C-terminale peptidemodificaties onthullen directe en indirecte rollen van egelmorfogen-cholesteroylering

Egel (Hh) morfogenen zijn betrokken bij de embryonale ontwikkeling en de stamcelbiologie, als het verkeerd gereguleerd is, kan bijdragen aan kanker. Een belangrijke post-translationele modificatie met diepgaande impact op de biofunctie van Hh is de C-terminale cholesteroylering ervan tijdens de biosynthese.. De huidige hypothese is dat de cholesterolgroep een beslissende factor is in de associatie van Hh met het buitenste plasmamembraanblad van producerende cellen, celoppervlak Hh-multimerisatie, en het transport en de signalering ervan. Nog, er wordt niet besloten of de cholesterolgroep direct betrokken is bij al deze processen, omdat hun functionele onderlinge afhankelijkheid de alternatieve mogelijkheid doet ontstaan ​​dat het cholesterol vroege processen direct initieert en dat deze processen vervolgens latere stadia van Hh-signalering kunnen sturen, onafhankelijk van het lipide. We genereerden varianten van het C-terminale Hh-peptide en observeerden dat deze cholesteroyleerde peptiden verschillende post-translationele processen bij de productie van cellen en de biofunctie van Hh bij de oog- en vleugelontwikkeling van Drosophila melanogaster op verschillende manieren verstoorden.. We ontdekten ook dat substantiële Hh-hoeveelheden gescheiden van cholesteroyleerde peptidetags in vitro en in vivo, en dat getagde en niet-gelabelde Hh-varianten zonder hun C-cholesterolresten bioactief bleven.. Onze aanpak bevestigt dus dat Hh-cholesteroylatie essentieel is tijdens de vroege stappen van Hh-productie en rijping, maar suggereert ook dat het overbodig is voor Hh-signaalontvangst bij ontvangende cellen..