Peptide Synthesis le Lisebelisoa - Moqapi oa Connect, Bopaki ba lintho tse bonahalang le bo sebetsang
Fektheri ea Tripeptide Li-peptide tse tiileng Teko e ntle ea peptide e ka tšehetsa lipale tse 'maloa tse fapaneng. Molek’hule o reriloeng e ka ’na eaba o hlahisitse tšebelisano e lebelletsoeng; letšoao le ekelitsoeng e ka 'na eaba le fetotse boitšoaro ba molek'hule; phapang ea ho lokisetsa e ka 'na eaba e fetotse chelete e fanoeng. Thuto e kholisang ea tšebeliso e khethollang litlhaloso tseo. Setifikeiti sa ho kopanya le pontšo ea tlhahlobo ka 'ngoe e fana ka karolo ea bopaki boo, empa leha ho le joalo ha a phethele mabaka a le mong.
Khutlela morao ho tloha qetong eo thuto e e hlokang. Hlalosa tlhokomeliso e tla e tšehetsa, mekhoa e meng e utloahalang e ka hlahisang pono e tšoanang le likarolo tsa limolek'hule tse hlokahalang ho li khetholla. Sena se hokahanya liqeto tsa ho laela le tlhaloso ea liteko ka ho toba ho feta ho khetha boemo ba ho hloeka ka kakaretso le ho eketsa litaelo ka morao..
Mehlala e amana le moralo oa lipatlisiso ho pholletsa le lipatlisiso, li-antibody reaagents le litekanyetso tsa bongata. Sepheo sa bona ke ho hlalosa hore na sephetho ka seng se ka hlahisa eng le hore na papiso efe e latelang e ka ba e rutang. Maikutlo a inahaneloang ha se datha ea laboratori ea mantlha kapa bopaki ba melemo ea bongaka ea motho.
Fetolela potso ea saense hore e be moralo o ka lekoang oa limolek'hule
Qala ka papiso eo teko e tlamehang ho e etsa. Peptide e sebelisoang joalo ka antigen, sesebelisoa sa fluorescent, le maemo a quantitative mass spectrometry a ka arolelana tatellano empa a hloka lihlopha tse fapaneng tsa pheletso, liphetoho, likabelo tsa bongata, le ditaolo. "Bohloeki bo phahameng" ha se tlhaloso e feletseng bakeng sa leha e le efe ea tsona.
Ngola sepheo ka tatellano ea N-to-C le chemistry ea boemo bo holimo, tlhophiso, liphetoho, libaka tse khomaretsoeng, lihokela, le topology efe kapa efe ea covalent. Etsa qeto ea hore na ke likarolo life tse hlokahalang ho hlahisa sebaka se amehang sa baeloji le tse hlahisoang bakeng sa ho lekanya. Theke e kenyellelitsoeng kapa mofani oa thepa e ka fetola teko le ho etsa hore ho be bonolo ho e etsa.
Bolelele ba tatelano bo lokela ho sebeletsa potso ea mahlale. Sekhechana se sekhutšoane se ka arola karolo ea temoho ea mola, athe moaho o molelele kapa o mennweng o ka hlokahala bakeng sa puisano enngwe. Ha ho khetho e tiisang hore peptide e hlahisa boemo ba protheine ea tlhaho. Bolela sebaka se reriloeng sa mohlala pele u toloka sephetho.
| Tlhokahalo ea kopo | Litlhaloso tsa ho odara | Litaolo tsa bohlokoa | Ho hloleha ho hlalosa ho batlisisa |
|---|---|---|---|
| Kemohelo ea sesole sa 'mele ea sebaka se hlalositsoeng | Meeli ea libaka, termini, k'hemistri kapa sehokelo, le linomoro tsa litšupiso | Tekanyo ea protheine e hlokahalang, motsamai kapa ditaolo tsa ditheke, le netefatso e ikgethang ya antibody | Ho tlamahane le karolo e ekelitsoeng kapa peptide ea linear e sa hlahiseng kananelo ho protheine assay. |
| Ho kopana ha fluorescent peptide le lisele | Leibole boitsebiso, boemo, sehokelo, tlhamo ya mefuta e ngotsweng, le chelete e ka sebelisoang | Litaolo tse nepahetseng tse amanang le lileibole, papiso ea peptide ea motsoali, le mekhoa ea ho sebetsana le sebaka sa pontšo | Leibole ea mahala, boitšoaro bo fetotsoeng ba peptide, kopano ya bokahodimo, kapa mohloli o mong oa fluorescence |
| Tekanyetso ea bongata ba spectrometry | Tatelano hantle, sebopeho sa isotope le sebaka, kabelo ea chelete, le litlhoko tsa ho sebetsana | Litaolo tse nepahetseng tsa matrix le litokisetso, ka ntlha e hlalositsweng ya tlatsetso e tlwaelehileng | Chelete e fosahetseng, boitsebiso bo sa rarolloang, adsorption, kapa phapang e etsahalang pele tekanyetso e eketsoa |
Tafole e hlahisa lipotso ho e-na le risepe ea tlhahlobo e akaretsang. Litaolo li lokela ho khetholla mekhoa e meng e ka fetolang tlhaloso. Taolo e kenyellelitsoeng feela hobane e le tloaelo e ka siea ho se tsitse ha bohlokoa ka ho fetisisa ho sa rarolloe.
Amohela molek'hule e fanoeng pele u hlalosa mosebetsi oa eona
Hlahloba sephutheloana sa tlhahlobo khahlanong le sebopeho se laetsoeng. Boima bo sa fetoheng bo tšehetsa sebopeho empa ha bo hlahise tatelano e 'ngoe le e 'ngoe, tlhophiso, sebaka sa phetoho, kapa Tripeptide Wholesale kamano. Bohloeki ba sebaka sa Chromatographic bo hlalosa karabelo ea mokhoa o boletsoeng mme ha bo hlahise ka kotloloho karoloana ea phofo eo sepheo se reriloeng..
Melanson le basebetsi-'moho le bona ba referense e bonts'a bothata bo hlalositsoeng ba palo-kabelo ea peptide. Bakeng sa thuto ea kopo, potso e sebetsang ke hore na boitsebiso bo fanoeng bo ne bo abetsoe bokae le hore na kabelo eo e fihla joang tokisetsong ea ho qetela. Sephetho sa eona sa linomoro ha se ntlha ea tokiso bakeng sa lotho e 'ngoe kapa tatellano. Pentapeptide 4 Moetsi
Bakeng sa lipehelo tse fetotsoeng, botsa hore na bopaki bo bua ka tšobotsi eo e leng ea bohlokoa. Boima bo ngotsoeng ka bonngoe ha bo fumane lengolo ha libaka tse 'maloa li khoneha. Boima bo tsamaellanang le cyclization ha bo khetholle khokahano e 'ngoe le e 'ngoe e ka khonehang. Tatelano e boletsoeng ha e thehe mokhoa o reriloeng oa D/L ntle le bopaki bo loketseng.
Netefatsa hore sampole e lekiloeng e hokahane le palo ea batho ba romelloang le ba vial. Maqhubu a emelang, sephetho sa pejana sa batch, kapa chromatogram e sa ngolisoang e ka thusa empa ha e tšoane le sephetho se ka lateloang bakeng sa lintho tse sebelisoang..
Kamohelo e boetse e lokela ho nahana ka teko e reriloeng. Likarolo tse setseng, ts'ebetso e sa phethahalang, kapa ho fapana ha 'mele ho ka ba le taba ka tsela e fapaneng lits'ebetsong tsohle. Hlalosa litšoaneleho tse amehang ho fapana le ho nka hore moeli o le mong oa bohloeki o netefatsa ts'ebeliso eohle e ka khonehang.
Netefatsa mohlala o lokiselitsoeng le moelelo oa pontšo
Vial ha se boemo ba ho qetela ba liteko. Ho theha bocha, phokotso, bokaholimo, polokelo, nako, le seaplane se ka fetola palo kapa boemo bo hlahisoang tekong. Ngola nalane ea boitokisetso 'me u khetholle tharollo e hlakileng ka pono ho tsoa bopaking ba boemo bo hlalositsoeng ba limolek'hule.
Beha tokiso setšoantšong se tšoanang sa sesosa le molek'hule. Ho fetoha ha dilution, bokaholimo kapa nako e fetileng e ka fetola se fihlang tekanyong. Haeba lihlopha tse peli tsa liteko li na le nalane ea boitokiso e fapaneng, phapang ea karabelo e ke ke ea abeloa ka mokhoa o ikhethileng tšobotsing ea molek'hule e hlophisitsoeng ntle le ho hlahloba nalane eo.
Mohlala o inahaneloang. Sehlopha sa fluorescent peptide se fetisa licheke tse lumellanoeng tsa boitsebiso 'me se hlahisa fluorescence e matla e amanang le lisele ho feta kamoo papiso e sa ngolisoang ea motsoali e ka tlalehang ka ho toba.. Litheko tsa Peptide Sehlopha qalong se hlalosa sena e le mokhoa o ntlafetseng oa cellular. Qeto eo ke ea pele ho nako hobane fluorescence ke 'malo oa ho bala, 'me motsoali ea sa ngolisoang ha a fane ka tekanyo e lekanang ea optical.
Patlisiso e lokela ho khetholla kamano sebakeng sa sele, sebaka sa ka hare, leibole e lokolohileng kapa e koetsoeng, le liphetoho tse bakoang ke ho ngola. E boetse e lokela ho nahana ka liphapang tsa palo e reriloeng le mohlala oa ho tšoara. Litekanyo tse nepahetseng li ipapisitse le tlhahlobo mme li lokela ho etsoa ho sebetsana le likhetho tseo.
Hlōla lere la tleleime ponong e le 'ngoe ka nako
Fluorescence e amanang le lisele, Peptide e sa sebetseng hantle le ho isoa sebakeng se itseng sa cellular ke likopo tse hlakileng haholoanyane. Setšoantšo se thehang mokhatlo ha se bolele hore na ke mang kapa sebaka se hlokoang ke likopo tsa morao-rao. Etsa qeto ea hore na thuto e hloka boemo bofe pele u khetha ntlha; ho seng joalo letšoao le loketseng ka ho fetisisa le ka hlalosa potso ea lipatlisiso ka khutso. Peptide Storage
Bakeng sa lipatlisiso tse inahaneloang, bopaki bo loketseng bo amanang le sebaka bo ka sebetsana le kamano e holimo, athe tekanyo e khethang lik'hemik'hale e ka sebetsana le hore na sepheo se ngotsoeng se sa fetoheng se ntse se le teng. Ha ho mokhoa o ikhethileng ka tsela e iketsang: karolo e arohaneng ea cellular e ka ba le carryover ho tloha sebakeng se seng, 'me mofuta oa fluorescent o ka tsoela pele ka mor'a hore peptide e fetohe. Theha litsamaiso ho pota-pota mekhoa ea ho hlōleha ha litekanyo tse khethiloeng ho e-na le ho nka lebitso la sesebelisoa e le tiiso.
Thuto ea papiso ea fluorophore le basebetsi-'moho le Cavaco e hlahloba li-peptide tse sebetsang ka membrane tse khethiloeng 'me e bontša hore na ke hobane'ng ha leibole e ka ba pherekano. E ts'ehetsa ho lekola monyetla oo moqapong oa 'nete. Ha e bolele hore lidae tsohle li na le phello e ts'oanang kapa hore ho lokisoa ha dae e sa lefelloeng ho hlahisa boits'oaro ba leibole e kopantsoeng ka thata..
Haeba bopaki bo teng bo tšehetsa feela fluorescence e amanang le lisele, tlaleha tlhokomeliso eo ka nepo. Qeto e fokolang e nang le teko e latelang e hlakileng e molemo ho feta tseko e sa tšehetsoeng ea ho fana ka li-intracellular. Esita le ts'ebeliso e tiisitsoeng e ke ke ea theha phello ea phekolo ka boeona.
Botsa hore na taolo ka 'ngoe e ka etsa qeto efe
Reagent e se nang liaterese e se nang letho ho tsoa ho sistimi ea ho lokisa kapa ea ho lekanya. Papiso e amanang le lileibole e khethiloeng ka nepo e sebetsana le tlhaloso e itšetlehileng ka lileibole. Papiso ea motsoali le peptide e sebetsana le karolo ea phetoho, empa motsoali ea sa ngolisoang a ke ke a bapisoa joalokaha eka o fane ka palo e lekanang le ea fluorescent.. Litaolo tsena li na le mesebetsi e fapaneng; ho li bokella sehlopheng se le seng sa "taolo e mpe" ho lahleheloa ke likhetho.
Phapang ea tatelano e ka boela ea fetola tefiso, ho qhibiliha kapa kopano. Ha se taolo ea ho se nke lehlakore feela hobane masala a ile a qhekelloa kapa a nkeloa sebaka. Bapisa likarolo tse hlokahalang ho leka mofuta o mong o reriloeng, rekota liphapang tse setseng 'me u qobe ho fetolela phokotso e' ngoe le e 'ngoe ea matšoao e le bopaki ba kananelo e ikhethileng ea tatelano.. Taolo e na le thuso hobane liphetho tse lebelletsoeng li khetholla litlhaloso, eseng hobane label ea eona e utloahala e le thata.
Sebelisa lethathamo la kamohelo le tlhahlobo e latelang tleleime
| Kopo e ntse e hlahlojoa | Bopaki ba bohlokoa | Lintlha tse tšehetsang tse ke keng tsa e nkela sebaka |
|---|---|---|
| Peptide e reriloeng e ile ea fanoa | Tlhaloso e felletseng, boitsebahatso ba lotho e lateloang, le tshekatsheko e e maleba ya popego | Lebitso la sehlahisoa, mofani wa thepa ya tloahelehileng, kapa boima bo lebelletsoeng bo le bong ha ho sala mekhoa e meng ea bohlokoa |
| Teko e fumane chelete e ka bapisoang le eona | Litlaleho tsa motheo oa chelete le lirekoto tsa boitokiso tse amanang le sampole ea ho qetela | Boima bo lekanang ba phofo kapa lileibole tsa stock tse lekanang |
| Phetoho e sebakeng se hlokahalang | Bopaki bo amanang le sebaka le tlhahlobo ea mefuta e meng e tšepahalang | Kakaretso ea boima ba phetoho kapa tlhoro e le 'ngoe e kholo ea chromatographic |
| Karabo e lekantsoeng e ts'ehetsa mokhoa o reriloeng | Litaolo le litekanyo tse khethollang tse loketseng mochini oo | Pontšo e ntle tekong e le 'ngoe kapa sephetho se tšoanang le lingoliloeng tse sa amaneng |
| Karolo e 'ngoe e fana ka tlhahlobo e tšoanang | K'hemik'hale e robehileng, bongata, tokisetso, le bopaki bo sebetsang bo amehang | E tšoanang tlhaloso ea lethathamo kapa sebopeho sa setifikeiti |
Tlhahiso ea Uhlen le basebetsi-mmoho ea netefatso ea antibody e tiisa ka ho hlaka ka ts'ebeliso. Sephetho se nang le peptide ea maiketsetso e ka theha tlhokomeliso e fokolang ha e ntse e siea kananelo ea protheine e phuthoang kapa mofuta o mong oa tlhahlobo o sa rarolloa.. Khetha bopaki bakeng sa ts'ebeliso ea 'nete e reriloeng ho fapana le ho fetisetsa lengolo la netefatso ho pholletsa le maemo.
Bakeng sa maemo a mangata, hlalosa moo e kenang teng mosebetsing. Peptide e kentsoeng ka mor'a tšilo ea lijo e ke ke ea lokisa phapang e etsahetseng nakong ea tšilo ea pejana. Ena ke moeli oa moralo oa taolo, e seng sekodi se ka rarollwang ka ho batla peresente e phahameng ya bohlweki.
Lisebelisoa tse ikemetseng li ntse li ka arolelana ntho e le 'ngoe ea maiketsetso
Lipuisano tse peli li matlafatsa khang feela ho isa moo mekhoa ea bona ea ho hloleha e fapaneng e fapaneng. Microscopy le plate fluorescence ka bobeli li ka itšetleha ka dae e tšoanang le khanya ea eona. Tumellano pakeng tsa bona e ka pheta phello e amanang le label. Mokhoa oa bobeli o nang le tsebo e eketsehileng o hlahloba thepa eo ho phehisanoang khang ka eona ka mokhoa oa tekanyo o fapaneng ka ho lekaneng, ka taolo le mefokolo ea eona e hlakisitsoeng.
Koala thuto ka ho bolela se hlokometsoeng, tlhaloso e tšehelitsoeng le khetho e setseng ka thoko. Ka mohlala: "Sepheo se lokisitsoeng se ngotsoeng se ne se amahanngoa le lisele tse tlas'a maemo a hlahlobiloeng; litekanyo tsa hona joale ha li khetholle karolo e hlokahalang ea intracellular.” Polelo eo e fana ka potso e tiileng e latelang. Ho bitsa bopaki bo tšoanang ho fana ka katleho ho ka pata teko e sieo ho e-na le ho etsa hore sephetho se be molemo haholoanyane.
Bakeng sa papiso ea batch, boloka lisampole tsa nalane le tse ncha tlasa maemo a ka bapisoang a tlhahlobo le boitokiso moo ho ka khonehang. Haeba sebaka sa litšupiso se tsofetse kapa se sebelitsoe ka tsela e fapaneng, kenyeletsa ho hloka bonnete hoo. Ho seng joalo, boithuto bo ka amahanngoa le phapang ea ho sebetsana le tlhahiso.
Koala tlhahlobo ka qeto e matla ka ho fetisisa eo bopaki bo e tšehetsang, mekhoa e meng e setseng, le kgato e latelang ya kgethollo. Liphuputso tsa in vitro le liphoofolo li na le maemo le mefokolo ea tsona; ha li thee ka ho toba katleho ea motho kapa polokeho. Lisebelisoa tsa boemo ba lipatlisiso ha li tšoanelehe ho sebelisoa ke batho hobane li hlahisitse litholoana tsa laboratori tse tšepisang.
Pele ho taelo e latelang, kopanya leqephe le le leng le kopanyang potso ea mahlale, sebopeho se nepahetseng, palo motheo, ditaolo tsa bohlokwa, le bopaki ba kamohelo. Tokomane eo e fa sehlopha sa sehlopha sepheo se hlakileng 'me e fa laboratori e amohelang motheo o lumellanang oa ho hlalosa sephetho..
Lipotso tse botsoang khafetsa
Na peptide ea bohloeki bo phahameng e tiisa ts'ebeliso e atlehileng? Che. Boitsebiso, chelete e ka sebelisoang, boemo ba mmele, liphetoho, ditaolo, le moelelo oa teko kaofela o susumetsa sephetho. Bohloeki ke karolo e 'ngoe ea ketane ea bopaki.
Na leibole ea fluorescent e ka nkuoa e le sesebelisoa se sa nke lehlakore? Eseng ntle le bopaki bakeng sa sepheo le assay. Li-label li ka ama boitšoaro le ho theha mehloli e meng ea matšoao, kahoo leano la taolo le lokela ho sebetsana le karolo ea bona.
Na peptide e tlama ho lekana ho netefatsa antibody bakeng sa tlhahlobo e 'ngoe le e 'ngoe? Che. Netefatso e lokela ho lumellana le ts'ebeliso e reriloeng le maemo a tlhaho. Sephetho se nang le peptide ea maiketsetso ke pono e fokolang.
Etsa litlhahlobo tse peli tse ntle kamehla u fana ka tiiso e ikemetseng? Che. Haeba bobeli bo itšetlehile ka label e le 'ngoe, boitokisetso kapa sesebedisoa sa karabo, tumellano ea bona e ka 'na ea pheta moeli oo. Khetha tekanyo e tlatselletsang bakeng sa thepa e itseng e ntseng e belaelloa.
