Часто задаваемые вопросы

Просто в комплекс от миллиграммов до килограммов

Индивидуальный запрос цен


How to store peptides?

Лиофилизированные пептиды

Для длительного хранения пептидов, мы рекомендуем хранить их в виде твердого порошка. Лиофилизированные пептиды можно хранить при температуре -20°C или ниже с минимальной деградацией.. Клиентам рекомендуется каждый раз повторно проверять индивидуальные пептиды. 2 лет с даты выпуска контроля качества.

Пептиды в растворе

Пептиды в растворе менее стабильны и склонны к деградации.. Водные растворы, используемые для растворения пептидов, должны быть стерильными и чистыми..

В решении, определенное количество пептида может быть разложено, в зависимости от аминокислот, присутствующих в последовательности. Некоторые примеры перечислены ниже:
– Пептиды, содержащие метионин, Остатки цистеина или триптофана должны иметь ограниченное время хранения в растворе из-за окисления.. Эти пептиды следует растворять в бескислородном растворителе.. –
Глутамин и аспарагин могут быть деамидированы до глутаминовой кислоты и аспарагиновой кислоты., соответственно. –
Цистеин может подвергаться окислительной циклизации с образованием дисульфидной связи цистеин-цистеин. (которые могут образовываться внутри или между дисульфидными связями). –
Заряженные остатки (аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, лизин, аргинин, гистидин) гигроскопичны (впитывание воды из воздуха) и имеют тенденцию образовывать вязкую, прозрачное масло. Это физическое изменение может не повлиять на природу пептида.. Рекомендуется лиофилизировать такие пептиды для удаления следовых количеств воды., затем дегазируют азотом, чтобы убедиться в отсутствии водяного пара во флаконе., а потом быстро закрыли.

Для предотвращения повреждений от многократного замораживания и оттаивания., мы рекомендуем пользователям растворять только то количество пептида, которое необходимо для текущего эксперимента.. Избыток раствора следует хранить при температуре ≥ -20 o C до тех пор, пока это не понадобится.

Избегайте влаги.
Поскольку влага существенно снижает долговременную стабильность пептидов, мы рекомендуем уравновешивать пептиды в эксикаторе до комнатной температуры перед открытием флаконов.. После завершения дозирования пептида, оставшиеся пептиды в пробирке следует осторожно продуть безводным азотом., тогда контейнер следует закрыть крышкой, заклеен герметизирующей пленкой, и хранить при -20°C.

Как растворить пептиды?

Характеристики растворимости различных пептидов значительно различаются.. Остатки, такие как аланин (Ала), цистеин (Цис), изолейцин (С), лейцин (Лея), метионин (Встретились), фенилаланин (Пхе), и валин (Вал) повысить гидрофобность и растворимость пептида в водных растворах, и клиенту рекомендуется следовать этим рекомендациям при настройке пептидов..

Свойства растворимости

Растворимость пептидов во многом зависит от аминокислотной последовательности.. Естественно гидрофобные пептиды (А, Ф, Г, В, л, я, М, Вт, P с более высокой склонностью) требуют органических растворителей для растворения. Кислые пептиды (более высокая склонность к D, E в пептидной последовательности) требуют основных водных буферов для солюбилизации, в то время как основные пептиды (более высокая склонность к K, ЧАС, и Р) требуют кислых водных буферов для солюбилизации.

Выбор растворителя

Учитывая ограничения вашего анализа, мы рекомендуем использовать следующие рекомендации, чтобы определить лучший растворитель для солюбилизации пептидов.

Гидрофобные пептиды

Для повторной солюбилизации гидрофобных пептидов, добавлять 100 мкл ДМСО и обрабатывать ультразвуком до образования однородного раствора. Следующий, добавьте буфер по вашему выбору, чтобы сделать 1 раствор мг/мл (чем выше концентрация пептида, тем большее количество ДМСО требуется).

гидрофильный (Кислый) Пептиды

Для повторной солюбилизации кислых пептидов, добавлять 100 мкл 1% Нью-Хэмпшир 4 ой, чтобы 1 мг пептида и вортекс. Как только решение станет ясным, добавьте буфер по вашему выбору, чтобы сделать 1 раствор мг/мл.

гидрофильный (Базовый) Пептиды

Для восстановления основного пептида, добавить дистиллированную воду в 1 мг пептида и вортекс.

В чем разница между чистым и общим весом пептида??

Отраслевым стандартом является доставка пептидов в лиофилизированной форме в виде массы брутто.. Общий вес пептида представляет собой общую массу всех компонентов, присутствующих в лиофилизированном порошке.. Сюда входит интересующий пептид, любые пептидные примеси, вода, остаточные растворители, и противоион.

Напротив Сеть вес пептида, рассчитано на основе Чистое содержание пептидов, это вес только пептид компонент, присутствующий в лиофилизированном порошке. Это обеспечивает более точную концентрацию последующих растворов пептидов.. Следовательно, мы рекомендовали чистые количества пептидов для Пользовательский пептид заказы.

Чистое содержание пептидов измерение осуществляется с помощью аминокислотного анализа (ААА; ограниченная точность, но требует небольшого количества материала) или элементный анализ (Китай; требует миллиграммов пептида, но является более точным). Оба метода дают процентное значение (то есть., 75% чистое содержание пептидов).

Чистое содержание пептидов зависит от количества присутствующего противоиона*, который зависит от последовательности пептида. По сути, тем выше заряд пептида, чем ниже содержание пептида

*Примечание: Элемент, используемый для расчета чистого содержания пептидов, основан на пептидном противоионе.. Это делается для того, чтобы противоион не вносил вклад в количество содержания пептида.. Например, когда ТФУ или ацетат являются противоионом, используется азот, поскольку он содержится в пептиде, но не в TFA или ацетате.. Углерод или азот можно использовать, когда хлорид является противоионом по той же причине..

Расчеты чистой массы пептидов:

Чистое количество пептидов (общий пептид) — метод, который мы используем для чистых индивидуальных заказов на пептиды.

Умножьте процент чистого содержания пептидов (десятичная форма) по массе пептида брутто, чтобы получить количество чистого количества пептидов (общий пептид).

Например:
Для 5 мг валового пептида/флакон:
Чистое содержание пептидов 84%.
Точное количество общего пептида = 0.84*5 мг = 4,2 мг общего пептида

Чистое количество интересующего пептида — наиболее точное — клиент может использовать этот метод самостоятельно для расчета интересующего пептида.

Умножьте процентное содержание чистого пептида на общий вес пептида., и чистота пептидов (методом ВЭЖХ), чтобы рассчитать точное количество интересующего вас пептида. Чистый процент пептидов (десятичная форма) умножается на чистоту пептида (десятичная форма).

Например:
Для 5 мг валового пептида/флакон с:
Чистое содержание пептидов 84%.
Точное количество интересующего пептида равно = 0.84*0.96*5 мг=4,03 мг

Какую химию вы используете?

В MOL Changes используется твердофазная химия Fmoc, а не химия BOC.. Химия Fmoc позволяет удалять защитные группы в мягких условиях во время элонгации пептида., в то время как химия BOC требует использования сильной кислоты для удаления защитных групп во время элонгации пептида.. Кроме того, В химии Fmoc используется трифторуксусная кислота. (ТФА) удалить пептид из смолы, в то время как в химии BOC используется плавиковая кислота (ВЧ). ВЧ бесцветен, очень коррозионный, и контактный яд.

Поэтому, В MOL Changes используется химия Fmoc, поскольку она более мягкая., гибкий, и универсален по сравнению с химией BOC.

Как рассчитать молярность моего пептида?

Молярность относится к молярной концентрации раствора., которое представляет собой количество молей растворенного вещества, растворенного в 1 литр раствора, выражается в моль/л, или М.

Молярность [М] = Масса / (Объем x молярная масса); Моль = Концентрация (г/л) х объем (л)/МВт (г/моль)

Пример:
Данный: 1мг сухого пептидного порошка с молекулярной массой: 20КДа (Молярная масса пептида 20 г/моль)
Определить молярность при известной массе и известном объеме
Для 1 мл раствора этого пептида:
Молярность = Масса (0.001г) / (объем (0.001л) x Молярная масса (МВт 20,000) = 50 мкМ

Определить массу для достижения определенной молярности:
Если для вашего анализа, вам понадобится 0,01 мМ рабочего раствора пептида в 1 мл воды., затем рассчитайте необходимую массу следующим образом:

Масса = Молярность х Объем х Молярная масса
Масса = 0,01 мм х (1/1000 л) х 20 000 г/моль = 0,0002 г

Следовательно, вам понадобится 0,2 мг/мл пептида, чтобы получить рабочий раствор 0,01 мМ..

В какой форме доставляются пептиды?

Мы поставляем лиофилизированный или сырой порошок и раствор пептидов..

Как узнать, будет ли мой пептид растворимым??

Растворимость пептида в данном растворителе зависит от аминокислотной последовательности и ее часто трудно предсказать.. В случае каталожных пептидов, информация о растворимости указана в таблице контроля качества.. Для индивидуальных пептидов, пожалуйста, посмотрите раздел под названием “Как мне следует растворить мой пептид?”.

В чем разница между содержанием пептидов и чистотой пептидов?

Содержание пептидов не является показателем чистоты пептида, поскольку это два отдельных измерения.. Чистота определяется аналитической ВЭЖХ и указывает на наличие/отсутствие других пептидных примесей. (то есть. укороченные пептиды).

Чистое содержание пептида определяет фактическое количество пептида. (представляющий интерес пептид, а также пептидные примеси) присутствует в образце. Чистое содержание пептидов традиционно измеряется с помощью аминокислотного анализа. (ААА; ограниченная точность, но требует небольшого количества материала) или элементный анализ (Китай; требует миллиграммов пептида, но является более точным).

Как вы обычно очищаете свои пептиды??

Пептиды MOL Changes обычно очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой., с использованием 2 буферы, содержащие 0.1% трифторуксусная кислота (ТФА). Первый буфер (Буфер А) состоит из 0.1 % TFA в деионизированной воде и втором буфере (Буфер Б) состоит из 0.1 % ТФУ в ацетонитриле (АКС).

В целом, сырые пептиды сначала растворяют в растворе буфера А, некоторое количество буфера B, или органический полярный растворитель, такой как ДМСО.. Если использовался органический полярный растворитель или буфер B., этот прозрачный раствор сначала будет разбавлен буфером А.. Следующий, пептидный раствор фильтруют и загружают в систему препаративной ВЭЖХ.. Использование оптимизированного метода градиента, затем фракции собираются на основе показаний поглощения.. Затем каждая фракция анализируется с помощью аналитической ВЭЖХ, чтобы убедиться, что чистота каждой фракции соответствует требуемой спецификации чистоты..

Эти «чистые» фракции затем объединяют и лиофилизируют.. Затем «чистый» порошок проверяется на чистоту и идентичность, чтобы убедиться, что был произведен правильный пептид..

Окончательно, независимая группа контроля качества в AnaSpec снова тестирует пептид, чтобы убедиться, что все атрибуты тестирования соответствуют требуемым спецификациям..

Как мне записать концы моей пептидной последовательности??

Международная номенклатура, используемая для концов последовательности, следующая::

– N-конец: H означает свободный амин (NH2-), Ac означает ацетил [CH3C(О)-НХ-], Pyr означает пироглутаминовую кислоту.
– C-терминал: OH означает свободную кислоту (-COOH), NH2 означает амид [-КОНН2]

– Модификации боковой цепи аминокислот указаны в скобках после соответствующей аминокислоты.. Например; фосфорилированный серин = S(PO3H2) или эпсилон-N-ацетилированный лизин = K(переменный ток)

Что такое пептидный противоион?

Во время производства пептидов, ионы в растворах для синтеза и очистки связываются с заряженными боковыми цепями аминокислот пептида., образующие соли. Эти ионы известны как пептидные противоионы и помогают сбалансировать заряд пептида..

Трифторуксусная кислота (ТФА) обычно используется в синтезе и очистке пептидов.

Образует трифторацетатные соли с основными аминокислотами. (например, лизин, аргинин, гистидин) и свободный N-концевой амин. Поэтому, трифторацетат обычно является противоионом по умолчанию..

Минимальное количество молекул TFA, связанных с пептидом, пропорционально количеству основных остатков в данной пептидной последовательности.. Таким образом, чем больше основных остатков присутствует в пептиде, тем ниже чистое содержание пептидов в лиофилизированном порошке. Для учета содержания TFA или воды в образце., мы рекомендуем выполнить анализ содержания пептидов для каждого индивидуального пептида.

Вода и трифторуксусная кислота (ТФА) являются побочными продуктами процесса очистки. Однако, TFA может вызвать опасения по поводу токсичности живой и доклинические исследования. Поэтому, MOL Changes предлагает нетоксичный ацетат, хлористый, или обменники солей аммония.

hy – пептиды, содержащие Cys, Встретились, или Trp трудно синтезировать?

Пептиды, содержащие Цис, Встретились, или Trp сложно синтезировать и получать продукты высокой чистоты.. В основном это связано с нестабильностью и склонностью к окислению этих функциональных групп.. При использовании и хранении этих пептидов требуется особое внимание, чтобы избежать повторного вскрытия флаконов..

Мы пропустили ваш вопрос?? Напишите нам и мы будем
вернуться внутрь 24 часы.