Sửa đổi peptide
Thử nghiệm peptide
Vai trò của xét nghiệm peptide
Thử nghiệm peptide xác định độ tinh khiết, trọng lượng phân tử, tính đúng đắn của trình tự, và sự hiện diện của tạp chất của peptide. Điều này rất quan trọng cho các thí nghiệm nghiên cứu khoa học, phát triển thuốc và ứng dụng lâm sàng vì: peptide có độ tinh khiết cao (ví dụ. >95%) có thể giảm nhiễu thực nghiệm và cải thiện độ tin cậy của dữ liệu. Các peptide tạp chất có thể ảnh hưởng đến hoạt động sinh học hoặc thậm chí gây ra phản ứng miễn dịch (ví dụ. tạp chất trong thuốc có thể gây dị ứng hoặc ngộ độc).
Các xét nghiệm thường được sử dụng:
HPLC (Sắc ký lỏng hiệu năng cao): phân tích độ tinh khiết peptide và thành phần tạp chất.
khối phổ (bệnh đa xơ cứng): Xác định trọng lượng phân tử và xác minh độ chính xác của trình tự.
Phân tích axit amin (AAA): xác định định lượng thành phần axit amin của peptide.
Xác minh hoạt động sinh học và chức năng của peptide
Đảm bảo sự ổn định của thuốc thử peptide
Đảm bảo tuân thủ vô trùng và nội độc tố
Thử nghiệm peptide thông thường
Nó chủ yếu bao gồm độ tinh khiết của peptide; thử nghiệm nội dung; kiểm tra vô trùng; Giá trị PH; kiểm tra độ ẩm; kiểm tra độ hòa tan và các khía cạnh khác.
vô trùng
Phương pháp cấy trực tiếp: cấy vào cả hai môi trường, ủ cho 14 ngày và quan sát sự phát triển của vi sinh vật.
Phương pháp lọc màng: Dung dịch được đưa qua màng lọc vô trùng (kích thước lỗ chân lông 0.22 mm), vi sinh vật bị mắc kẹt trên màng, được chuyển sang môi trường nuôi cấy để ủ.
Phát quang sinh học ATP: Phát hiện ATP được tạo ra bởi quá trình trao đổi chất của vi sinh vật, nhanh (giờ) nhưng yêu cầu xác nhận.
độ tinh khiết
RP-HPLC: Dựa trên sự khác biệt về tính kỵ nước của các peptide, tách trên cột C18/C8 và phát hiện bằng UV hoặc MS.
bệnh đa xơ cứng: Xác định trọng lượng phân tử peptit (MALDI-TOF hoặc ESI-MS), xác minh sự phù hợp với các giá trị lý thuyết và phát hiện các sửa đổi hoặc tạp chất.
Nguyên lý phân tích axit amin: sau khi thủy phân axit peptit, định lượng thành phần từng axit amin và kiểm tra độ tinh khiết bằng cách so sánh với giá trị lý thuyết.
TRANG SDS: Tách bằng điện di và quan sát các dải đơn bằng phương pháp nhuộm Caulmer Brilliant Blue hoặc Silver.
nội dung
Phân tích nguyên tố: Bằng cách phân hủy các quy trình vật lý phức tạp thành nhiều “siêu quy trình” nhỏ, mỗi “siêu quy trình” tuân theo cùng một luật, vấn đề được đơn giản hóa bằng cách phân tích các “siêu quy trình” này và áp dụng các phương pháp toán học cần thiết.
Bảo toàn khối lượng: Trong bất kỳ phản ứng vật lý hoặc hóa học nào, tổng khối lượng các chất tham gia phản ứng bằng tổng khối lượng các sản phẩm sau phản ứng.
Chuẩn hóa vùng:Đây là một phương pháp được định nghĩa về mặt toán học là chuyển đổi giá trị tuyệt đối của một hệ vật lý thành mối quan hệ giá trị tương đối. Thông qua bình thường hóa, các phép tính có thể được đơn giản hóa và giá trị có thể được giảm đi một cách hiệu quả.
Thử nghiệm peptide
Nhận báo giá thử nghiệm peptide để theo dõi chính xác tính khả thi của quy trình thử nghiệm của bạn.
