Sıkça Sorulan Sorular

Basitçe Miligramdan Kilograma Kompleks


Özel Teklif Talebi


How to store peptides?


Liyofilize Peptitler

Peptitlerin uzun süreli depolanması için, bunları katı bir toz halinde saklamanızı öneririz. Liyofilize peptitler -20°C veya daha düşük sıcaklıklarda minimum bozunmayla saklanabilir. Müşterilere özelleştirilmiş peptitleri her seferinde yeniden incelemeleri önerilir. 2 kalite kontrolün yayınlanma tarihinden itibaren yıllar.

Çözeltideki peptidler

Solüsyondaki peptitler daha az stabildir ve bozunmaya eğilimlidir. Peptitleri çözmek için kullanılan sulu çözeltiler steril ve saf olmalıdır..

Çözümde, belirli miktarda peptid bozunabilir, dizide bulunan amino asitlere bağlı olarak. Bazı örnekler aşağıda listelenmiştir:
– Metiyonin içeren peptidler, Sistein veya triptofan kalıntılarının oksidasyon nedeniyle çözeltide sınırlı saklama süresi olmalıdır. Bu peptitler oksijensiz bir çözücü içinde çözülmelidir. –
Glutamin ve asparajin, glutamik asit ve aspartik asite deamide edilebilir., sırasıyla. –
Sistein, bir sistein-sistein disülfür bağı oluşturmak için oksidatif siklizasyona uğrayabilir. (disülfit bağlarının içinde veya arasında oluşabilen). –
Yüklü kalıntılar (aspartik asit, glutamik asit, lizin, arginin, histidin) higroskopiktir (havadan su emmek) ve viskoz bir yapı oluşturma eğilimindedir, temiz yağ. Bu fiziksel değişiklik peptidin doğasını etkilemeyebilir. Bu tür peptitlerin, eser miktardaki suyu uzaklaştırmak için liyofilize edilmesi tavsiye edilir., daha sonra şişede su buharı olmadığından emin olmak için nitrojenle gazdan arındırılır, ve sonra hızla kapatıldı.

Tekrarlanan donma ve çözülmeden kaynaklanan hasarı önlemek için, kullanıcıların yalnızca mevcut deney için gerekli olan peptid miktarını çözmelerini öneririz. Fazla çözelti ≥'de saklanmalıdır -20 o C ihtiyaç duyulana kadar.

Nemden kaçının.
Nem, peptitlerin uzun vadeli stabilitesini önemli ölçüde azalttığından, şişeleri açmadan önce peptitlerin bir desikatörde oda sıcaklığına kadar dengelenmesini öneririz.. Peptit dağıtımının tamamlanmasının ardından, tüpte kalan peptitler susuz nitrojenle yavaşça temizlenmelidir, o zaman kabın kapağı kapatılmalıdır, bir sızdırmazlık filmi ile kapatılmıştır, ve -20°C'de saklandı.


Farklı peptidlerin çözünürlük özellikleri önemli ölçüde farklılık gösterir.. Alanin gibi kalıntılar (Ala), sistein (Cys), izolösin (Ile), lösin (Leu), metiyonin (Buluştu), fenilalanin (Phe), ve valin (Val) Peptitin hidrofobikliğine ve sulu çözeltilerdeki çözünürlüğüne katkıda bulunur, ve müşterinin peptidleri kişiselleştirirken bu yönergeleri izlemesi önerilir..

Çözünürlük Özellikleri

Peptitlerin çözünürlüğü büyük ölçüde amino asit dizisine bağlıdır. Doğal olarak hidrofobik peptitler (A, F, G, V, L, BEN, M, K, Daha yüksek eğilime sahip P) Çözündürme için organik çözücüler gerektirir. Asidik peptidler (D için daha yüksek eğilim, Peptit dizisindeki E) çözündürme için bazik sulu tamponlar gerektirir, temel peptidler ise (K için daha yüksek eğilim, H, ve R) çözündürme için asidik sulu tamponlar gerektirir.

Çözücü Seçimi

Testinizin sınırlamaları göz önüne alındığında, Peptidleri çözmek için en iyi çözücüyü belirlemek için aşağıdaki yönergeleri kullanmanızı öneririz.

Hidrofobik Peptitler

Hidrofobik peptidleri yeniden çözmek için, eklemek 100 µL DMSO ve homojen bir çözüm oluşana kadar sonikasyon. Sonraki, yapmak için seçtiğiniz arabelleği ekleyin 1 mg/mL çözelti (Peptit konsantrasyonu ne kadar yüksek olursa, gereken DMSO miktarı arttıkça).

Hidrofilik (Asidik) Peptitler

Asidik peptidleri yeniden çözmek için, eklemek 100 µL'si 1% Kuzeydoğu 4 ah'ya 1 mg peptid ve girdap. Çözüm netleştikten sonra, yapmak için seçtiğiniz arabelleği ekleyin 1 mg/mL çözelti.

Hidrofilik (Temel) Peptitler

Temel bir peptidi yeniden oluşturmak için, damıtılmış su ekleyin 1 mg peptid ve girdap.


Endüstri standardı, peptidleri liyofilize formda Brüt ağırlık olarak sunmaktır.. Brüt peptid ağırlığı liyofilize tozda bulunan tüm bileşenlerin toplam ağırlığıdır. Bu ilgilenilen peptidi içerir, herhangi bir peptid safsızlığı, su, artık çözücüler, ve karşı iyon.

Aksine Açık peptit ağırlığı, den hesaplanmıştır Net peptid içeriği, ağırlığı sadece peptid Liyofilize tozda bulunan bileşen. Bu, sonraki peptit çözümlerinizin daha doğru konsantrasyonlarını sunar. Buradan, için net peptid ağırlık miktarlarını önerdik Özel Peptit siparişler.

Net Peptit İçeriği İllüstrasyonu

Net Peptit İçeriği ölçüm amino asit analizi ile gerçekleştirilir (AAA; sınırlı doğruluk ancak düşük malzeme miktarı gerektirir) veya element analizi (CHN; miligram peptid gerektirir ancak daha doğrudur). Her iki yöntem de bir yüzde değeri verir (yani., 75% net peptid içeriği).

Net Peptit İçeriği mevcut karşı iyon miktarına bağlıdır*, peptit dizisine bağlıdır. Esasen, peptid yükü ne kadar yüksek olursa, peptit içeriği ne kadar düşük olursa

*Not: Net peptid içeriğini hesaplamak için kullanılan öğe, peptid karşı iyonuna dayanmaktadır.. Bu, karşı iyonun peptit içeriği miktarına katkıda bulunmadığından emin olmak için yapılır.. Örneğin, TFA veya asetat karşı iyon olduğunda, Azot kullanılır çünkü peptitte bulunur ancak TFA veya asetatta bulunmaz.. Aynı nedenden dolayı klorürün karşı iyon olduğu durumlarda Karbon veya Azot kullanılabilir..

Net Peptit Ağırlığı hesaplamaları:

Net Peptit Miktarı (toplam peptid) — net özel peptid siparişleri için kullandığımız yöntem.

Net Peptit İçeriği Yüzdesini Çarpın (ondalık biçim) Peptit Brüt Ağırlığına göre, Net Peptit Miktarı miktarını elde etmek için (toplam peptid).

Örneğin:
İçin 5 mg brüt peptid/flakon:
Peptit net içeriği 84%.
Toplam peptidin tam miktarı = 0.84*5 mg=4,2 mg toplam peptit

Net Faiz Peptidi Miktarı—en doğru — müşteri ilgilenilen peptidi hesaplamak için bu yöntemi kendi başına kullanabilir.

Net Peptit İçerik Yüzdesini Peptit Brüt Ağırlığıyla Çarpın, ve Peptit Saflığı (HPLC tarafından), ilgilendiğiniz peptidin tam miktarını hesaplamak için. Net peptid yüzdesi (ondalık biçim) peptid saflığı ile çarpılır (ondalık biçim).

Örneğin:
İçin 5 mg brüt peptid/şişe ile:
Peptit net içeriği 84%.
İlgili peptidin tam miktarı = 0.84*0.96*5 mg=4,03 mg


MOL Değişiklikleri, BOC kimyası yerine katı faz Fmoc kimyasını kullanır. Fmoc kimyası, peptid uzaması sırasında yumuşak koşullar kullanılarak koruyucu grupların uzaklaştırılmasına olanak tanır, BOC kimyası, peptid uzaması sırasında koruyucu grupların uzaklaştırılması için güçlü bir asit kullanılmasını gerektirir.. Ek olarak, Fmoc kimyası trifloroasetik asit kullanır (TFA) peptidi reçineden çıkarmak için, BOC kimyası hidroflorik asit kullanırken (HF). HF renksizdir, son derece aşındırıcı, ve bir temas zehiri.

Öyleyse, MOL Değişiklikleri daha hafif olduğu için Fmoc kimyasını kullanır, esnek, BOC kimyasına kıyasla çok yönlü ve çok yönlü.


Molarite, bir çözeltinin molar konsantrasyonunu ifade eder, bu, çözünen maddenin mol sayısıdır 1 litre çözelti, mol/L olarak ifade edilir, veya M.

Molarite [M] = Kütle / (Hacim x Molar Kütle); Mol = Konsantrasyon (g/L) x Hacim (L)/MW (g/mol)

Örnek:
Verilen: 1MW ile mg kuru peptid tozu: 20KDa (Peptid molar kütlesi 20 g/mol)
Bilinen kütle ve bilinen hacim ile molariteyi belirlemek
Bu peptidin 1 ml'lik bir çözeltisi için:
Molarite = Kütle (0.001G) / (hacim (0.001L) x Molar Kütle (MW 20,000) = 50 uM

Belirli bir molariteye ulaşmak için kütleyi belirlemek:
Eğer tahliliniz için, 1 ml suda 0,01 mM çalışma peptidi çözeltisine ihtiyacınız var, daha sonra gerekli kütleyi aşağıdaki gibi hesaplayın:

Kütle = Molarite x Hacim x Molar Kütle
Kütle = 0,01 mM x (1/1000 L) x 20.000g/mol = 0,0002g

Buradan, 0,01 mM'lik bir çalışma çözeltisine sahip olmak için 0,2 mg/ml peptite ihtiyacınız olacak.


Liyofilize veya ham toz ve peptid solüsyonu olarak teslim ediyoruz.


Bir peptidin belirli bir çözücü içindeki çözünürlüğü, amino asit dizisine bağlıdır ve genellikle tahmin edilmesi zordur.. Katalog peptidleri durumunda, çözünürlük bilgisi QC veri sayfasında listelenmiştir. Özel peptidler için, lütfen başlıklı bölüme bakın “Peptitimi nasıl çözündürmeliyim?”.


Bunlar iki ayrı ölçüm olduğundan, peptit içeriği peptit saflığının bir göstergesi değildir.. Saflık, analitik HPLC ile belirlenir ve diğer peptidik kirleticilerin varlığını/yokluğunu gösterir. (yani. kesik peptitler).

Net peptid içeriği peptidin gerçek miktarını belirler (ilgilenilen peptidin yanı sıra peptid kirleticileri) örnekte mevcut. Net peptid içeriği geleneksel olarak Amino asit analizi ile ölçülür. (AAA; Sınırlı doğruluk ancak düşük miktarda malzeme gerektirir) veya element analizi (CHN; miligram peptid gerektirir ancak daha doğrudur).


MOL Değişiklikleri peptitleri genellikle ters fazlı hazırlayıcı HPLC ile saflaştırılır., kullanarak 2 içeren tamponlar 0.1% trifloroasetik asit (TFA). İlk tampon (Tampon A) oluşur 0.1 % Deiyonize su ve ikinci tamponda TFA (Tampon B) oluşur 0.1 % Asetonitrilde TFA (ACN).

Genel olarak, ham peptitler ilk önce Tampon A'nın bir çözeltisinde çözülür., bir miktar Tampon B, veya DMSO gibi organik bir polar çözücü. Organik polar solvent veya Tampon B kullanıldıysa, bu berrak çözelti ilk önce Tampon A ile seyreltilecektir. Sonraki, peptidik çözelti filtrelenir ve hazırlayıcı HPLC sistemine yüklenir. Optimize edilmiş bir yöntem gradyanı kullanma, fraksiyonlar daha sonra absorbans okumalarına göre toplanır. Daha sonra her bir fraksiyon analitik bir HPLC yoluyla analiz edilerek her bir fraksiyonun saflığının gerekli saflık spesifikasyonunu karşıladığından emin olunur..

Bu "saf" fraksiyonlar daha sonra bir araya toplanır ve liyofilize edilir. Daha sonra "saf" toz, doğru peptidin üretildiğinden emin olmak için hem saflık hem de kimlik açısından test edilir..

Nihayet, AnaSpec'teki bağımsız bir Kalite Kontrol grubu, tüm test özelliklerinin gerekli spesifikasyonları karşıladığından emin olmak için peptidi tekrar test eder.


Dizi termini için kullanılan uluslararası isimlendirme aşağıdaki gibidir:

– N-ucu: H serbest amin anlamına gelir (NH2-), Ac asetil anlamına gelir [CH3C(O)-NH-], Pyr, piroglutamik asit anlamına gelir
– C terminali: OH serbest asit anlamına gelir (-COOH), NH2 amid anlamına gelir [-CONH2]

– Amino asitlerin yan zincirindeki değişiklikler, karşılık gelen amino asitten sonra parantez içinde gösterilmiştir.. Örneğin; fosforile serin = S(PO3H2) veya epsilon-N-asetillenmiş lizin = K(Ac)


Peptit üretimi sırasında, Sentez ve saflaştırma çözeltilerindeki iyonlar, peptidin yüklü amino asit yan zincirlerine bağlanır, tuz oluşturma. Bu iyonlar peptid karşı iyonları olarak bilinir ve peptidin yükünü dengelemeye yardımcı olur..

Trifloroasetik asit (TFA) Peptid sentezinde ve saflaştırılmasında yaygın olarak kullanılır.

Bazik amino asitlerle trifloroasetat tuzları oluşturur (örneğin, lizin, arginin, histidin) ve serbest N-terminal amini. Öyleyse, trifloroasetat tipik olarak varsayılan karşı iyondur.

Bir peptite bağlanan minimum TFA molekülü sayısı, belirli bir peptit dizisindeki bazik kalıntıların sayısıyla orantılıdır. Böylece, bir peptidde ne kadar çok bazik kalıntı mevcutsa, Liyofilize tozun net peptid içeriği ne kadar düşükse. Numunede mevcut olan TFA veya su içeriğini hesaba katmak için, her özel peptit için bir peptit içeriği tahlili yapılmasını öneririz.

Su ve trifloroasetik asit (TFA) saflaştırma işleminin yan ürünleridir. Fakat, TFA aşağıdakiler için toksisite endişelerini artırabilir: canlı ve klinik öncesi çalışmalar. Öyleyse, MOL Changes toksik olmayan asetat sunuyor, klorür, veya amonyum tuzu değiştiriciler.


Cys içeren peptidler, Buluştu, veya Trp'nin yüksek saflıkta ürünleri sentezlemesi ve elde etmesi zordur. Bunun temel nedeni bu fonksiyonel grupların kararsızlığı ve oksidasyona yatkınlığıdır.. Flakonların tekrar tekrar açılmasını önlemek için bu peptidlerin kullanımı ve saklanmasına özel dikkat gereklidir..

Sorunuzu kaçırdık mı?? Bize bir satır bırakın ve yapacağız
içeri geri dön 24 saat.

 

Ev Aramak Whatsapp Hizmetler Ürün