Hvad er peptidbiotinylering?

Myeloid specifik human CD33 er en hæmmende receptor med differentiel ITIM-funktion til at rekruttere fosfataserne SHP-1 og SHP-2

CD33 er et myeloid specifikt medlem af sialinsyre-bindende receptorfamilien og udtrykkes højt på myeloid stamceller, men i meget lavere niveauer i differentierede celler. Human CD33 har to tyrosinrester i sit cytoplasmatiske domæne (Y340 og Y358). Når fosforyleret, disse tyrosiner kunne fungere som dockingsteder for fosfataserne, SHP-1 og/eller SHP-2, gør det muligt for CD33 at fungere som en hæmmende receptor. Her demonstrerer vi, at CD33 er tyrosin-phosphoryleret i nærvær af fosfataseinhibitoren, pervanadat, og rekrutterer SHP-1 og SHP-2. Co-ekspressionsundersøgelser tyder på, at Src-familiens kinase Lck er effektiv til at fosforylere Y340, men ikke Y358, tyder på, at disse rester kan fungere i den selektive rekruttering af adaptormolekyler og have forskellige funktioner. Yderligere støtte til overlapning, men ikke overflødig, roller for Y340 og Y358 kommer fra peptidbindingsundersøgelser, der afslørede rekruttering af både SHP-1 og SHP-2 til Y340, men kun SHP-2 til Y358. Analyse under anvendelse af mutanter af SHP-1 viste, at binding af Y340 af CD33 primært var til amino Src homologi-2 domænet af SHP-1. CD33's potentiale til at fungere som en hæmmende receptor blev demonstreret ved dets evne til at nedregulere CD64-induceret calciummobilisering i U937. Afhængigheden af ​​denne inhibering af SHP-1 blev demonstreret ved at blokere CD33-medierede effekter med dominerende negativ SHP-1. Dette resultat antyder, at CD33 er en hæmmende receptor, og også at SHP-1-phosphatase har en væsentlig rolle i at mediere CD33-funktion. Yderligere undersøgelser er afgørende for at identificere receptoren(s) at CD33 hæmmer in vivo og dets funktion i myeloid afstamning udvikling.