Bước chân 1: Xác định đơn vị sao chép trước khi bạn đọc bất kỳ số nào
Nhà cung cấp peptide tùy chỉnh Protein Spps Câu hỏi đầu tiên không phải là “RSD là gì” mà là “cái gì đã được nhân rộng”. ICH Q2(R2) xác định độ chính xác ở ba cấp độ, và mỗi cấp độ có đơn vị sao chép riêng: độ lặp lại là độ chính xác trong cùng điều kiện vận hành trong khoảng thời gian ngắn, độ chính xác trung gian là sự thay đổi trong phòng thí nghiệm qua những thay đổi điển hình, và độ tái lập là độ chính xác giữa các phòng thí nghiệm được thiết lập bằng thử nghiệm liên phòng thí nghiệm (Tôi quý 2(R2), được thông qua 1 Tháng mười một 2023). Một nhà cung cấp gửi một RSD mà không nêu tên cấp độ đã gửi cho bạn một số mà bạn không thể đặt.
Đếm những gì bạn được nhận so với mức tối thiểu được công bố. Độ lặp lại phải được đánh giá bằng cách sử dụng tối thiểu 9 các quyết định bao gồm phạm vi báo cáo, chẳng hạn như 3 nồng độ với 3 sao chép từng, hoặc tối thiểu 6 quyết định tại 100% nồng độ thử nghiệm (Tôi quý 2(R2), §3.3.2.1). Đối với độ chính xác trung gian, các yếu tố thay đổi là những ngày khác nhau, điều kiện môi trường, nhà phân tích và thiết bị, có liên quan, và hướng dẫn rõ ràng khuyến khích thiết kế các thí nghiệm thay vì nghiên cứu từng yếu tố một cách riêng biệt (Tôi quý 2(R2), §3.3.2.2).
Khả năng tái tạo là cấp độ được yêu cầu nhiều nhất và ít được thực hiện nhất. Tôi quý 2(R2) tuyên bố rằng độ tái lập được đánh giá bằng thử nghiệm liên phòng thí nghiệm và việc điều tra độ tái lập thường không cần thiết để nộp quy định, nhưng cần được xem xét khi quy trình được chuẩn hóa, có trong dược điển, hoặc tiến hành ở nhiều địa điểm (Tôi quý 2(R2), §3.3.2.3). Sự khác biệt không mang tính học thuật. Trong một nghiên cứu về oxytocin được tiến hành ở nhiều quốc gia, đã đạt được %RSD giữa các phòng thí nghiệm 2.3% bằng xét nghiệm HPLC, 4.73% bởi qNMR và 5.44% bằng phân tích axit amin, trong khi %RSD giữa mẫu với mẫu trong phòng thí nghiệm là 0.7%, 1.85% Và 1.78% tương ứng (Li và cộng sự., J Pharm Biomed Hậu Môn 166, 2019). Khoảng cách giữa hai bộ số liệu này là độ không đảm bảo đo mà một con số về độ tinh khiết của một phòng thí nghiệm đơn lẻ ẩn giấu..
Lý do không thể trích dẫn ngưỡng từ hướng dẫn là có chủ ý. Tôi quý 2(R2) không đặt ra giới hạn độ chính xác số phổ quát; tiêu chí chấp nhận phải được xác định trước và chứng minh từ mục đích của thủ tục, phạm vi báo cáo, sản phẩm, sự biến đổi phân tích và đặc điểm kỹ thuật quy định (Tôi quý 2(R2)). Một số liệu chính xác không có đơn vị sao chép của nó không phải là một tuyên bố không chắc chắn, và một tiêu chí không có cơ sở xác định thì không phải là tiêu chí chấp nhận.
Bước chân 2: Hỏi phương pháp này tác động như thế nào đến mẫu trước khi nó đến máy dò
Một số tạp chất mà phương pháp báo cáo có thể được tạo ra bởi chính phương pháp đó. MỘT 2024 Bài viết về phương pháp Hóa phân tích nêu rõ tiền đề: tăng nhiệt độ cột giúp cải thiện khả năng phân tách sắc ký của peptide, nhưng nhiệt độ cao gây ra những biến đổi nhân tạo làm ảnh hưởng đến chất lượng phân tích peptide, và các sửa đổi trong cột có thể nâng cao sai mức của một số thuộc tính chất lượng quan trọng (Starovoit và cộng sự., hậu môn. Chem. 96(36), 2024). Đó là khung phân tích peptide phân hủy trong cột: vấn đề không phải là cột có nóng không, nhưng liệu phương pháp đó có kiểm soát được nhiệt lượng hay không.
Bài báo cũng chứng minh một điều khiển trông như thế nào. Cột bẫy nội tuyến ngắn được giữ ở nhiệt độ gần bằng nhiệt độ môi trường ở thượng nguồn của cột phân tách được làm nóng đã tăng công suất cực đại lên 1,4 lần trong vòng 110 phút ánh xạ peptit trastuzumab, đã giao hàng 10% nhiều nhận dạng peptide hơn, và giảm các hiện vật liên quan đến nhiệt độ bằng cách 66% cho pyroGlu đầu cuối N và 63% đối với Met bị oxy hóa so với phun trực tiếp ở 60 °C (Starovoit và cộng sự., hậu môn. Chem. 96(36), 2024). Việc cắt giảm là khả năng thực hiện được: một thay đổi được ghi lại để loại bỏ một phần xác định của sửa đổi do đo lường tạo ra.
Cơ chế đằng sau hiện vật là hiệu ứng thời gian cư trú, và cùng một nguyên lý vật lý chi phối việc lưu giữ. Trong LC peptide pha đảo, Vùng kỵ nước của peptide hấp phụ vào pha liên kết cho đến khi nồng độ dung môi đạt đến điểm giải hấp, và tạp chất ion kim loại trong hệ thống gây ra hiện tượng mất đuôi và độ phân giải cực đại (Carr, Hướng dẫn của ACE về HPLC pha đảo của Protein và Peptide, hướng dẫn kỹ thuật không ghi ngày tháng). Mức tạp chất được báo cáo mà không có biện pháp kiểm soát sự phân hủy không được chứng minh là thuộc tính của mẫu chứ không phải là thuộc tính của thiết bị. Lưu ý giới hạn của bằng chứng: bài báo báo cáo việc giảm hiện vật, không phải là tốc độ suy thoái trong cột cơ sở, vì vậy không thể trích dẫn phần trăm tổn thất cho mỗi lần tiêm từ nó.
Bước chân 3: Thiết kế thí nghiệm phân hủy mà bạn đang yêu cầu
Đây là bước bạn ngừng đánh giá và bắt đầu chỉ định. Một thiết kế nhân rộng khả thi tồn tại trong tài liệu: mỗi thư viện được kiểm tra ba lần, mỗi lần ba lần với ba lần lặp lại kỹ thuật cho 27 giếng theo điều kiện, lấy mẫu vào giờ 0, 1, 4, 8, 24 Và 48 trùng lặp, với một phần được đo ngay lập tức và phần còn lại được đông lạnh ở -80 °C, và chất chuẩn nội có diện tích pic duy trì trên 92% của 0 h đạt đỉnh điểm tại 48 h (Rozan, Moghaddam, Tiếng pashuck, J Biomed Mater Res A, in sẵn 2024, phiên bản được đánh giá ngang hàng 2025). Cấu trúc đó là yếu tố giúp cho yêu cầu xuống cấp có thể được theo dõi, bởi vì mọi giá trị được báo cáo đều ánh xạ tới một cái giếng, một mốc thời gian và một phần.
Sử dụng thí nghiệm phân hủy được trích dẫn làm ví dụ, không phải là mẫu bắt buộc. Chọn chế phẩm độc lập, lặp lại kỹ thuật, điểm thời gian và tiêu chí chuẩn nội dựa trên động học dự kiến, độ chính xác và phục hồi. Phân biệt một quan sát được >92% tín hiệu từ ngưỡng chấp nhận có thể được chứng minh.
|
Cánh đồng |
Ví dụ đã xuất bản, không phải là tiêu chí chấp nhận |
Chế độ thất bại nếu vắng mặt |
|---|---|---|
|
Sao chép cấu trúc |
3 chạy × 3 nhân rộng × 3 lặp lại kỹ thuật |
Không có cơ sở cho RSD đã nêu |
|
Các mốc thời gian |
0, 1, 4, 8, 24, 48 h, Nhà máy Polypeptide tổng hợp phần trùng lặp |
Tốc độ xuống cấp không thể được trang bị Nhà sản xuất peptide S |
|
Xử lý phần dịch |
Một người đo ngay lập tức, một cái đông lạnh ở −80 °C |
Mất mát lưu trữ không thể phân biệt được với sự xuống cấp |
|
Tiêu chí chuẩn nội bộ |
Diện tích đỉnh >92% của 0 h tại 48 h |
Mất chất phân tích không thể tách rời khỏi mất tín hiệu |
|
Mẫu trắng và mẫu căng thẳng |
Bao gồm tại mỗi thời điểm |
Các đỉnh do phương pháp tạo ra được báo cáo là tạp chất của mẫu |
|
Kiểm soát cột mới |
Cùng một lô, cột mới |
Lịch sử cột bị nhầm lẫn với mẫu |
|
Lô cột thay thế |
Lô thứ hai, Tổng hợp peptide cố định cùng một phương pháp |
Hiệu ứng lô vô hình |
|
Xác nhận trực giao |
Kỹ thuật thứ hai trên một tập hợp con |
Tạo tác một phương pháp không bị thách thức |
Nghiên cứu oxytocin cho thấy tại sao tiêu chí loại trừ lại quan trọng như tiêu chí thu nhận. Kết quả phân tích axit amin của một phòng thí nghiệm đã bị vô hiệu do đáp ứng tiêu chuẩn axit amin không nhất quán, kết quả HPLC của một phòng thí nghiệm đã bị loại vì nó không thể thu được hàm lượng nước Karl Fischer ổn định, và một giá trị HPLC đã bị loại trừ dưới dạng giá trị ngoại lệ, nên số lượng phòng thí nghiệm có thể sử dụng được đã giảm xuống dưới con số ban đầu (Li và cộng sự., J Pharm Biomed Hậu Môn 166, 2019). Yêu cầu các loại trừ và lý do cho mỗi loại.
Mặt hồ sơ của cùng một yêu cầu được điều chỉnh bởi ALCOA+ và Phần 11. Hướng dẫn của MHRA coi tính toàn vẹn của dữ liệu là kết quả của vòng đời chứ không phải là danh sách kiểm tra: không có sự khác biệt về kỳ vọng bất kể từ viết tắt nào được sử dụng, vì các biện pháp quản trị dữ liệu phải đảm bảo dữ liệu được hoàn thiện, nhất quán, lâu dài và có sẵn trong suốt vòng đời dữ liệu, và dấu vết kiểm tra là việc tạo bản ghi siêu dữ liệu, sửa đổi hoặc xóa bản ghi GxP (Định nghĩa và hướng dẫn về tính toàn vẹn dữ liệu của MHRA GxP, Ôn tập 1, Bước đều 2018). Phần 11 yêu cầu an toàn, do máy tính tạo ra, dấu vết kiểm tra được đánh dấu thời gian không che khuất thông tin đã ghi trước đó, được giữ lại ít nhất trong thời gian hồ sơ chủ đề và có sẵn để cơ quan xem xét, cộng với việc bảo vệ hồ sơ để sẵn sàng truy xuất và kiểm tra thẩm quyền (21 Phần CFR 11, văn bản eCFR hiện tại). Đối với việc thẩm định gói dữ liệu CRO, yêu cầu bảng mỗi lần tiêm với rất nhiều, ID phương thức, truy xuất nguồn gốc cột và gradient, không phải là tóm tắt. Thư viện peptide tổng hợp
Bước chân 4: Xác định trước sự phù hợp của hệ thống thay vì chấp nhận nó sau khi thực tế
Xác định trước các thử nghiệm về tính phù hợp của hệ thống và tiêu chí chấp nhận bằng cách sử dụng chuyên khảo hiện hành, phương pháp và phiên bản tóm tắt. USP 31/NF được trích dẫn 26 văn bản mang tính lịch sử; ví dụ về tiêm lặp lại của nó không nên được trình bày như một quy tắc phổ biến hiện hành đối với HPLC peptide.
<lớp hình="biểu đồ blog" phong cách="chiều rộng tối đa:640px;lề:1.5rem tự động;cỡ chữ:12px;chiều cao dòng:1.3;màu sắc:kế thừa"> <svg viewBox="0 0 560 380" phong cách="chiều rộng tối đa: 100%; chiều cao: tự động; họ phông chữ: 'Chôn cất', hệ thống-ui, sans-serif; màu sắc: #1e293b; --biểu đồ bị tắt tiếng: #64748b;" vai trò="hình ảnh" aria-labelledby="usp-621-khả năng lặp lại-tiêm-đếm-tiêu đề usp-621-khả năng lặp lại-tiêm-đếm-desc"> <phong cách> /* Trình kết xuất đặt biểu đồ vào iframe có nền thành phần màu đen, và iframe có hình dạng khác với biểu đồ, vì vậy các dải hộp thư hiển thị dưới dạng khung màu đen xung quanh nó (sản phẩm 09-22). Theo mặc định, tài liệu bên trong iframe trong suốt; vẽ nó ở đây che phủ nền nguyên tố, và thay vào đó, khi biểu đồ được nội tuyến thì điều này không khớp với gì. Giữ dấu ngoặc nhọn ra khỏi khối này: một phần tử kiểu bên trong SVG được phân tích cú pháp dưới dạng nội dung nước ngoài, vì vậy một dấu ngoặc đơn sẽ loại bỏ mọi quy tắc trong đó. */ html, thân hình { lý lịch: #ffffff; lề: 0; } @phương tiện truyền thông (thích-giảm-chuyển động: giảm bớt) { * { hoạt hình: không có !quan trọng; chuyển tiếp: không có !quan trọng; } } </phong cách> <trực tràng x="0" y="0" chiều rộng="560" chiều cao="380" rx="8" điền="#ffffff" /> <id tiêu đề="usp-621-khả năng lặp lại-tiêm-đếm-tiêu đề">USP <621> số lần tiêm lặp lại</tiêu đề> <mô tả id="usp-621-khả năng lặp lại-tiêm-đếm-desc">USP <> số lần tiêm lặp lại, như được vẽ từ nguồn được trích dẫn. USP <621> số lần tiêm lặp lại. dữ liệu kẹo mút: Yêu cầu <= 2.0% 5; Yêu cầu > 2.0% 6.Nguồn: Chương chung USP <621> Sắc ký.</mô tả> <văn bản x="280.0" y="29" neo văn bản="ở giữa" cỡ chữ="18" trọng lượng phông chữ="800" điền="màu hiện tại">USP <621> số lần tiêm lặp lại</chữ> <dòng x1="145" y1="298.0" x2="510" y2="298.0" đột quỵ="màu hiện tại" độ mờ ="0.08" /> <dòng x1="145" y1="243.0" x2="510" y2="243.0" đột quỵ="màu hiện tại" độ mờ ="0.08" /> <dòng x1="145" y1="188.0" x2="510" y2="188.0" đột quỵ="màu hiện tại" độ mờ ="0.08" /> <dòng x1="145" y1="133.0" x2="510" y2="133.0" đột quỵ="màu hiện tại" độ mờ ="0.08" /> <dòng x1="145" y1="78.0" x2="510" y2="78.0" đột quỵ="màu hiện tại" độ mờ ="0.08" /> <văn bản x="136.0" y="137.0" neo văn bản="kết thúc" cỡ chữ="11" điền="màu hiện tại" độ mờ ="0.8"><tspan x="136.0" dy="0">Yêu cầu <=</tspan><tspan x="136.0" dy="12">2.0%</tspan></chữ> <dòng x1="145" y1="133.0" x2="449.2" y2="133.0" đột quỵ="màu hiện tại" độ mờ ="0.15" chiều rộng nét ="1" /> <vòng tròn cx="449.2" cy="133.0" r="6" điền="#f97316" /> <văn bản x="461.2" y="137.0" cỡ chữ="11" điền="màu hiện tại">5</chữ> <văn bản x="136.0" y="247.0" neo văn bản="kết thúc" cỡ chữ="11" điền="màu hiện tại" độ mờ ="0.8"><tspan x="136.0" dy="0">Yêu cầu ></tspan><tspan x="136.0" dy="12">2.0%</tspan></chữ> <dòng x1="145" y1="243.0" x2="510.0" y2="243.0" đột quỵ="màu hiện tại" độ mờ ="0.15" chiều rộng nét ="1" /> <vòng tròn cx="510.0" cy="243.0" r="6" điền="#38bdf8" /> <văn bản x="522.0" y="247.0" cỡ chữ="11" điền="màu hiện tại">6</chữ> <văn bản x="280.0" y="366" neo văn bản="ở giữa" cỡ chữ="10" điền="của chúng tôi(--biểu đồ bị tắt tiếng, màu hiện tại)">Nguồn: Chương chung USP <621> sắc ký</chữ> </svg> </nhân vật>
Chương này cũng giải quyết khi tính kết quả. Không có phân tích mẫu nào được chấp nhận trừ khi đáp ứng được các yêu cầu về tính phù hợp của hệ thống, và các phân tích mẫu thu được trong khi hệ thống không đáp ứng được các yêu cầu đó là không thể chấp nhận được (USP <621>). Khái niệm đằng sau các cuộc kiểm tra là thiết bị, thiết bị điện tử, Các hoạt động phân tích và mẫu tạo thành một hệ thống tích hợp được đánh giá như vậy (USP <621>). Đó là lý do tại sao lỗi phù hợp không phải là chú thích cuối trang cho gói dữ liệu; nó làm mất hiệu lực các mũi tiêm được thực hiện trong thời gian đó.
Hai điểm nữa bảo vệ bạn khỏi những tiêu chí có vẻ chính thống nhưng lại không. Đầu tiên, <621> không áp đặt giới hạn số phổ quát: nó xác định các tham số, bao gồm độ phân giải hoặc tỷ lệ đỉnh-thung lũng, độ lặp lại, yếu tố đối xứng hoặc đuôi, đĩa lý thuyết, hệ số lưu giữ và tín hiệu trên nhiễu khi có liên quan, và các giới hạn bằng số đến từ chuyên khảo riêng lẻ hoặc quy trình được xác nhận (USP <621>). Độ phân giải ≥1,5, đuôi 1,5 và RSD 2,0% lưu hành trong tài liệu của nhà cung cấp như thể chúng là yêu cầu phổ biến; họ không phải, và không tìm thấy nguồn dược điển chính nào cho các giới hạn số lượng dành riêng cho peptide. Thứ hai, nơi có nhiều hơn một đỉnh cao quan trọng, Hiệu suất của cột là phương tiện kém tin cậy hơn để đảm bảo độ phân giải so với phép đo trực tiếp (USP <621>), vì vậy số lượng tấm là bằng chứng yếu hơn so với độ phân giải đo được. Yêu cầu nhà cung cấp nêu tiêu chí về tính phù hợp của hệ thống đối với HPLC peptide trong phương pháp, với nguồn của mỗi giới hạn.
Bước chân 5: Sự xuống cấp riêng biệt trong lọ, Bộ lấy mẫu tự động, Pha động và kim phun khỏi sự phân hủy trong cột
Việc mất peptit nguyên vẹn không tự động trở thành đặc tính của mẫu. Các yếu tố điều khiển trong cột là nhiệt độ và thời gian lưu trú, và cả hai đều có thể kiểm soát được thông qua thiết kế phương pháp (Starovoit và cộng sự., hậu môn. Chem. 96(36), 2024). Bên ngoài cột, hành vi lưu giữ và ô nhiễm ion kim loại tạo ra sự mất chất đuôi và độ phân giải có thể bị nhầm lẫn với sự xuống cấp (Carr, Hướng dẫn ACE). Mỗi vị trí ứng cử viên cần có biện pháp kiểm soát phân biệt đối xử riêng trước khi bạn quy kết quả cho phân tử.
Sự mạnh mẽ là nơi mà những điều khiển đó thuộc về, và đó là một hoạt động phát triển. ICH Q14 định nghĩa độ bền là thước đo khả năng của quy trình nhằm đáp ứng các tiêu chí hiệu suất dự kiến trong quá trình sử dụng bình thường, được kiểm tra bằng các thay đổi có chủ ý của các thông số quy trình phân tích, và cần xem xét thời gian phân tích bao gồm cả độ ổn định của việc chuẩn bị mẫu và thuốc thử (Tôi Q14, được thông qua 1 Tháng mười một 2023). Hướng dẫn tương tự nêu rõ rằng đối với hầu hết việc đánh giá tính chắc chắn của quy trình được tiến hành trong quá trình phát triển và, nếu đã được thực hiện ở đó, không cần phải lặp lại trong quá trình xác nhận (Tôi Q14, §5.1). Nhà cung cấp không thể tạo ra dữ liệu về độ bền của quá trình phát triển hoặc đã không hoàn thành công việc hoặc đang giữ lại; cả hai câu trả lời đều hữu ích cho bạn.
Sự thay đổi giữa các hệ thống có thể đo lường được, và điểm chuẩn được công bố đã cũ. Ghi chú ứng dụng của nhà cung cấp về ánh xạ peptide trên ba hệ thống UPLC giống hệt nhau, một lần mỗi ngày với sáu mũi tiêm liên tiếp mỗi lần, báo cáo khả năng tái tạo thời gian lưu trong một hệ thống tốt hơn 0.3% RSD, độ lệch chuẩn giữa các hệ thống tốt hơn 0.20 phút cho các đỉnh đánh dấu, và %RSD diện tích đỉnh tốt hơn 3.3% trong một hệ thống và giữa 5.0% Và 6.3% trên tất cả các lần chạy (Lưu ý ứng dụng nước 720003175, Tháng bảy 2009). Hãy coi nó như một điểm chuẩn ngày tháng trên phương pháp lập bản đồ peptide, và lưu ý rằng nhà cung cấp bán các hệ thống đã được thử nghiệm. Giới hạn phạm vi quan trọng hơn số lượng: phòng thí nghiệm đơn, gói một cột không thể thiết lập khả năng tái lập giữa các phòng thí nghiệm, bất kể RSD nội bộ của nó là gì.
Bước chân 6: Yêu cầu báo cáo sự không chắc chắn kèm theo khoảng thời gian và tiêu chí chấp nhận của nó
RSD trần là một báo cáo không đầy đủ, và hướng dẫn nói như vậy. Độ chính xác phải được báo cáo là độ lệch chuẩn, độ lệch chuẩn tương đối, và một cách thích hợp 100(1-Một)% khoảng tin cậy hoặc khoảng thống kê thay thế hợp lý, và khoảng quan sát phải tương thích với tiêu chí chấp nhận độ chính xác tương ứng trừ khi có giải thích khác (Tôi quý 2(R2), Bước chân 5 ôn tập 2, §3.3.2.4). Cấu trúc tương tự áp dụng cho độ chính xác: báo cáo phần trăm thu hồi trung bình hoặc chênh lệch so với giá trị thực được chấp nhận với khoảng tin cậy tương thích với tiêu chí chấp nhận độ chính xác (Tôi quý 2(R2), §3.3.1.4).
Nghiên cứu oxytocin cho thấy một khoảng có tác dụng gì mà ước tính điểm không thể làm được. Giá trị trung bình qNMR là 1.798 mg với một 95% khoảng tin cậy của 1.707 ĐẾN 1.888 mg, và ý nghĩa phân tích axit amin là 1.73 mg với một 95% khoảng tin cậy của 1.580 ĐẾN 1.884 mg (Li và cộng sự., J Pharm Biomed Hậu Môn 166, 2019). Ba phương pháp hội tụ về các giá trị trung tâm có thể so sánh được, 1.807 mg bằng HPLC, 1.798 mg bằng qNMR và 1.73 mg của AAA, trong khi khác biệt đáng kể về độ chính xác, đó là một ví dụ hoạt động của các phương pháp trực giao đồng ý về giá trị trung tâm và không đồng ý về độ không chắc chắn.
Đọc khoảng theo một tiêu chí, và đọc tiêu chí dựa trên cơ sở của nó. Vì ICH Q2(R2) không đặt ra giới hạn độ chính xác số phổ quát, tiêu chí chấp nhận phải được xác định trước và chứng minh từ mục đích của thủ tục, phạm vi báo cáo, sản phẩm, sự biến đổi phân tích và đặc điểm kỹ thuật quy định, và giao thức xác nhận phải nêu rõ mục đích dự định, đặc tính hiệu suất, thiết kế thí nghiệm và tiêu chí (Tôi quý 2(R2)). Một khoảng không có tiêu chí bên cạnh thì không thể đánh giá được, và một tiêu chí không có cơ sở xác định thì không thể được bảo vệ trong hồ sơ. Nơi bằng chứng dừng lại: không có nguồn nào trong cơ sở bằng chứng này cung cấp tiêu chí chấp nhận bằng số dành riêng cho peptide, vì vậy tiêu chí phải đến từ đặc điểm kỹ thuật của bạn và phương pháp của nhà cung cấp, không phải từ một hướng dẫn.
Bước chân 7: Kiểm tra xem hồ sơ đã được kết nối và sẵn sàng kiểm tra chưa
Chuỗi bản ghi là một phần của gói dữ liệu, và việc thực thi cho thấy những gì vi phạm. MỘT 2025 thư cảnh báo gửi tới phòng thí nghiệm thử nghiệm theo hợp đồng phát hiện ra rằng Đơn vị Chất lượng đã không đảm bảo thiết lập quyền truy cập hạn chế và các biện pháp kiểm soát thích hợp trên hệ thống máy tính để ngăn chặn khả năng thay đổi hoặc xóa dữ liệu của phòng thí nghiệm, và không kiểm soát được tài liệu chuẩn bị mẫu (Thư cảnh báo của FDA 320-25-101, 20 Tháng tám 2025, phát hiện theo FD&Đạo luật C 501(Một)(2)(B)). MỘT 2026 thư cảnh báo được tìm thấy đã bị loại bỏ các hồ sơ sắc ký bị rách và bảng tính xác nhận phương pháp tạp chất trong khi hồ sơ chính thức chỉ chứa các giá trị viết tay, và nhân viên ghi lại những quan sát vào nhật ký cá nhân không được kiểm soát (Thư cảnh báo của FDA MARCS-CMS 720463, 3 Bước đều 2026, trích dẫn 21 CFR 211.22 Và 211.192). Đây là những trường hợp có tên, không phải là một tỷ lệ; không có tỷ lệ công bố chính thức nào về phát hiện tính toàn vẹn dữ liệu trong các cuộc kiểm tra CRO được xác minh.
Các biện pháp kiểm soát mà những phát hiện đó đưa ra là cụ thể. Phần 11 yêu cầu xác nhận hệ thống để đảm bảo độ chính xác, độ tin cậy, hiệu suất dự kiến nhất quán và khả năng phân biệt các hồ sơ không hợp lệ hoặc bị thay đổi, kiểm tra chính quyền để chỉ những cá nhân được ủy quyền mới có thể thay đổi hồ sơ, và chữ ký thể hiện tên in, ngày và giờ, và ý nghĩa (21 Phần CFR 11, §11.10(Một), §11.10(g), §11.50(Một)). MHRA cho biết thêm rằng việc hoàn nguyên từ hệ thống máy tính sang hệ thống trên giấy hoặc ngược lại không loại bỏ nhu cầu kiểm soát tính toàn vẹn dữ liệu, rằng các dấu vết kiểm tra được xác định bằng đánh giá rủi ro phải được bật và người dùng không thể sửa đổi hoặc tắt chúng, và đó là nơi dữ liệu được ghi lại ở trạng thái điện tử động, bản sao giấy không thể được coi là dữ liệu thô (Định nghĩa và hướng dẫn về tính toàn vẹn dữ liệu của MHRA GxP, Ôn tập 1, Bước đều 2018). Do đó, sắc ký đồ PDF là một báo cáo, không phải dữ liệu thô, khi việc mua lại cơ bản là điện tử.
Một mắt xích trong chuỗi không được thiết lập bởi những nguồn này. Bằng chứng về chất lượng dụng cụ đằng sau sắc ký đồ, đánh giá hệ thống hỗ trợ quá trình kiểm tra và hồ sơ mua lại, được nêu tên trong kế hoạch đánh giá nhưng nội dung chương dược điển liên quan không được đọc trong cơ sở bằng chứng này, vì vậy hãy coi chất lượng của nhạc cụ như một câu hỏi để hỏi hơn là một tiêu chí để trích dẫn. Yêu cầu trạng thái đủ điều kiện của công cụ cụ thể tạo ra dữ liệu, cùng với trích xuất dấu vết kiểm tra.
Câu hỏi thường gặp
Liệu gói phòng thí nghiệm đơn lẻ có thiết lập được khả năng tái lập không?
KHÔNG. Độ tái lập là phép đo giữa các phòng thí nghiệm, và hướng dẫn nêu rõ thời điểm dự kiến thực hiện công việc liên phòng thí nghiệm: khi một quy trình được chuẩn hóa, được đưa vào dược điển, hoặc chạy ở nhiều trang web (Tôi quý 2(R2), §3.3.2.3). Một phòng thí nghiệm có thể hiển thị khả năng lặp lại, và nó có thể hiển thị độ chính xác trung gian nếu nó cố tình thay đổi ngày, nhà phân tích và thiết bị (Tôi quý 2(R2), §3.3.2.2). Nó không thể hiển thị thỏa thuận giữa các phòng thí nghiệm, vì vậy một gói có nhãn "khả năng tái tạo" không bao giờ rời khỏi một địa điểm sẽ bị dán nhãn sai.
Tôi nên mong đợi bao nhiêu lần tiêm lặp lại đối với phương pháp tinh khiết HPLC peptide?
Xác định các lần tiêm lặp lại từ phương pháp hiện hành và các yêu cầu bổ sung. Tiêm phù hợp với hệ thống, Việc chuẩn bị mẫu độc lập và xác định phương pháp xác thực phục vụ các mục đích khác nhau và không được tính thay thế cho nhau.
Tôi có thể sử dụng kỹ thuật phân tích khác thay vì HPLC không?
Chọn kỹ thuật dựa trên thuộc tính và sự không chắc chắn dự định. Nghiên cứu liên phòng thí nghiệm oxytocin được trích dẫn báo cáo kết quả cho vật liệu của nó, phòng thí nghiệm và phương pháp; nó không xếp hạng độ chính xác mong đợi của HPLC, phân tích qNMR và axit amin cho mỗi peptide.
Tôi nên làm gì nếu CRO báo cáo mức tạp chất không có biện pháp kiểm soát phân hủy?
Coi số này là chưa được chỉ định cho đến khi bộ điều khiển tách mẫu khỏi phương pháp. Chỉ riêng điều kiện cột có thể tạo ra đỉnh: Tại 60 °C, một cột bẫy nội tuyến gần xung quanh đã cắt các tạo phẩm pyroGlu đầu cuối N bằng cách 66% và các tạo tác Met bị oxy hóa bởi 63% so với tiêm trực tiếp (Starovoit và cộng sự., hậu môn. Chem. 96(36), 2024). Đó là câu hỏi phân tích peptide phân hủy trong cột trong thực tế. Nếu không có sự kiểm soát tương đương, tạp chất chưa được chứng minh là thuộc về lô.
Bản sao giấy của sắc ký đồ có được chấp nhận làm dữ liệu thô không?
KHÔNG, nơi dữ liệu được thu thập bằng điện tử. MHRA cho rằng thông tin ban đầu được ghi lại ở trạng thái động sẽ vẫn có sẵn ở trạng thái đó, và rằng bản sao giấy của dữ liệu động được tạo bằng điện tử không thể được coi là dữ liệu thô (Định nghĩa và hướng dẫn về tính toàn vẹn dữ liệu của MHRA GxP, Ôn tập 1, Bước đều 2018). Phần 11 yêu cầu các bản sao chính xác và đầy đủ ở cả dạng người có thể đọc được và dạng điện tử phù hợp để kiểm tra (21 Phần CFR 11, §11.10(b)). Yêu cầu hồ sơ điện tử với dấu vết kiểm toán của nó, không phải là quét.
Chi phí để thêm mức độ bằng chứng này là bao nhiêu?
Không có con số chi phí được xác minh nào tồn tại trong cơ sở bằng chứng này, vì vậy câu trả lời trung thực là chi phí là một quyết định thiết kế chứ không phải là một chi tiết đơn hàng. Các trình điều khiển có thể đếm được: một thiết kế xuống cấp đã được công bố được sử dụng 27 giếng cho mỗi điều kiện trên sáu mốc thời gian với các phần trùng lặp (Rozan, Moghaddam, Tiếng pashuck, J Biomed Mater Res A), và xác nhận phương pháp phân tích peptide đầy đủ hơn sẽ thêm lô cột thứ hai, một tập hợp con xác nhận trực giao, và trích xuất dấu vết kiểm tra. Yêu cầu nhà cung cấp định giá riêng cấu trúc sao chép và các bộ điều khiển, để bạn có thể xem mỗi người mua gì.
Phần kết luận
Đánh giá rút gọn thành quy tắc quyết định mà bạn có thể áp dụng trong đánh giá hợp tác. Yêu cầu đặt tên cho đơn vị sao chép trước khi bạn đọc bất kỳ số liệu chính xác nào, và đếm nó với ICH Q2(R2) tối thiểu của 9 các quyết định trong phạm vi có thể báo cáo hoặc 6 Tại 100% nồng độ thử nghiệm (Tôi quý 2(R2), §3.3.2.1). Yêu cầu số liệu chính xác đến với một 100(1-Một)% khoảng tin cậy và tiêu chí chấp nhận mà nó được đánh giá dựa trên (Tôi quý 2(R2), §3.3.2.4). Yêu cầu nêu rõ các tiêu chí về sự phù hợp của hệ thống và số lần tiêm trong phương pháp, vì vậy quy tắc năm đấu sáu trong USP <621> có thể được kiểm tra (USP <621>). Yêu cầu biện pháp kiểm soát phân hủy để tách thành phần lạ trong cột và trên hệ thống khỏi quá trình phân hủy mẫu, và yêu cầu bảng mỗi lần tiêm có rất nhiều, phương pháp, truy xuất nguồn gốc cột và gradient thay vì tóm tắt. Yêu cầu dấu vết kiểm toán và hồ sơ điện tử, bởi vì bản sao giấy không phải là dữ liệu thô khi việc thu thập được thực hiện dưới dạng điện tử (Định nghĩa và hướng dẫn về tính toàn vẹn dữ liệu của MHRA GxP, Ôn tập 1, Bước đều 2018). Nếu một gói không thành công bất kỳ trong số này, thất bại là một khoảng trống bạn có thể nêu tên trong đánh giá chứ không phải là một nghi ngờ mà bạn phải tranh luận. Bước tiếp theo là đặt bảng thông số kỹ thuật từ Bước 3 vào yêu cầu đề xuất và yêu cầu một ví dụ gói dữ liệu đáp ứng nó.
