Однажды на месте, он преобразует ваши требования к СМК в обязательные результаты поставок поставщика, а не в пункты переговоров после получения.

Три элемента не подлежат обсуждению в любом соглашении о качестве., независимо от марки материала или объема заказа: CoA для конкретной партии с полными ссылками на методы (не шаблон с вставленным номером партии), необработанные данные прибора доступны по запросу в пределах определенного окна, и письменный процесс раскрытия отклонений с указанием сроков уведомления.. Их установление до начала синтеза устраняет большинство последующих споров о качестве, которые отнимают время проекта..

Для исследовательских групп, создающих или проверяющих программу квалификации поставщиков., практический подход к обеспечение непрерывности поставок пептидов перед исследованием начинается со структуры соглашения о качестве, не с первым пересмотром плана счетов. СОП по приемке входящего материала не может функционировать как фильтр качества, если он применяется только после того, как материалы уже произведены в соответствии с несогласованным стандартом..

Для модифицированных или сложных индивидуальных последовательностей — ПЭГилированные пептиды., циклические леса, внутренние стандарты, меченные изотопами — выбор аналитического метода для подтверждения идентичности и чистоты требует обсуждения перед синтезом, не после выпуска партии. The MOL меняет платформу синтеза пептидов предоставляет сертификаты подлинности для конкретных партий в качестве стандартного результата, с хроматограммами ВЭЖХ, МС-спектры, и отчеты о LAL эндотоксинов доступны по запросу в рамках процесса документации по качеству стерильного материала.. Исследовательские группы, которым необходимо подтвердить полный пакет документации перед принятием решения о партии, могут запросить проверку данных по конкретной партии перед размещением заказа..

Если ваши требования к входящей документации по пептидам еще не полностью определены, или если вы управляете переходом от предыдущего поставщика с другим стандартом документации, первый практический шаг — это техническая беседа перед заказом. Свяжитесь с MOL Синтез изменений и команда контроля качества для согласования требований к полям плана счетов, спецификации аналитического метода, и формат пакетной записи до начала синтеза — значительно быстрее установить это согласование в письменной форме до того, как партия будет создана, чем пересматривать ее после.