Se etsang hore li-peptide tsa Noncanonical Lipidated Li senye Likakanyo tse Tloaelehileng tsa Synthesis

"Noncanonical" le "lipidated" li hlalosa lilepe tse peli tse arohaneng tsa moralo, 'me kopo e ba tšoarang joalo ka ha e hlalositsoe ka tlase pele e tloha tafoleng ea hau. Axis ea pele ke masala a sa tloaelehang: moaho oo e seng oa tlhaho kapa oa ho etsisa o nkang sebaka sa proteinogenic amino acid. Ea bobeli ke lipid e sa tloaelehang kapa k'hemistri ea linker, e akaretsang dicarboxylic-acid-enabled and cleavable lipid concepts hammoho le PEG-lipid hybrids.. Barekisi ba thathamisa tsena e le menyetla e fapaneng, kahoo kopo ea hore e rehe feela "lipidated noncanonical peptide" e siea mofani oa thepa a hakanya ka bobeli. (Li-Peptide tsa Pōpo).
Qeto ea bobeli e lutse tlas'a karohano eo: hore na lipid e tsoela pele ka resin kapa ka mor'a ho petsoha ka tharollo. Moroalo oa Hydrophobicity, tšireletso-sehlopha logic le ho se hloeke kotsi tsohle fetoha le khetho eo, ka hona, ke ea moifo kapa moifo o hlakileng oa mofani oa thepa (Li-Peptide tsa Pōpo).

Khemistri e hlalosa hore na ke hobane'ng ha ho se hlaka ho le bitsa chelete e ngata. Setsi sa sejoale-joale se tiileng se nang le li-reagents tsa HATU kapa HBTU lia fihla 99 ho 99.5 liperesente ka ho kopanya hantle, empa potoloho ka 'ngoe e matha ka 3 ho 10 linako reagent feteletseng (Li-Peptides tsa Amerika, 2026-06-06). Ka tatelano e telele ea lipophilic, hore bokhabane ba boemo ba masala bo kopanya mojaro oa 'nete oa litšila. On-resin aggregation ke mokhoa o ka sehloohong oa ho hloleha bakeng sa tatelano ea hydrophobic, ho theola ka mokhoa o khutsitseng katleho ea ho kopanya le ho holisa litšila tsa ho hlakola ho n-1, letoto la n-2 le n-3 (Bio-Syn).
Key Takeaway: Hlalosa k'hemistri ea masala a noncanonical le lipid/linker chemistry e le litlhokahalo tse peli tse arohaneng., 'me u bolele hore na lipidation e etsahala holim'a resin kapa ka mor'a ho phunya.
Se Lokelang ho Hlakisoa Kopong e Tloaelehileng ea Peptide Synthesis

Kopo e tloaelehileng ea peptide synthesis e ntle feela joalo ka masimo ao e a tsamaisang. Tlohela e le 'ngoe e se na letho 'me morekisi a e tlatsa ka ntho e sa lekanyetsoang eo u sa e khethang. Libaka tseo kopo e felletseng ea litloaelo e tlamehang ho li jara ke tatelano e felletseng ea N-to-C, masalla a mang le a mang ao e seng a khemikhale a boletsoeng ka ho hlaka ka stereochemistry (D-foromo, N-methyl, β-amino acid), boitsebiso ba lipid, ntlha ya kgomaretse, khokahanyo kapa k'hemistri ea conjugation, bohloeki sepheo, sekala, le lisebelisoa tsa tlhahlobo (Bachem; Thermo Fisher Scientific).

|
Sebaka sa lintlha |
Hobaneng ho le bohlokoa |
Ho siea chelete e kae |
|---|---|---|
|
Tatelano ya N-to-C |
E hlalosa sepheo sa maiketsetso |
Morekisi o kenya sebaka sa odara ea masala ea kamehla |
|
Masala a sa tloaelehang, ka stereochemistry |
D-form le N-methyl fetola coupling kinetics |
Racemization kapa likepe tse fosahetseng tsa li-isomer |
|
Boitsebiso ba lipid |
C12 vs C18:1 fetola solubility le ho tshwara |
Sehlopha se fosahetseng sa lipid, bongata bo sa sebelisoeng |
|
Sebaka sa ho khomarela |
N-nako, Lys e-amine, Cys handle, kapa masalla index |
Lipid li lula sebakeng se fosahetseng |
|
Khokahano ea k'hemistri / conjugation chemistry |
Amide, ester, thioester, thioether, disulfide e sebetsa ka tsela e fapaneng |
Khokahano e sa tsitsang, ho petsoha pele ho nako |
|
Litšebeletso Sepheo sa bohloeki |
Peptide Synthesis E tsamaisa nako ea tlhoekiso le litšenyehelo |
Tlas'a- kapa kereiti e boletsoeng ho feta tekano |
|
Sekala le aliquoting |
E beha moralo oa ho kopanya le ho paka |
Boitsebiso bo sa lekaneng bakeng sa ho pheta-pheta |
|
Litlhahlobo tse ka fanoang |
E hlalosa sephutheloana sa data sa tokollo |
Ha ho na bopaki ba lotho |
Lik'hemik'hale tsa lipidation le litlelase tsa lipid tseo molekane oa synthesis hangata a fanang ka span amide, ester, thioester, thioether, le likamano tsa disulfide, ka sehokelo ho N-terminus, Lys e-amine, seqha sa Cys, kapa masalla a nang le hydroxyl, le sehlopha sa baemeli ba lauric C12, mohlolo C14, palmitic C16, stearic C18, Oleic C18:1, le li-sterol tse kang k'holeseterole (Li-Peptide tsa Pōpo).
Likarolo tse peli li lokeloa ke linomoro tse hlakileng ho fapana le mofuta oo u ts'epang hore morekisi oa o fetolela. Likarolo tsa bohloeki li bonts'itsoe ka tšebeliso: hodimo 95% bakeng sa NMR, crystallography, receptor-ligand, le liteko tsa tlholisano; 90 ho 95% bakeng sa tlhahiso ea monoclonal-antibody le palo ea ELISA kapa RIA; hodimo 80% bakeng sa "non-quantitative Western blotting"., ka hare ho kakaretso 80% ho 97% sehlopha bakeng sa mosebetsi o seng oa GMP (Tataiso ea bohloeki e phatlalalitsoeng ea Bachem ea kopo). Hlokomela mohloli: lena ke leqephe la barekisi le rekisang limaraka tse holimo, kahoo tšoara fatše e le sebaka sa ho qala, e seng benchmark e sa nke lehlakore.
Sekala se latela mohopolo o tšoanang. Sekala le mefuta e fapaneng ea aliquoting eo morekisi oa moetlo-synthesis a hatisang e tsoa ho 5 mg ho 100 g, with aliquoting from 0.5 mg ka vial ho ± 2% ho nepahala le ho lokolloa ha QC e tloaelehileng ke HPLC hammoho le MALDI-MS (Bachem). Morekisi ea tšoanang, ts'usumetso e ts'oanang: netefatsa phanele ea tokollo eo u e hlokang pele o amohela ea kamehla.
Qeto e le 'ngoe ea tsela e ngotsoe ka mongolo. Hlalosa hore na lipid e kentsoe holim'a resin kapa ka mor'a ho phunya, kapa ho fana ka khetho eo ka ho hlaka ho e-na le ho se etse letho. Ho fana ka qeto ea tsela ka ho hlaka ho e-na le ho e siea ke hona ho thibelang morekisi ho ntlafatsa tsela ea bona ea theko e tlaase ho e-na le tlhahlobo ea hau..
Bakeng sa Keletso: Beha tafole ena kopong ea hau ea qotsa 'me u kope morekisi ho netefatsa kapa ho otla mola o mong le o mong. Seteraeke se ngotsoeng ke mohopolo o ngotsoeng; ho khutsa ha ho joalo.
[Setšoantšo sa skrini: foromo e hlakisitsoeng ea tlhophiso ea tlhophiso e nang le likarolo tse hlakileng tse totobalitsoeng]
Mokhoa oa ho Netefatsa Lipidation tse Khethehileng tsa Sebaka le Hore na Ho se Tsebahala ho Tsoa kae

Boima bo sa fetoheng bo tiisa sebopeho, eseng boemo. Phetoho e bonahalang ea boima e u bolella motsoako o entsoeng le hore na ho kentsoe lipid e kae; ha e etse joalo, ka boyona, rarolla tlhophiso ea sebaka, kabo e qaqileng, kapa li-isomer tsa boemo bo tlase ba bongata. Sebaka sa lehae hangata se hloka mosebetsi oa boemo ba peptide kapa subunit ka LC-MS/MS kapa mekhoa e amanang le eona. (Pōpo ea Proteomics, Tlhahlobo ea Boima bo sa Feleng bakeng sa Tiiso ea Conjugation, 2026-03-12). Polelo eo e le 'ngoe ke lona lebaka le felletseng la hore netefatso ea lipidation ea sebaka se itseng e thata ho feta kamoo e shebahalang kateng: lotho tse peli li ka arolelana boima bo ts'oanang 'me tsa fapana moo lipid e lutseng teng.
Molao oa ho nyoloha oa data ea boima bo sa fetoheng o latela moeli oo. MALDI-TOF e lekane bakeng sa cheke e hloekileng ea e / che e kholo ea conjugate. Haholo-holo ho ESI-MS kapa LC-MS ha mefuta e fapanyetsanang, linaha tse ngata tsa ho lula, kapa ho hlaha enfelopo e atolositsoeng, le ho tšoara lere ea lienfelopo tse arohaneng haufi-ufi e le letšoao la libaka tse ngata kapa li-adducts ho e-na le bothata ba bohloeki. (Pōpo ea Proteomics, 2026-03-12).
Sephutheloana sa likarolo tse 'nè bakeng sa lipidation e khethehileng ea sebaka ke motsoako oa melao-motheo ena e holimo ho fapana le mohloli o le mong o qotsitsoeng.: sebaka se nepahetseng se boletsoeng moahong, papali e sa fetoheng ea LC-MS kapa HRMS, digest hammoho le 'mapa oa sebaka sa LC-MS/MS o bonts'ang lipid sekhechanang se reriloeng, le bopaki ba hore libaka tse ling ha li eo kapa li ka tlase ho moeli o loketseng.
Moo Mekhoa ea Tlhahlobisiso ea Orthogonal e Fokotsang ho se Tsejoe Lipatlisisong Tsa Pele
Potso e nepahetseng ha se hore na tlhahlobo e le 'ngoe e molemo ka ho fetisisa, empa ke mefuta efe ea mekhoa e koahelang sebaka se seng se foufetseng. Sebopeho sa Orthogonal, ha se tlhahlobo e le 'ngoe, ke eona e phahamisang boitšepo ha peptide e nang le lipided e ka ba limolek'hule tse 'maloa tse fapaneng.
High-resolution mass spectrometry e abela sebopeho sa mantlha le li-ion tse tlang pele ho karohano., e leng taba ha mefuta ya isobaric e arolelana boima ba lebitso. NMR e ntse e le setsi sa morao-rao ha MS e sitoa ho arola ho se utloisisehe ha isomeric kapa regioisomeric.. Ho bapisa khetho ea C18 le C4 ho eketsa karolo ea bobeli ea karohano, kaha mekhahlelo e 'meli e emeng e rarolla mefuta e nang le hydrophobicity e fapaneng ka mokhoa o fapaneng. E nke joalo e le tataiso ea mekhoa ho fapana le qotso e netefalitsoeng: tokomane ea mohloli ha e khone ho buloa nakong ena ea ho matha.
Tlaleho ea ho se hloeke e ruta ho feta palo e le 'ngoe ea bohloeki. Mohato oa lipidation o hlahisa acylation e sa fellang, over-acylation, li-isomer tsa maemo le mefuta e amanang haufi-ufi, le barekisi ba fanang ka tlaleho ka bomong ba latela mefuta e fapaneng ea sebopeho, ts'ebetso-e loketseng, kapa papiso-e amanang, ho latela likopano tsa ICH Q3A/Q3B (Li-Peptide tsa Pōpo). Bakeng sa sebopeho sa lipopeptide, botsa hore na setifikeiti se ka bolela lihlopha life.
|
Mokhoa |
Seo e se pakang |
Seo e ke keng ea se paka |
Eketseha ha |
|---|---|---|---|
|
Boima bo sa feleng |
Boima ba molek'hule bo lumellana le kaho e lebelletsoeng |
Moo mafura a lutseng teng, kapa hore na li-isomer li teng hammoho |
Lipapali tsa bongata empa ketsahalo kapa ho bolokoa ho sa lebelloa |
|
LC-MS/MS ka mora tshilo ya dijo |
Sebaka sa tatelano le phetoho holim'a likhechana tse bonoang |
Liphetoho ho likhechana ha li so fumanehe |
Likheo tsa tšireletso li siea masala a lipidated a sa hlokomeloe |
|
HRMS |
Sebopeho sa mantlha le li-ion tse tlang pele ho MS/MS |
Phapang ea Isomeric kapa regioisomeri |
Mefuta ea Isobaric e utloahala |
|
NMR |
Kabelo ea sebopeho moo MS e ke keng ea rarolla li-isomers |
Ho lokolloa ha lotho e tloaelehileng ka sekhahla |
Lintlha tsa MS ha li hlaka mabapi le khokahanyo |
|
Orthogonal RP-HPLC (Khahlano le C18. C4) |
Phapang ea karohano ho tloha ho hydrophobicity shifts |
Boitsebahatso bo felletseng ba sebopeho |
Mokhoa o mong o bontša tlhōrō e le 'ngoe, e mong ha a etse joalo |
Ho Beha Litekanyetso tsa Kamohelo tse thehiloeng ho Kotsi bakeng sa Lotho e Lipidated
Mekhoa ea tokollo bakeng sa lotho ea lipidated e lokela ho hahuoa ho tsoa ho seo thepa e lokelang ho se etsa kamora moo, eseng ho tsoa ho sepheo sa bohloeki se kopilitsoeng leqepheng la lethathamo. Bakeng sa tšebeliso ea lipatlisiso tsa pele, litekanyetso tsa ho amoheloa tse fetang palo ea bohloeki ke boitsebiso ba mefuta e nepahetseng ea lipided, litaba tsa peptide tse tsebahalang tse lekantsoeng ka tlhahlobo ea bongata joalo ka tlhahlobo ea asiti ea amino, mofuta o hlakileng oa letsoai le boitsebahatso ba counterion mmoho le bokae ba ona, le boemo ba metsi bo senotsoeng. Ntle le tseo, boima boo u bo bekhang bo kenyelletsa lintho tseo e seng peptide.
Ke ka lebaka leo mohala oa analytical o reng morekisi a qotsa e le oa bohlokoa: net peptide content ka AAA kapa CHN, metsi le acid e ngata, litaba tsa counterion, ESI-MS/MS le tlhahlobo ea endotoxin e 'ngoe le e 'ngoe ea tlalehoa 'me e' ngoe le e 'ngoe e rekoa ka bo eona. Thermo Fisher's tloaelo-peptide QC e bonts'a maemo a tšoanang: MS mmoho le HPLC bakeng sa li-peptide tse tloaelehileng, MS hammoho le HPLC ea tlhahlobo le AAA bakeng sa li-peptide tse boima, ka thepa e rometsoeng e le letsoai la lyophilized TFA ntle le haeba ho kōptjoa mofuta o mong. Ka bobeli ke maqephe a barekisi a nang le khothaletso ea ho rekisa li-add-on, kahoo li tšoare joaloka menu, eseng benchmark.
Moralo oa ho khetha meeli ke ICH Q6A sebopeho sa ho amohela-litekanyetso, e sebetsang hantle 1 Mots'eanong 2000, e sebetsanang le hore na litekanyetso tsa ho amoheloa le mekhoa ea tlhahlobo li behiloe le ho lokafatsoa joang. Ha e le hantle, sena ke setlhophiso se nepahetseng sa mekhahlelo: ts'ebetso ea kotsi ea QbD e bonts'ang phapang ho kotsi ea sehlahisoa ho fapana le molao o le mong oa linomoro.
⚠️ Tlhokomeliso: CoA e tlanngoeng haholo e kopanya liphetho ho sehlopha se itseng, ho jara nomoro ea lotho, tatelano, HPLC bohloeki, MS boitsebiso, lintlha tsa mokhoa le chromatogram kapa spectrum, hangata ka net peptide content, letsatsi la tlhahlobo le laboratori. Letlapa le "tloaelehileng" ha le tlame letho. Haeba tokomane e sa bolele lotho ea hau, hase bopaki ba tokollo bakeng sa boitsebiso ba hao.
Liphoso Tse Tloaelehileng Tse Tebisang Morero oa Noncanonical Lipidated Peptide
Ho hloleha ho theko e boima ka ho fetisisa mosebetsing ona ha se ho hloleha ha motsoako. Ke ho hloleha ha lintlha le tokollo: lotho e kopana le litekanyetso tsa eona tse boletsoeng 'me e ntse e sitoa ho tšehetsa teko eo e neng e laetsoe bakeng sa eona. Phoso e 'ngoe le e 'ngoe e ka tlase e ngotsoe e le mokhoa oa tlhahlobo, kahoo o ka hlahloba kopo ea hau khahlanong le eona pele morekisi a qala.
Ho phekola boima bo sa tsitsang e le bopaki ba khetho ea sebaka. Boima bo sa fetoheng bo tiisa sebopeho, eseng boemo. Lotho e lekanang le bongata e ntseng e hloleha ke nyeoe ea archetypal: lipid e teng, boima ba molek'hule bo nepahetse, 'me phetoho e lutse holim'a mesaletsa e fosahetseng, kahoo lotho e ea feta ea lokolla 'me ea hlōleha tekong. Botsa hore na ke bopaki bofe bo etsang hore lipid e be sebakeng sa heno, eseng hore na bopaki bo e lekanyang.
Ho tlaleha nomoro e le 'ngoe ea bohloeki. Nomoro ea ho hloeka e patang li-isomers tsa maemo le mefuta e nang le acylated ho feta e u bolella hore tlhoro e kholo ke e kholo., eseng hore ke molek'hule e nepahetseng. Bohloeki le khetho ea sebaka ke litekanyo tse arohaneng, 'me palo e phahameng ea bohloeki e ka phela hammoho le sehlahisoa sa mefuta-futa.
Ho siea qeto ea tsela e sa boleloa. Qeto e sa boleloang ea tsela eo morekisi a e rarollang bakeng sa kotulo ke phetisetso e khutsitseng ea taolo holim'a boemo ba hau ba litšila.. Bolela hore na lipidation e etsahala ka resin kapa ka mor'a ho phunya, 'me u bolele hore na u hloka ho hatelloa ke mofuta ofe.
Ho tlohela stereochemistry bakeng sa masalla a sa tloaelehang. Stereochemistry e siiloeng kopong e etsa hore diastereomer eo u neng u e batla e se ke ea netefatsoa ha u e fumana, hobane ha ho letho ka tlhaloso e khethollang ho seo u se amohetseng.
Ho amohela CoA e sa tlamelletsoeng lotho. CoA e sa tlamelletsoeng lothong e ke ke ea saloa morao ho thepa e sehatsetsing sa hau, e tlosang bokgoni ba hao ba ho batlisisa hamorao.
Ho hloleha ho tsamaellanang ho bontša mokhoa o hlokomelehang: litlhōrō tse pharaletseng kapa tse arohaneng tsa HPLC, boima bo tšoanang ka makhetlo a mangata a ho boloka, litšila tse haufi le baahisane tse thata ho arola, ho fapana ha sehlopha ho ea ho sehlopha, le bohlasoa bo sa qhibiliheng ka mor'a ho petsoha (Bio-Syn, bala 2026). Tsena ke li-heuristics tsa barekisi ba rarollang mathata ho fapana le litefiso tse phatlalalitsoeng tsa ho hloleha, empa ke mesaeno ea khale ea ho hloleha ea tatellano ea lipophilic mme e loketse ho hlahlojoa khahlano le chromatogram efe kapa efe eo u e fumanang..
|
Phoso |
Hobaneng ho etsahala |
Tokiso |
|---|---|---|
|
Boima bo sa fetoheng bo baloa e le bopaki ba khetho ea sebaka |
Boima ke tekanyo e bonolo ka ho fetisisa ea ho tlaleha 'me e shebahala e tiile |
E hloka bopaki ba sebaka, eseng feela sebopeho |
|
Nomoro e le 'ngoe ea bohloeki bakeng sa lotho eohle |
Purity ke metric e tloaelehileng ea tokollo |
Tlaleha bohloeki le khetho ea sebaka e le liphetho tse arohaneng |
|
Qeto ea tsela e sieletsoeng morekisi |
Kopo ha ho mohla e bolelang hore ho se hloeke ke ntho e tlang pele |
Hlalosa on-resin kapa post-cleavage, le mefuta ea ho hatella |
|
Stereochemistry e sa hlalosoang |
Masala a sa tloaelehang a nkoa e le a sa hlakang |
Bolela diastereomer le mokhoa o e khethollang |
|
CoA ha e kopane |
Litokomane li nkuoa joalo ka tloaelo |
Hana CoA efe kapa efe e etsang joalo Li-Peptide tsa Synthetic ho se khetholle lotho |
Hore na Katleho e shebahala Joang le Mokhoa oa ho Bala Sephutheloana sa Lintlha
Lotho e felileng ha se palo ea bohloeki. Ke sephutheloana sa likarolo tse 'ne bakeng sa lipidation e khethehileng ea sebaka: setifikeiti sa tshekatsheko se hokahaneng le sehlopha seo se itseng, boima bo sa fetoheng bo tsamaellanang le kopano e lebelletsoeng, 'mapa oa digest-and-LC-MS/MS o behang lipid karolong e reriloeng e nang le libaka tse ling li le sieo kapa ka tlase ho moeli o boletsoeng., le phatlalatso ea net peptide content, boitsebiso bo hanyetsanang le metsi. Karolo eo ea ho qetela ke seo CoA e tlamang haholo e hlileng e tlamang ho sona. Ntle ho eona, 'mali o amohela maikutlo a mabapi le litekanyetso tsa ho amoheloa ho feta palo ea bohloeki.
Bala sephutheloana ka tatellano eo. Boitsebiso pele, hobane papali e le 'ngoe feela e ke ke ea khona ho etsa phetoho. 'Mapa oa sebaka sa bobeli, hobane ke eona feela ntho e khethollang mokhethoa oa boemo bo reriloeng ho tsoa ho mofuta o lumellanang ka bongata. Content le counterion boraro, hobane ba etsa qeto ea hore na ha e le hantle ke lintho tse kae tse ka har'a vial.
Bakeng sa lotho ea pele ea kaho e ncha, tšoara sebopeho sa orthogonal, ha se tlhahlobo e le 'ngoe, joalo ka mokhoa oa ho sebetsa: tsamaisa karohano ea orthogonal joalo ka C18 khahlano le C4, 'me u kenye mokokotlo oa NMR moo moaho o fanang ka tumello. Reka Hang ha ho bonts'oa ho lumellana ha lotho ho lotho, phanele e tloaelehileng e ka tsamaisa tokollo. Hlokomela hore tataiso ea phanele ea orthogonal e itšetlehile ka netefatso e sa fellang, kahoo e nke e le mohato oa ho fokotsa kotsi ho e-na le protocol e tiisitsoeng.
Key Takeaway: Liqeto tsa tokollo li lokela ho latela tatellano e hlalositsoeng: bohloeki le boitsebiso bo kopane, joale 'mapa oa sebaka o kopane, ebe litaba le khanyetso lia senoloa. Lekala le hlolehang litsela tsa ho nyoloha le ho hlahloba, eseng ho hana ka boiketsetso. About
Setšoantšo sa boemo ba ts'ebetso: ts'ebetso ea tlhahlobo e ts'ehetsang tlaleho ea batch-tieed mme e ka sebelisoa ho boloka 'mapa oa tšilo ea lijo., dikahare le data ea counterion tlalehong e le 'ngoe ea tokollo e thusa bahlahlobisisi ho lekola tseko e' ngoe le e 'ngoe ho khutlela ho lotho eo e tsoang ho eona. Liphetoho tsa MOL e sebetsa sebakeng sena e le molekane oa tloaelo oa peptide synthesis.
Lipotso Tse Botsoang Khafetsa
Ho nka nako e kae ho etsa peptide e sa tloaelehang ea lipidated?
Rera nako e telele ho feta kemiso ea nako e tloaelehileng ea peptide. Odara e tloaelehileng ea peptide hangata e qotsoa hoo e ka bang libeke tse peli ho isa ho tse tharo bakeng sa ho tlisoa, mme motheo oo o nka mesaletsa ya tlwaelo le tlhoekiso e otlolohileng. Lipidation chemistry, ho fumana masalla a seng molaong, le boikitlaetso bo eketsehileng ba chromatographic ketane ea hydrophobic e hloka hore e mong le e mong a suthele kemiso. Kopa morekisi oa hau hore a u fe kemiso ea bohlokoa e arolang motsoako, lipidation, le tlhoekiso, kahoo ho thella sethaleng se le seng ho bonahala pele e fetoha tieho ea ho pepa.
E na le boima bo tiileng bo lekaneng ho netefatsa lipidation ea sebaka se itseng?
Che. Boima bo tiileng bo u bolella boima ba molek'hule kaofela, eseng moo lipid e lutseng teng. Lotho e lekanang ka bongata e ntse e ka tsamaisa ketane ho masalla a fosahetseng, 'me isomer eo ea boemo e tla itšoara ka tsela e fapaneng tekong e tlamang kapa ea botsitso. Tšoara boima bo sa fetoheng joalo ka heke ea tokollo bakeng sa boitsebiso feela, ebe o nyolohela ho 'mapa oa boemo ba peptide ha sebaka sa marang-rang se le bohlokoa. Molao oa ho nyoloha o otlolohile: MALDI-TOF e lekane bakeng sa tlhahlobo e potlakileng ea boima, empa netefatso ea lipidation ea sebaka se itseng e hloka ESI kapa LC-MS ka ho arohana., hobane feela teko ea tandem e fana ka phetoho.
Ho thoe'ng haeba boima bo lumellana empa 'mapa oa digest o sa lumellane?
Eo ke taba ea boemo-isomer, 'me lotho ha e lokolloe bakeng sa mosebetsi o amanang le sebaka sa marang-rang. Kopa lintlha tsa 'mapa tsa boemo ba peptide pele u e amohela, 'me u bapise karohano ea C18 le C4 ka lehlakore, hobane lik'hemik'hale tsena tse peli li rarolla mefuta ea lipopeptide ka tsela e fapaneng. Haeba ho se hlaka ha isomeric ho ntse ho tsoela pele ka mor'a karohano ea orthogonal, nahana ka NMR ho fetolela phetoho ka kotloloho. Tlhahiso ea Peptide
Na boemo bo holimo ba bohloeki bo nka sebaka sa bopaki ba khetho ea sebaka?
Che. Bohloeki le boitsebiso ba sebaka ke litšobotsi tsa orthogonal. Nomoro e le 'ngoe ea bohloeki, esita le e le 'ngoe e tlalehiloeng ho 98%, e ka pata li-isomers tsa maemo le mefuta e nang le acylated ho feta tekano e kopanang le sepheo. Kopa chromatogram le lintlha tsa 'mapa tse ka morao ho nomoro, eseng peresente feela.
Ke lokela ho etsa eng haeba peptide e nang le lipidated e kopana le mofuta o fokolang?
Fetola karohano ho e-na le moeli oa kamohelo. Tatelano e nyenyefalitsoeng e hlokang karolo ea ketane ea lipid e ka latela haufi-ufi le sehlahisoa sa bolelele bo felletseng ho gradient e tloaelehileng ea C18., kahoo mokhoa o li rarollang ke tokiso e sebetsang. Leka mothapo o sa tebang haholo kapa mohato o fapaneng oa ho ema, 'me u netefatse litlhōrō tse rarollotsoeng ka boima pele u lokolla lotho.
Qetello
Hona joale o na le lisebelisoa tse tharo tse sebetsang bakeng sa li-peptide tse se nang lipid: lethathamo la lintlha tse hlakileng tse qobellang kopo ea ho bolela masalla, lipid, le k'hemistri ea sehokelo; matrix a netefatso e arolang seo mokhoa o mong le o mong o se pakang ho seo o ke keng oa se etsa; le mekhoa ea kamohelo e thehiloeng ho kotsi e phahamisang bopaki ho fihlela phello ea ho fosahetse. Tloaelo ea boleng bo phahameng ka ho fetisisa ho li kopanya ho bonolo: le ka mohla u se ke ua lumella boima bo tiileng bo le bong hore bo eme bakeng sa khetho ea sebaka. E bapisitsoeng ka bongata, bohloeki bo phahameng bo ntse bo ka tsamaisa lipid ho masalla a fosahetseng.
Haeba u batla ho bala lekhetlo la bobeli holim'a mohaho pele u kena tseleng, kopa tlhahlobo ea kaho 'me re tla tsamaea le uena litekanyetso tse behiloeng le ho amoheloa.
MOL Changes e sebetsa le lihlopha tsa lipatlisiso mabapi le motsoako oa peptide le sebopeho, kahoo re na le thahasello ea khoebo ho litekanyetso tsa boleng ba peptide. Ts'ebetso e kaholimo e ikemela ho sa tsotelehe mofani oa thepa.
